DMSO): δ = 7.21 (m，3H)，7. 14 (t，J = 6.6Hz，2H)，7.06(d，J = 5.8Hz，lH)，6.93(t，J = 5.6Hz，lH)，6.84(t，J = 5.6Hz，lH)，6.64(d，J = 5·6Ηζ，1Ηz)，5 .26 (s, 2H), 4. 02 (m, 5H), 2. 96 (s, 2H), L 99 (d, J = 7. 4Hz, 2H), I. 42 (m, 2H), I. 19 (t, J = 5. 3Hz, 3H) ；ESI-MS: ([M+H]+) :397. 5〇
[0040] (3)中間體3的制備：
[0041] 向中間體l(1.2g，3. 02mmol)中加入30ml質(zhì)量分?jǐn)?shù)為40%氫溴酸，升溫至100°C回 流15h，呈黃棕色澄清溶液，將反應(yīng)液真空濃縮，用乙酸乙酯重結(jié)晶，抽濾，干燥得白色固體， 收率為 95 % ZH-NMR (300MHz, DMSO) : δ = 7. 17 (m，5H) ,7.05 (d, J= 13.8Hz, 1H), 6.91 (td，J =7. 5Hz, I. 2Hz, 1H), 6. 81 (td, J = 7. 5Hz, 0. 9Hz, 1H), 6. 61 (d, J = 18. 9Hz, 1H), 3. 81 (brs, 1H), 2. 97(d, J = 12. 3Hz, 2H), 2. 55 (t, J = 9. 9Hz, 2H), I. 92 (d, 9. 6Hz, 2H), I. 38(qd, J = 11. 7Hz, 3. 6Hz，2H) ;ESI-MS: ([M+H]+) :325. 3。
[0042] (4)中間體4的制備：
[0043] 將鄰苯二甲酰亞胺鉀鹽（2. 0g，10. 7mmol)與 1，4-二溴丁烷（2. 8g，12. 9mmol) 溶于25mL干燥N，N-二甲基酰亞胺中，pH為10,室溫攪拌26h。用二氯甲烷萃取三次 (IOOmLX 3)，蒸餾水洗滌，合并有機(jī)層，無水硫酸鎂干燥，濃縮，二氯甲烷/蒸餾水重結(jié)晶， 抽濾，干燥得白色固體，收率為92. 4%。
[0044] (5)中間體5的制備：
[0045] 將中間體 3 (I. 20g，2. 96_〇1)與中間體 4 (I. 67g，5. 92_〇1)溶于 30ml 干燥 乙腈和IOml干燥N, N-二甲基酰亞胺的混合液中，加入無水碳酸鉀（0. 82g，5. 92mmol)， 于80°C回流反應(yīng)10h。待反應(yīng)液冷卻至室溫，用二氯甲烷萃取三次（100mLX3)，蒸 餾水洗滌，合并有機(jī)層，用無水硫酸鎂干燥，過濾、濃縮，過柱純化，得白色固體，收率 為 63 %。1H-Nmr(SooMHz1CDCI3): δ = 7.84 (dd，J = 6· 0Hz，3. 0Hz，2H)，7.71 (dd，J = 5. 4Hz, 3. 0Hz, 2H), 7. 51 (d, J = 7. 8Hz, 1H), 7. 16-7. 09 (m, 3H), 7. 07-6. 99 (m, 4H), 5. 06 ( s, 2H), 3. 98-3. 90 (m, 2H), 3. 70 (t, J = 6. 9Hz, 2H), 2. 86 (d, J = 10. 2Hz, 2H), 2. 46 (t, J =7. 5Hz, 2H) , 2. 27 (t, J = 10. 8Hz , 2H) , 2. I 2-2. 0 3 (m, 3H) , 1. 7 2 (q, J = 6. 6Hz, 2H), I. 63-1. 50(m, 2H) ;ESI-MS: ([M+H]+) :526. 5。
[0046] (6)中間體6的制備：
[0047] 將中間體5(0. 50g，0. 95mmol)溶于30mL無水乙醇中，加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為80%的水合 肼5mL，回流反應(yīng)5h。將反應(yīng)液濃縮至大約5mL，加入二氯甲烷30mL，析出白色絮狀物酰肼， 抽濾，收集濾液，濃縮，用二氯甲烷/石油醚重結(jié)晶，抽濾、干燥得白色固體。收率90. 0 %。 iH-NMR^OOMi^DMSO) :δ = 7. 23-7.18 (m，3H)，7.14 (t，J = 12. 0Hz，2H)，7.05 (d，J = 12. 0Hz, 1H), 6. 92 (t, J = 12. 0Hz, 1H), 6. 82 (t, J = 12. 0Hz, 1H), 6. 57 (d, J = 12. 0Hz, 1H), 5 .26 (s, 2H), 3. 73 (brs, 1H), 2. 84 (d, J = 18. 0Hz, 2H), 2. 55 (s, 2H), 2. 25 (t, J = 12Hz, 2H), I. 96(m, 4H), I. 57-1. 35(m, 7H) ;ESI-MS: ([M+H]+) :396. 5。
[0048] (7)中間體7和8的制備：
[0049] 將4-(二乙胺基）水楊醛（0· 50g，2. 59mmol)溶于20mL無水乙醇中，再加入丙二 酸二乙酯（0.428,2.59臟〇1)，得到混合液1，將嗎啡啉（22.5611^，0.26臟〇1)與1(^1^冰乙 酸溶于4mL無水乙醇中，得到混合液2,將混合液1和混合液2混合，回流反應(yīng)8h。冰浴冷 卻，析出沉淀，抽濾，得中間體7,直接投入下一步。向產(chǎn)物中間體7中加入20mL2M NaOH，室 溫反應(yīng)18h，用2M HCl調(diào)節(jié)反應(yīng)液至酸性pH = 3,析出大量沉淀，抽濾，用二氯甲燒/石油 醚重結(jié)晶，抽濾、干燥，得橙黃色固體，收率為94. 2%。
[0050] 1H-NmrUOOMHz, CDCl3) : δ = 12. 33 (s，1H)，8. 66 (s，1H)，7. 45 (d，J = 9. 0Hz, 1H), 6. 71 (dd, J = 9. OHz, 2. 4Hz, 1H), 6. 53 (d, J = 2. 4Hz, 1H), 3. 49 (q, J = 7. 2Hz, 4H), I. 26 (t, J = 7. 2Hz, 6H) ；ESI-MS: ([M+H]+) :262. 3〇
[0051] (8)化合物L(fēng)I的制備：
[0052] 將中間體8(66mg，0.25mmol)與I-乙基-(3-二甲基氨基丙基）碳酰二亞胺鹽 酸鹽（EDCI) (47mg, 0. 30mmol)、I-羥基苯并三挫（HOBT) (47mg, 0. 30mmol)溶于 20mL 干 燥二氯甲烷中，冰浴攪拌30min，然后將中間體6(100mg，0. 25mmol)與三乙胺（40yL， 0. 50mmol)加入上述溶液中，繼續(xù)攪拌30min，移至室溫反應(yīng)14h。將反應(yīng)液用二氯甲烷 萃取兩次（IOOmLX 2)，蒸餾水洗滌，合并有機(jī)層，無水硫酸鎂干燥，抽濾、濃縮，過柱純化， 得熒光黃綠色固體，收率 40. 0 %。1H-NMR (300MHz, CD3OD) : δ = 8. 65 (s, 1H)，7. 57 (d, J =12Hz, 1H), 7. 34 (m, 1H), 7. 16 (dd, J = 18Hz, 12Hz, 2H), 7. 07 (m, 4H), 6. 99 (m, 1H), 6. 8 4(dd, J = 12Hz, 6Hz, 1H), 6. 60(d, J = 6Hz, 1H), 5. 29 (s, 2H), 3. 95 (brs, 1H), 3. 55 (q, J =12Hz, 4H), 3. 49(t, J = 12Hz, 2H), 2. 86 (m, 2H), 2, 75 (t, J = 18Hz, 2H), 2. 23 (d, J = 18Hz, 2H), I. 74 (m, 7H), I. 25 (t, J = 12Hz, 6H) ； 163. 62, 163. 36, 162. 80, 161. 17, 157. 65, 15 3. 20, 152. 61, 148. 12, 141. 93, 134. 41, 131. 28, 131. 25, 131. 18, 128. 41, 128. 32, 121. 58, 11 9. 88, 116. 32, 116. 15, 115. 94, HO. 15, H0.0 1, 108. 41, 107. 40, 96. 58, 57. 55, 52. 08, 48. 93 ,45. 08, 45. 04, 38. 88, 31. 12, 27. 40, 23. 12, 12. 43. ESI-MS: ([M+H]+) calcd for C37H43FN5O3: 639.3453, found:639. 3452。
[0053] 實(shí)施例2 :萘二酰亞胺熒光團(tuán)類探針的制備
[0054]
[0055] 具體合成路線如下：
[0056]
[0057] 本實(shí)施例的合成路線中，中間體1-3的制備同實(shí)施例1中的中間體1-3的制備方 法。
[0058] (1)中間體4的制備：
[0059] 向4-氨基-1，8-萘二酰亞胺（2g，9. 3mmol)中加入4mL冰醋酸、20mL吡啶，回流反 應(yīng)lh。然后加入30mL醋酸酐，回流反應(yīng)5h。待反應(yīng)液降至室溫，倒入200mL冰水中，抽濾， 濾餅用水洗滌，得粗品棕色固體，收率為71. 3%。
[0060] (2)中間體5的制備：
[0061] 將中間體 4 (I. 7g，6. 66mmol)和 4_ 氛基-1- 丁醇（0· 71g，7. 96mmol)溶于 無水乙醇中，回流反應(yīng)5h。將反應(yīng)液濃縮，用乙酸乙酯重結(jié)晶，抽濾，得棕色固體， 收率為 73. 7 %。1H-NmrGOOMHz, CDCl3) : δ 8. 63 (dd, J = 7. 2, 0· 9Hz, 1H)，8. 59 (d，J =8. 4Hz, 1H), 8. 37 (brs, 1H), 8. 19 (d, J = 8. 1Hz, 1H), 7