示，其中左半球?yàn)榻鸺{米顆粒、磁性納米顆粒或膠體碳顆粒，右半球?yàn)榱孔狱c(diǎn)、熒光分子或稀土元素。本發(fā)明優(yōu)選金納米顆粒-量子點(diǎn)形式的Janus納米顆粒。當(dāng)選用磁性納米顆粒時(shí),優(yōu)選采用四氧化三鐵(Fe3O4)磁性納米顆粒。制備本發(fā)明Janus納米顆粒的方法是本領(lǐng)域公知的，Janus納米顆粒的制備已有很多報(bào)道，比如 Janus colloidal particles:preparat1n, propertiesand b1medical applicat1n, Chariya KaewsanehajPrauman Tangboriboonratetal，ACS, Applied materials and interfaces, 2013，5，1857-1869 ；Hybrid, silica-coated，janus-liked plasmonic-magnetic nanoparticles, Georg1s A.Sotir1uj AnnM.HirtjPierre-Yves Lozachjetal.Chemistry of Materials.2011，23，1985-1992 ；Chemotactic behav1r of catalytical motors in microfluidic channels, LarysaBarabanj Stefan M.Harazimj Samuel Sanchez, and Oliver G.Schmidt.Angewandte communicat1ns.2013，52，5552—5556 ；Organized self-assembly of janus micromotors withhydrophobic hemispheres, Wei Gaoj Allen PeijXiaomiao Feng, Camille Hennessy andJoseph Wang, Journal of Americal Chemical Society，2013，135，998-1001 ; Janus particles: synthesis, self-assembly, physical properties and applicat1ns, AndreasWalther and Axel H.E.Mlliierj Chemical reviews，2013，113，5194-5261，等等?上述現(xiàn)有技術(shù)均可用于本發(fā)明制備Janus納米顆粒。并且根據(jù)需要可以制備出包含CdTe、CdSe、CdS、CdS/ZnS、CdSe/ZnS 或 CdSe/CdS 量子點(diǎn)的 Janus 納米顆粒。
[0043]本發(fā)明基于Janus納米顆粒的免疫層析試紙條的結(jié)構(gòu)示意圖如圖2所示，本發(fā)明免疫層析試紙條檢測(cè)蛋白類(lèi)大分子、小分子或重金屬離子目標(biāo)物的結(jié)果示意圖如圖3至圖11所示。
[0044]具體地，在聚氯乙烯(PVC)底板10 (為了便于粘貼，可以在PVC底板10表面涂布單層高聚物壓敏膠，所述PVC底板10的厚度可以是0.4mm、0.5mm或0.6mm等)上的一端順次相互搭接地貼上樣品墊6、結(jié)合物墊7、硝酸纖維素膜8和吸水紙9。然后將PVC底板10及貼附的材料切成試紙條(寬度比如可以是4mm、5mm或6mm等任意適合寬度),并裝入卡殼5內(nèi)，卡殼5上有加樣區(qū)I和顯色區(qū)2兩個(gè)窗口，加樣區(qū)I用于滴加檢測(cè)樣品，顯色區(qū)2可以觀察讀出信號(hào)。
[0045]其中，所述樣品墊6可以是玻璃纖維膜或聚酯纖維膜(可購(gòu)自上海金標(biāo)生物技術(shù)有限公司)，具體可以根據(jù)實(shí)際被檢測(cè)的樣品性質(zhì)(比如血清、全血、尿液或組織液等)來(lái)決定試紙條中所用樣品墊6的材料，上海金標(biāo)生物技術(shù)有限公司的SB08和SB06具有良好的親水性，可用作普通的尿液或血清的檢測(cè)，BT40、BT50和BT100采用直徑為0.6到3微米的微細(xì)玻纖，親水性良好，處理后適合做全血的檢測(cè)。
[0046]所述結(jié)合物墊7上涂覆有檢測(cè)抗體標(biāo)記的Janus納米顆粒，所述硝酸纖維素膜8上包被測(cè)試線(T線)3和質(zhì)控線(C線)4，其中，測(cè)試線3為捕獲抗體或抗原，質(zhì)控線4為檢測(cè)抗體的抗體(即二抗)，分別產(chǎn)生陰陽(yáng)性結(jié)果和質(zhì)控信號(hào)。
[0047]如圖3至圖5所示，在檢測(cè)大分子類(lèi)蛋白的目標(biāo)檢測(cè)物時(shí)，結(jié)合物墊7上涂覆蛋白類(lèi)大分子目標(biāo)檢測(cè)物的檢測(cè)抗體標(biāo)記的Janus納米顆粒；T線3由蛋白類(lèi)大分子的捕獲抗體構(gòu)成；質(zhì)控線4由蛋白類(lèi)大分子目標(biāo)檢測(cè)物的檢測(cè)抗體的抗體構(gòu)成。在加樣區(qū)I加入被檢測(cè)樣品，通過(guò)毛細(xì)管的作用力，樣品會(huì)向吸水紙9方向移動(dòng)，當(dāng)經(jīng)過(guò)結(jié)合物墊7時(shí)，樣品會(huì)將涂覆在結(jié)合物墊7上的抗體標(biāo)記的Janus納米顆粒結(jié)合物溶解并釋放出來(lái),并隨著樣品向前移動(dòng)，若樣品為陽(yáng)性，則其中的目標(biāo)檢測(cè)物(analyte)會(huì)與Janus納米顆粒上的檢測(cè)抗體(Janus-detect1n antibody)發(fā)生特異性的反應(yīng),并形成目標(biāo)檢測(cè)物_檢測(cè)抗體-Janus納米顆粒(analyte-detect1n antibody-Janus)的復(fù)合物，當(dāng)該復(fù)合物經(jīng)過(guò)T線3時(shí),包被在該處的捕獲抗體(capture antibody)會(huì)與目標(biāo)檢測(cè)物發(fā)生特異性反應(yīng)(雙抗體夾心法)，并將其捕獲,形成捕獲抗體-目標(biāo)檢測(cè)物-檢測(cè)抗體-Janus納米顆粒(captureantibody-analyte-detect1n antibody-Janus)的復(fù)合物，此時(shí)會(huì)在T線3處肉眼觀察到顏色條帶和檢測(cè)到熒光信號(hào)，當(dāng)未被捕獲的目標(biāo)檢測(cè)物-檢測(cè)抗體-Janus納米顆粒復(fù)合物繼續(xù)向前移動(dòng)到C線4處，檢測(cè)抗體則與C線4處的檢測(cè)抗體的抗體(即二抗)發(fā)生特異性的反應(yīng)，會(huì)產(chǎn)生顏色信號(hào)和熒光信號(hào)(圖3);當(dāng)被檢測(cè)的樣品為陰性時(shí)，則在T線3處不會(huì)形成顏色條帶和熒光信號(hào)條帶，而在C線4處會(huì)產(chǎn)生顏色條帶和熒光信號(hào)條帶(圖4);只要C線4處不形成顏色條帶和熒光信號(hào)條帶，則證明該試紙條無(wú)效(圖5)。
[0048]如圖6至圖8所示，在檢測(cè)小分子目標(biāo)檢測(cè)物時(shí)，結(jié)合物墊7上涂覆小分子類(lèi)目標(biāo)檢測(cè)物的檢測(cè)抗體標(biāo)記的Janus納米顆粒；T線3包被小分子類(lèi)的捕獲抗原；質(zhì)控線4包被小分子類(lèi)的目標(biāo)檢測(cè)物的檢測(cè)抗體的抗體。在加樣區(qū)I加入被檢測(cè)樣品，通過(guò)毛細(xì)管的作用力，樣品會(huì)向吸水紙9方向移動(dòng)，當(dāng)經(jīng)過(guò)結(jié)合物墊7時(shí)，樣品會(huì)將涂覆在結(jié)合物墊7上的抗體標(biāo)記的Janus納米顆粒結(jié)合物溶解并釋放出來(lái)，并隨著樣品向前移動(dòng)，若樣品為陽(yáng)性，貝1J樣品中的小分子類(lèi)目標(biāo)檢測(cè)物(analyte)會(huì)與Janus納米顆粒上標(biāo)記的檢測(cè)抗體(Janus-detect1n antibody)發(fā)生特異性的反應(yīng),并形成目標(biāo)檢測(cè)物_檢測(cè)抗體-Janus納米顆粒(analyte-detect1n antibody-Janus)的復(fù)合物，當(dāng)該復(fù)合物經(jīng)過(guò)T線3時(shí),如果目標(biāo)檢測(cè)物和檢測(cè)抗體反應(yīng)完全，則沒(méi)有多余的檢測(cè)抗體-Janus納米顆粒與T線3處的捕獲抗原發(fā)生特異性反應(yīng)，因此在T線3處不會(huì)形成顏色條帶和產(chǎn)生熒光信號(hào)條帶，當(dāng)樣品繼續(xù)移動(dòng)到C線4時(shí)，檢測(cè)抗體則與C線4處的二抗發(fā)生特異性的反應(yīng)，形成顏色信號(hào)和熒光信號(hào)(圖6);若樣品為陰性時(shí)，樣品中沒(méi)有目標(biāo)檢測(cè)物與Janus納米顆粒上標(biāo)記的檢測(cè)抗體發(fā)生特異性反應(yīng)(免疫競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng))，因此，會(huì)在T線3處和C線4處形成顏色條帶和熒光信號(hào)條帶(圖7);只要C線4處未觀察到顏色條帶和熒光信號(hào)條帶，則證明該試紙條無(wú)效(圖8)。
[0049]如圖9至圖11所示，在檢測(cè)重金屬離子目標(biāo)檢測(cè)物時(shí)，結(jié)合物墊7上涂覆重金屬離子類(lèi)目標(biāo)檢測(cè)物的檢測(cè)抗體標(biāo)記的Janus納米顆粒；T線3包被重金屬離子類(lèi)的捕獲抗原；質(zhì)控線4包被重金屬離子類(lèi)的目標(biāo)檢測(cè)物的檢測(cè)抗體的抗體。在加樣區(qū)I加入被檢測(cè)樣品，通過(guò)毛細(xì)管的作用力，樣品會(huì)向吸水紙9方向移動(dòng)，當(dāng)經(jīng)過(guò)結(jié)合物墊7時(shí)，樣品會(huì)將涂覆在結(jié)合物墊7上的抗體標(biāo)記的Janus納米顆粒結(jié)合物溶解并釋放出來(lái)，