83] 流動(dòng)相:pH2.5~3.5的Ξ乙胺憐酸溶液-乙臘，體積比為30:70~50:50;其中抑2.5 ~3.5的Ξ乙胺憐酸溶液是由Ξ乙胺-憐酸緩沖對(duì)組成，1000份水加1~3份Ξ乙胺得到Ξ乙 胺溶液，W憐酸調(diào)節(jié)抑為2.5~3.5;
[0084] 流速:0.8~1.2mL/min(優(yōu)選流速1. OmL/min);
[0085] 柱溫:25~35攝氏度，優(yōu)選30°C;
[0086] 檢測(cè)波長(zhǎng):采用多波長(zhǎng)檢測(cè)，分別選擇各雜質(zhì)的最大吸收波長(zhǎng)進(jìn)行有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)、 驗(yàn)證。醋酸烏利司他：30化m;雜質(zhì)A:259皿;雜質(zhì)B:234nm;雜質(zhì)C:241皿;雜質(zhì)D:30化m;雜質(zhì) E: 304nm;雜質(zhì)F: 328nm;雜質(zhì)G: 25；3nm;雜質(zhì)H: 26化m;雜質(zhì)1: 256nm;雜質(zhì)J:261nm;雜質(zhì)K: 299nm。
[0087] 固定相：W十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑
[0088] 更一步優(yōu)選的，所述HPLC-MS所采用的條件為：
[0089] 色譜條件為：流動(dòng)相：0.05 %~0.5 %HAc/水：乙臘=(75~80): (25~20);優(yōu)選 0.1%齡(：/水，與乙臘比例優(yōu)選78:22
[0090] 流速:0.1 ~0.5ml/min，優(yōu)選0.3ml/min;柱溫：20~40°C，優(yōu)選30°C
[0091] 質(zhì)譜條件為:采用選擇性離子監(jiān)測(cè)（（SIM)法
[0092] 干燥氣溫度:300~400°C，優(yōu)選350°C
[0093] 載氣流速:8~12L/min，優(yōu)選lOL/min
[0094] 霧化氣壓力：30~50psi，優(yōu)選40psi [00巧]毛細(xì)管電壓:4000V
[0096] 作為本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式，提供了上述雜質(zhì)B或C作為雜質(zhì)對(duì)照品在醋酸烏利 司他及其制劑的有關(guān)物質(zhì)檢查的質(zhì)量分析中的應(yīng)用，其中所述的醋酸烏利司他及其雜質(zhì)的 檢測(cè)方法優(yōu)選為HPLC法，HPLC檢測(cè)條件如下：
[0097] 固定相：W十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑
[009引流動(dòng)相:pH3.0的Ξ乙胺憐酸溶液一乙臘，體積比為40:60;其中抑3.0的^乙胺憐 酸溶液是由Ξ乙胺-憐酸緩沖對(duì)組成，1000份水加2份Ξ乙胺，W憐酸調(diào)節(jié)抑為3.0;
[0099] 流速:0.8~1.2mL/min(優(yōu)選流速1. OmL/min);
[0100] 柱溫:25~35攝氏度，優(yōu)選30°C;
[0101] 檢測(cè)波長(zhǎng)：250 ~270nm，優(yōu)選237nm。
[0102] 理論板數(shù)按醋酸烏利司他峰計(jì)算應(yīng)不小于2000
[0103] 檢測(cè)波長(zhǎng):紫外掃描顯示，各雜質(zhì)及主成分最大吸收波長(zhǎng)如下：
[0104] 醋酸烏利司他:303皿;雜質(zhì)A: 259皿;雜質(zhì)B: 234皿;雜質(zhì)C: 241皿;雜質(zhì)D: 303皿;雜 質(zhì)E: 304nm;雜質(zhì)F: 328nm;雜質(zhì)G: 25；3nm;雜質(zhì)H: 26化m;雜質(zhì)1:256nm;雜質(zhì)J:261nm;雜質(zhì)K: 299nm，綜合考慮，采用多波長(zhǎng)檢測(cè)，分別選擇各雜質(zhì)的最大吸收波長(zhǎng)進(jìn)行有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)、驗(yàn) 證。
[01化]實(shí)驗(yàn)操作：
[0106]分別稱取醋酸烏利司他對(duì)照品及雜質(zhì)A、B、C、D、E、F、G、H、I、J、K對(duì)照品各適量，加 流動(dòng)相溶解并稀釋制成每1ml中分別含醋酸烏利司他、雜質(zhì)A、B、C、D、E、F、G、H、I、J、K各約 20U g的混合溶液，作為系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液。精密量取系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液lOul注入液相 色譜儀，記錄色譜圖，醋酸烏利司他及各雜質(zhì)峰相互間的分離度應(yīng)符合要求，理論板數(shù)按醋 酸烏利司他峰計(jì)算應(yīng)不小于2000。
[0107] 測(cè)定法
[0108] 精密稱取本品lOmg，置20ml量瓶中，用流動(dòng)相溶解，并稀釋至刻度，搖勻，作為供試 品溶液。精密量取供試品溶液1ml置100ml量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶 液。量取對(duì)照溶液1〇μ1，注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度使主成分色譜峰的峰高為滿量程 的10-20%。再精密量取供試品溶液10μ1，注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí) 間的3倍。
[0109] 各雜質(zhì)重點(diǎn)研究檢測(cè)波長(zhǎng)： Γηιιη?
[0111] 供試品溶液的色譜圖中如有雜質(zhì)峰，W峰面積計(jì)算，與各雜質(zhì)相對(duì)應(yīng)的峰各不得 大于對(duì)照溶液的0.15倍(即雜質(zhì)含量不超過(guò)0.15% );其他任一單個(gè)雜質(zhì)峰均不得大于對(duì)照 溶液的0.15倍（即雜質(zhì)含量不超過(guò)0.15%)，總雜質(zhì)不得超過(guò)1.0(即總雜質(zhì)含量不得超過(guò) 1.0 % )，小于對(duì)照溶液主峰面積0.05倍(即含量小于0.05 %)的峰忽略不計(jì)。
[0112] 本發(fā)明提供的上述醋酸烏利司他有關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)的方法的優(yōu)點(diǎn)是測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確 可靠，專(zhuān)屬性強(qiáng)，實(shí)用性強(qiáng)，各雜質(zhì)能有效檢出，且醋酸烏利司他及各雜質(zhì)間均達(dá)到良好分 離，采用該系統(tǒng)可檢測(cè)多種雜質(zhì)。
[0113] 上述方法同樣適用醋酸烏利司他制劑的有關(guān)物質(zhì)分析。
【附圖說(shuō)明】：
[0114] 圖1:醋酸烏利司他及雜質(zhì)分離度圖譜
[0115] 圖2:醋酸烏利司他檢測(cè)圖譜
[0116] 圖3雜質(zhì)B的HPLC測(cè)定線性關(guān)系圖
[0117] 圖4:雜質(zhì)C的HPLC測(cè)定線性關(guān)系圖
【具體實(shí)施方式】
[0118] 實(shí)施例1:醋酸烏利司他的制備
[0119] 將3,20-雙縮酬（100旨，0.25111〇1)，二氯甲燒（比），化晚（51111)、^水六氣丙酬（201111， 143mmo 1)，冷卻至-10-0°C，滴加50 %雙氧水（70ml，1.44mo 1)，于-5-5°C反應(yīng)2-化原料消失 后，分出有機(jī)相，水相用二氯甲燒萃取兩次合并，用10%硫代硫酸鋼水溶液（10ml)洗涂一 次，有機(jī)相水洗兩次(50ml *2 )，無(wú)水硫酸儀干燥，過(guò)濾，減壓濃縮至恒重約200ml。
[0120] 將Mg(9.6g，0.4mo 1)，1，2-二漠乙燒（1ml)和THF(50ml)加入Ξ 口燒瓶，滴加4-漠- N，N-二甲基苯胺（71g，0.35mol)和THF(200ml)溶液，加熱引發(fā)反應(yīng)后保持回流下滴加，加 畢，于50-60°C攬拌反應(yīng)化得到格氏試劑，冷卻至25°C，加入氯化亞銅(3g，30mmo 1)，25°C攬 拌30分鐘后，冷卻下滴加上述環(huán)氧化物的二氯甲燒溶液，保持溫度10-20°C，加畢保溫?cái)埌?2h，倒入冰的500ml飽和的畑此1水溶液中，攬拌10分鐘，分出有機(jī)相，水相用二氯甲燒萃取 400ml巧次，有機(jī)相合并，加入1000ml2N肥1溶液。于25°C下攬拌化，分出有機(jī)相，水相用二 氯甲燒萃取200ml*3，合并有機(jī)相，依次用飽和碳酸氨鋼水溶液，水各洗一次，無(wú)水硫酸儀干 燥，過(guò)濾，濾液轉(zhuǎn)入反應(yīng)瓶中，加入冰醋酸（18ml ,315mmol)，冷卻至-10~0°C，加入70%高氯 酸（24ml，295mmol)，然后攬拌下于-10~0°C滴加醋酢（140ml，1.49mol)，保溫?cái)埌?0分鐘 后，水相用二氯甲燒萃取兩次200ml*3,合并，依次用飽和碳酸氨鋼水溶液，水各洗一次，無(wú) 水硫酸儀干燥，過(guò)濾，減壓濃縮至干約llOg，經(jīng)用10倍量異丙醇：乙醇(95:5)重結(jié)晶得到淺 黃色結(jié)晶61.2g，重結(jié)晶母液濃縮干得固體，待用。產(chǎn)物再次用異丙醇：乙醇(95:5)重結(jié)晶， 60°C烘干得到淺黃色結(jié)晶的產(chǎn)物，重結(jié)晶母液濃縮干得固體，待用。
[0121 ]實(shí)施例2:雜質(zhì)化合物的制備
[0122] 將醋酸烏利司他的制備過(guò)程中所得重結(jié)晶母液濃縮至干得到固體，此固體中含較 高比例雜質(zhì)，將此固體經(jīng)高壓制備液相純化、處理可得到高純的的雜質(zhì)對(duì)照品，
[0123] 具體操作如下：
[0124] 純化條件：
[0125]
[012引具體操作步驟：<