成分(雜質(zhì))，也能夠不混入雜質(zhì)地劃分目標(biāo)成分。
【附圖說明】
[0029]圖1是本發(fā)明所涉及的制備色譜裝置的一實施例即制備LC裝置的概略結(jié)構(gòu)圖。
[0030]圖2是吸光度光譜Α( λ )的示意圖(a)、及從吸光度光譜Α( λ )得到的色譜S(t)的示意圖(b)。
[0031]圖3是將目標(biāo)成分X和雜質(zhì)成分y各自的吸光度分開表不的一個實例的圖。
[0032]圖4是示出色譜上的目標(biāo)成分X及雜質(zhì)成分y的峰值曲線、這些峰值曲線重疊的混合峰值曲線、目標(biāo)成分X及雜質(zhì)成分y的洗脫區(qū)間、以及本實施例的制備色譜裝置中的目標(biāo)成分X的制備區(qū)間的圖。
[0033]圖5是示出將目標(biāo)成分X和雜質(zhì)成分y各自的吸光度光譜在波長方向上進行微分的微分光譜的圖。
[0034]圖6是示出本實施例的制備色譜裝置的動作的流程圖。
[0035]圖7是示出變形例的制備色譜裝置的動作的流程圖。
【具體實施方式】
[0036]使用圖1?圖7，對本發(fā)明所涉及的制備色譜裝置的實施例進行說明。
[0037]實施例
[0038](I)本實施例的制備色譜裝置的結(jié)構(gòu)
[0039]本實施例的制備色譜裝置是使用了液相色譜儀(LC)的制備LC裝置。如圖1所示，該制備LC裝置10通過送液流路19依序連接流動相容器11、送液栗12、注射器13、色譜柱
14、檢測器15以及餾分收集器16。又，制備LC裝置10具有基于從檢測器15得到的數(shù)據(jù)來控制餾分收集器16用的控制部17。
[0040]在制備LC裝置10中，流動相容器11所積存的流動相被送液栗12吸引，并以一定流量通過注射器13流向色譜柱14。在注射器13中，向流動相中注入試樣。試樣隨著流動相被導(dǎo)入色譜柱14，在通過色譜柱14期間在時間方向上被分離并洗脫。檢測器15在本實施例中為紫外分光光度計，包括發(fā)出測定光的紫外光源151、洗脫液流過的流動池152、包含衍射光柵等的分光器153、光電二極管陣列154及吸光度光譜生成部155。從紫外光源151發(fā)出的測定光通過流過流動池152的洗脫液中，此時受到洗脫液所包含的成分所特有的波長的吸收。該透射光被分光器153波長色散，色散光在測定范圍內(nèi)的波長被光電二極管陣列154同時檢測出。由此，得到透射光的各波長的信號強度光譜I (λ)。在吸光度光譜生成部155中，存儲分析開始時得到的信號強度光譜I。( λ )，從每時每刻得到的信號強度光譜Ι(λ)生成吸光度光譜Α(λ) = 1呢(1。(人)/1(\))，從檢測器15輸出該信號。
[0041]通過了檢測器15的洗脫液的總量(或也可以是一部分)被導(dǎo)入餾分收集器16。饋分收集器16包括:電磁閥161 ;容納大量容器的容器架162 ;被設(shè)置于電磁閥161的下游側(cè)的、滴下洗脫液的分配噴嘴163 ;以及通過使分配噴嘴163在雙軸方向上移動來切換提取洗脫液的容器的驅(qū)動部164。電磁閥161的開閉及基于驅(qū)動部164的分配噴嘴163的移動通過后述的控制部17來控制。
[0042]控制部17包括峰值區(qū)間判定部171、微分值判定部172、以及餾分收集器控制部173，通過CPU及軟件來實現(xiàn)。
[0043]峰值區(qū)間判定部171從檢測器15取得吸光度光譜Α(λ)，基于該吸光度光譜Α(λ)實時制作色譜S(t)，在此基礎(chǔ)上依次判定是否出現(xiàn)與目標(biāo)成分對應(yīng)的色譜峰值。在本實施例中，判定時當(dāng)t = tji于橫跨目標(biāo)成分的保持時間(已知)的前后的規(guī)定的時間范圍內(nèi)，S(ta)超過閾值時，判定為與目標(biāo)成分對應(yīng)的色譜峰值出現(xiàn)。微分值判定部172每次從檢測器15取得吸光度光譜Α( λ)的信號時，依次求得已知的吸光極值波長λ。的微分光譜值Α’( λ。)，并依次判定微分光譜值Α’(λ。)的值是否為O。
[0044]餾分收集器控制部173在通過峰值區(qū)間判定部171判定為色譜峰值出現(xiàn)，且，通過微分值判定部172判定為微分光譜值Α’(λ。)為O的時間段，控制餾分收集器16，以使該洗脫物劃分。具體來說，進行上述判定之前使分配噴嘴163移動至制備目標(biāo)成分用的容器上，在進行上述判定時，對電磁閥161進行控制使其打開。又，沒有滿足所述判定的條件時，餾分收集器控制部173控制電磁閥161使其關(guān)閉。
[0045](2)判斷洗脫物中的雜質(zhì)的有無的原理
[0046]使用圖2?圖5，對利用本實施例的制備LC裝置10的微分值判定部172中的數(shù)據(jù)處理，判斷洗脫物中的雜質(zhì)的有無的原理進行說明。
[0047]圖2的(a)是具有時刻t、波長λ及吸光度A這三個量綱的三維色譜數(shù)據(jù)的示意圖。三維色譜數(shù)據(jù)中，特定的時刻t = 4的吸光度S和波長λ的關(guān)系符合該時刻t的吸光度光譜Α( λ)(圖2的(a)中的曲線)。又，在本實施例中，特定的波長λ = A1的吸光度S和時刻t的關(guān)系符合該波長A1的色譜S(t)(圖2的(b))。在本實施例中，利用吸光度光譜A ( λ )，如以下那樣對雜質(zhì)的有無進行判斷。
[0048]目前，考慮目標(biāo)成分X和雜質(zhì)y的兩個成分被包含于試樣的情況。圖3是將目標(biāo)成分X和雜質(zhì)成分y各自的吸光度光譜分開表不的一個實例的圖。如圖所不，通常，與吸光度峰值的頂點(極大點)相對應(yīng)的波長(吸光極大值波長)對不同物質(zhì)來說是不同的。又，吸光度有在短波長側(cè)變強的傾向，因此吸光度光譜有時在極大點的短波長側(cè)出現(xiàn)谷底(極小點)。
[0049]圖4是示出色譜上的目標(biāo)成分X和雜質(zhì)成分y各自的峰值曲線的一個實例、以及這些峰值曲線重疊的狀態(tài)即混合峰值曲線的圖。由所測定的吸光度光譜實際得到的色譜為混合峰值曲線。目標(biāo)成分X和雜質(zhì)成分y的保持時間相當(dāng)接近，根據(jù)混合峰值曲線，難以判斷雜質(zhì)成分y在哪個時間段是否與洗脫物混合。
[0050]因此，在本實施例中，為了判定雜質(zhì)成分y的混入的有無，如下所述，使用吸光度光譜的波長微分即微分光譜。圖5是示出將圖3所示的各成分的吸光度光譜在波長方向上進行微分而得到的微分光譜的圖。在波長方向上，在波長光譜的曲線上升的情況下，微分光譜的值為正，在波長光譜的曲線下降的情況下，微分光譜值為負(fù)，在吸光度峰值的極大點及極小點，微分光譜值為O。在本實施例中，目標(biāo)成分X的吸光極大值波長、即微分光譜值在從正值變?yōu)樨?fù)值的狀況下變?yōu)镺的波長設(shè)為λ。。
[0051]如上所述，通常吸光極大值波長對不同物質(zhì)來說是不同的，如圖所示，雜質(zhì)成分y的吸光極大值波長與目標(biāo)成分X的吸光極大值波長λ。不同，又，目標(biāo)成分X的吸光極大值波長λ。的雜質(zhì)成分y的微分光譜值具有不為O的值。因此，洗脫物僅含有目標(biāo)成分x(不含有雜質(zhì)成分y)的情況下，對于吸光極大值波長λ。所測定的微分光譜值理想為O。另一方面，洗脫物不僅含有目標(biāo)成分X也含有雜質(zhì)成分y的情況下，對于吸光極大值波長λ。所測定的微分光譜值示出不為O的值。
[0052]因此，在本實施例中，對于目標(biāo)成分X的吸光極大值波長λ。，依次(每時每刻)求出微分光譜值Α’( λ。)，并判定該微分光譜值Α’(λ。)是否為0，由此判定在該時刻洗脫物是含有雜質(zhì)成分y(A’ (λ0) ^O)還是不含有雜質(zhì)成分y(Α’(λ。)=0)。然而，考慮到測定誤差等的影響，微分光譜值Α’(λ。)的絕對值在某程度的范圍內(nèi)的情況下，也可以判斷在該時刻洗脫物不含有雜質(zhì)成分y。并且，在本實施例中，按照該判定方法，僅在洗脫物不含有雜質(zhì)成分y的時間段，進行目標(biāo)成分X的制備(圖4的“制備區(qū)間”)。
[0053]另外，到此為止將與吸光度峰值的極大點對應(yīng)的波長作為吸光極大值波長進行了說明，將與吸光度峰值的極小點對應(yīng)的波長作為吸光極小值波長來使用也是同樣。
[0054](3)本實施例的制備色譜裝置的動作流程
[0055]使用圖6的圖表，對本實施例的制備LC裝置10的動作流程進行說明。制備LC裝置10重復(fù)執(zhí)行步驟SI?S7，直至滿足步驟S7的條件為止。以下對該重復(fù)的動作的I個循環(huán)進行說明。
[0056]首先，峰值區(qū)間判定部171從檢測器15取得吸光度光譜Α( λ )(步驟SI)，將當(dāng)前時刻(設(shè)t = ta)的波長λ = λ i的吸光度作為t』寸的色譜S⑴的值S (t J，追加于到目前為止得到的色譜S(t)，由此制作當(dāng)前時刻ta為止的色譜S(t)(步驟S2