性、溶劑的量、粗化合 物的純度水平和式I的化合物的特定結(jié)構(gòu)。這樣的因素在一定程度上還決定溶解粗化合物 所需的時(shí)間期限?？梢允褂萌我獾臅r(shí)間期限，從幾分鐘到幾小時(shí)。例如，可以在加熱或不加 熱的情況下將包含粗化合物和有機(jī)溶劑的混合物混合約10分鐘或約20分鐘或30分鐘或 約40分鐘或約1小時(shí)。因此，本發(fā)明的一些實(shí)施方案提供用于得到如上所述的純化的式I 的固體化合物的方法，其中形成包含粗化合物和有機(jī)溶劑的混合物包括加熱該混合物。在 一些實(shí)施方案中，形成該混合物包括將所述混合物加熱至約35°C -約100°C的溫度。在一 些實(shí)施方案中，形成所述混合物包括將該混合物加熱至回流。
[0072] 為了從粗物質(zhì)中的其它成分中分離純化的式I的化合物，使式I的化合物固化并 且從有機(jī)溶劑混合物的母液中分離。固化式I的化合物可以包括冷卻該所述混合物。將該 混合物冷卻至任意適合的溫度。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解，冷卻溫度部分取決于式I的化 合物在有機(jī)溶劑中的溶解度以及用于所述方法的溶劑的量。在一些實(shí)施方案中，冷卻所述 混合物包括將該混合物冷卻至約-78°C -約25°C的溫度。在一些實(shí)施方案中，冷卻所述混 合物包括將該混合物冷卻至約15°C的溫度。冷卻可以在任意適合的時(shí)間期限內(nèi)進(jìn)行，典型 地為幾分鐘到幾小時(shí)。例如，可以將所述混合物在3-4小時(shí)期限內(nèi)緩慢地冷卻至期望的溫 度。在該混合物達(dá)到期望的溫度后，可以將其保持在該溫度下或周圍再經(jīng)過幾分鐘到幾小 時(shí)的期限。
[0073] 從有機(jī)溶劑中分離固化的化合物可以通過許多技術(shù)進(jìn)行，包括使所述混合物通過 濾器以便從母液中分離固體物質(zhì)或離心該混合物并且除去母液上清液?？梢詫⒎蛛x的固體 物質(zhì)與另一部分有機(jī)溶劑一起研磨以除去殘留的雜質(zhì)（如果存在）。然而，母液可以包括可 變量的未固化的式I的化合物。如果母液包含這樣的未固化物質(zhì)，則可以例如通過真空除 去有機(jī)溶劑回收未固化的物質(zhì)，并且再進(jìn)行溶解/固化步驟。因此，本發(fā)明的一些實(shí)施方案 提供如上所述的方法，還包括分離任意未固化的具有式I結(jié)構(gòu)的粗化合物。在一些實(shí)施方 案中，該方法還包括使用未固化的粗化合物進(jìn)行如上所述的步驟a)、b)和c)。
[0074] 可以使用本發(fā)明的方法得到許多形式的純化的固體化合物。例如，可以得到為粉 末、玻璃狀物或泡沫體形式的式I的化合物?？梢缘玫綖榫w形式或無定形形式的式I的 化合物。可以得到為兩種或多種形式的混合物的化合物。在一些實(shí)施方案中，得到晶體形 式形式的純化的固體化合物。晶體形式的特征在于組成分子以規(guī)則有序的重復(fù)模式填充并 且一般以三維空間伸展。在一些實(shí)施方案中，得到無定形形式的純化的固體化合物。無定 形形式是具有確定晶體結(jié)構(gòu)的固體形式，即缺乏規(guī)則有序的重復(fù)模式的組成分子。
[0075] 本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解，純化的化合物的固體形式在一定程度上取決于化合物 的結(jié)構(gòu)和用于溶解/固化步驟的溶解的特征。如果必要，純化的固體化合物-以如上所述 的特定形式得到-可以進(jìn)一步被加工以得到更優(yōu)選的固體形式。在一些實(shí)施方案中，如上 所述的方法還包括：d)將固化的化合物溶于極性有機(jī)溶劑以形成溶液；e)使該溶液接觸水 以沉淀至少部分化合物；和f)干燥沉淀的化合物。
[0076] 任意適合的有機(jī)溶劑可以用于溶解純化的固體化合物。一般地，最適合的極性有 機(jī)溶劑與水溶混。極性有機(jī)溶劑的實(shí)例包括、但不限于二甲基甲酰胺、二甲亞砜、碳酸丙烯 酯、乙腈、甲醇、乙醇、異丙醇、叔丁醇、四氫呋喃、丙酮及其混合物。優(yōu)選的極性有機(jī)溶劑具 有低于KKTC的沸點(diǎn)。在一些實(shí)施方案中，極性有機(jī)溶劑選自甲醇、乙醇、異丙醇、叔丁醇、四 氫呋喃和丙酮。在一些實(shí)施方案中，極性有機(jī)溶劑是甲醇。一般地，極性有機(jī)溶劑與純化的 固體化合物之比約為I : 1重量-約500 : 1重量。極性有機(jī)溶劑與純化的固體化合物之 比可以為，例如約2 : 1重量或約3 : 1重量。
[0077] 將水加入到式I的純化的化合物在極性有機(jī)溶劑中的溶液中，一般地，所述水的 用量足以使I的化合物從溶液中沉淀。任意適量的水可以用于本發(fā)明的方法中。典型地， 水與極性有機(jī)溶劑之比約為1 : 20-約20 : 1體積。水與極性有機(jī)溶劑之比可以為，例如 約10 : 1。沉淀后，可以通過如上所述的過濾或離心分離沉淀的化合物?；蛘撸梢岳鋬鏊?述混合物并且可以通過升華從沉淀中除去溶劑/水混合物。在一些實(shí)施方案中，減壓干燥 沉淀的化合物。任意適合的壓力和干燥時(shí)間可以用于從沉淀的化合物中除去痕量的水和溶 劑。例如，可以進(jìn)行減壓干燥，直到沉淀的化合物重量保持恒定為止。
[0078] 本發(fā)明的方法可以用于純化許多大環(huán)內(nèi)酯衍生物。大環(huán)內(nèi)酯類包括具有圖2中式 II的結(jié)構(gòu)的那些是以大環(huán)內(nèi)酯環(huán)為特征的聚酮化合物天然產(chǎn)物和合成類似物。本發(fā)明的方 法特別地用于制備雷帕霉素衍生物Biolimus A9(BA9)、依維莫司、佐他莫司（zotarolimus) 和替西羅莫司（temsirolimus)。本發(fā)明的一些實(shí)施方案提供用于得到如上所述的式I的 純化的固體化合物的方法，其中R 1選自11和Ra-(0)d-Rb。在一些實(shí)施方案中，R 1選自H、 CH2-CH2-OH 和 CH2-CH2-0-CH2-CH3。在一些實(shí)施方案中，R 1 是 CH2-CH2-O-CH2-CH3。其它大環(huán) 內(nèi)酯衍生物也可以使用本發(fā)明的方法純化。
[0079] 本發(fā)明的方法提供式I的高度純的化合物。一般地，純化的固體化合物是至少 90%純的。在一些實(shí)施方案中，純化的固體化合物是至少95%純的。在一些實(shí)施方案中，純 化的固體化合物的純度相對(duì)于粗化合物增加約1% -約20%。本發(fā)明的方法可以提供純化 的固體化合物的純度的更大的增加，這部分取決于例如特定雷帕霉素衍生物的結(jié)構(gòu)和粗物 質(zhì)的起始純度這樣的因素。在一些實(shí)施方案中，純化的固體化合物的純度相對(duì)于粗化合物 增加約1% -約10%。在一些實(shí)施方案中，純化的固體化合物的純度相對(duì)于粗化合物增加 約3% 〇
[0080] 在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的方法還包括使純化的固體化合物接觸抗溶劑組合 物。本發(fā)明的方法可以包括合并純化的化合物溶液與抗溶劑組合物。一般地，抗溶劑組合 物包含非極性溶劑，其中化合物在室溫或低于室溫不溶或難溶?？谷軇┙M合物可以包含，例 如乙醚、二異丙基醚、甲基叔丁基醚、石油英、環(huán)己烷、辛烷、己烷、庚烷及其混合物。在一些 實(shí)施方案中，抗溶劑組合物包括乙醚、二異丙基醚、己烷、庚烷或其任意的組合。在一些實(shí)施 方案中，抗溶劑組合物包括己烷、庚烷、石油英、辛烷、環(huán)己烷及其混合物。在一些實(shí)施方案 中，所述方法包括使純化的化合物接觸抗溶劑組合物并且得到化合物的晶體固體形式。
[0081] 在一個(gè)相關(guān)的方面，本發(fā)明提供40-0-(2-乙氧基乙基）雷帕霉素的晶體形式。該 晶體形式顯示優(yōu)于無定形形式的穩(wěn)定性。
[0082] 在一些實(shí)施方案中，40-0-(2-乙氧基乙基）雷帕霉素的晶體形式使得其示差掃描 量熱的熱分析圖顯示在約138°C和約192°C的一個(gè)或多個(gè)局部極小值。在一些實(shí)施方案中， 所述熱分析圖顯示在約137. 9°C和191. 6°C的局部極小值。在一些實(shí)施方案中，所述熱分析 圖基本上與本文所示的圖5 -致。
[0083] 在一些實(shí)施方案中，40-0-(2-乙氧基乙基）雷帕霉素的晶體形式使得其紅外 光譜顯示在選自 2967. Icm \293L 7cm \2863. 3cm \ 1745. 9cm \ 1718. 8cm \ 1645. 7cm \ 1619. Ocm \ 1451. 2cm \ 1378. 2cm \ 1189. 4cm \ 1073. 9cm 1 和 988. Icm 1 的波數(shù)或其周圍處 的一個(gè)或多個(gè)峰。在一些實(shí)施方案中，所述紅外光譜顯示在選自2967. 1011^2931. 7cm1、 2863. 3cm \l745. 9cm \l718. 8cm \l645. 7cm \l619. Ocm \l451. 2cm \l378. 2cm \ 1189. 4011^1073. 9cm1和988. Icm 1的波數(shù)或其周圍處的5個(gè)或5個(gè)以上峰。在一些 實(shí)施方案中，所述紅外光譜顯示在選自2967. Icm \2931. 7cm \2863. 3cm \1745. 9cm \ 1718. 8cm \1645. 7cm \1619. Ocm \1451. 2cm \ 1378. 2cm \1189. 4cm \1073. 9cm 1 和 988. Icm 1的波數(shù)或其周圍處的10個(gè)或10個(gè)以上峰。在一些實(shí)施方案中，所述紅外光譜基 本上與本文所示的圖12 -致。
[0084] 在一些實(shí)施方案中，40-0-(2-乙氧基乙基）雷帕霉素的晶體形式使得其X-射線 粉末衍射圖案顯示在選自 5.00°、7·06°、9·22°、10·07°、10·50°、11·94°、12·7Γ、 13