Il-12在診斷和治療非小細(xì)胞肺癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及腫瘤診斷及治療領(lǐng)域。具體地，本發(fā)明涉及IL-12在診斷和治療非小 細(xì)胞肺癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 肺癌是世界上許多國家最常見的惡性腫瘤之一，在我國，肺癌居惡性腫瘤死因首 位。肺癌可分為非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC)和小細(xì)胞肺癌（small cell lung cancer, SCLC)兩大類，其中非小細(xì)胞肺癌（NSCLC)占所有肺癌病例的80%~ 85%，包括鱗癌、腺癌、未分化癌、非小細(xì)胞型肺癌和大細(xì)胞癌。鱗癌在肺癌中最為常見，約 占肺癌的40%，而男性則占80%左右。其中只有15-25%的非小細(xì)胞肺癌有手術(shù)治療的機(jī) 會(huì)，而即使接受根治性手術(shù)治療，仍然有50%的NSCLC患者會(huì)復(fù)發(fā)。
[0003] 然而，目前的治療手段中缺乏對原發(fā)性非小細(xì)胞肺癌預(yù)后的有效區(qū)分標(biāo)志物，導(dǎo) 致不同預(yù)后的患者仍接受相同的治療，即使手術(shù)，仍會(huì)有復(fù)發(fā)可能。因此，本領(lǐng)域迫切需要 開發(fā)一種能夠區(qū)分非小細(xì)胞肺癌侵襲性高低的檢測方法或標(biāo)記物，從而對患者的預(yù)后進(jìn)行 提前判斷，并提供個(gè)性化治療方案。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明公開了 IL-12與非小細(xì)胞肺癌轉(zhuǎn)移的相關(guān)性。
[0005] 本發(fā)明第一方面，提供了白介素 -12(IL_12)或其檢測試劑的用途，用于制備預(yù)測 或診斷非小細(xì)胞肺癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的試劑盒。
[0006] 在另一優(yōu)選例中，所述的IL-12來源于哺乳動(dòng)物，較佳地，來源于人、小鼠、大鼠。
[0007] 在另一優(yōu)選例中，所述的非小細(xì)胞肺癌包括肺鱗癌、肺腺癌、低分化肺癌、大細(xì)胞 肺癌；較佳地，為肺鱗癌。
[0008] 在另一優(yōu)選例中，所述的試劑盒還含有白介素-8(IL-8)、和/或白介素-1 (IL-1) 的檢測試劑。
[0009] 在另一優(yōu)選例中，所述的檢測是測定組織樣品、血液樣品、血清樣品或體液樣品， 較佳地，所述的組織樣品包括癌組織和/或癌旁組織。
[0010] 在另一優(yōu)選例中，所述的檢測包括B i ο-P1 eX懸液芯片系統(tǒng)、酶聯(lián)免疫反應(yīng)法 (ELISA法）檢測或時(shí)間分辨免疫熒光法（TRFIA法）檢測。
[0011] 在另一優(yōu)選例中，所述的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移包括除肺部以外的其他器官的轉(zhuǎn)移。
[0012] 在另一優(yōu)選例中，所述的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移包括腦轉(zhuǎn)移、骨轉(zhuǎn)移、肝轉(zhuǎn)移、胸膜轉(zhuǎn)移。
[0013] 在另一優(yōu)選例中，所述IL-12的檢測試劑為IL-12的抗體。
[0014] 在另一優(yōu)選例中，所述試劑盒中還含有IL-12用于陽性對照。
[0015] 本發(fā)明第二方面，提供了一種用于預(yù)測或診斷非小細(xì)胞肺癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的試劑盒， 所述的試劑盒含有一容器，所述的容器中含有IL-12的檢測試劑；以及標(biāo)簽或說明書。
[0016] 在另一優(yōu)選例中，所述的預(yù)測或判斷非小細(xì)胞肺癌轉(zhuǎn)移指判斷腫瘤轉(zhuǎn)移是否發(fā) 生，和/或判斷發(fā)生腫瘤轉(zhuǎn)移的可能性（易感性）大小。
[0017] 在另一優(yōu)選例中，所述預(yù)測或診斷的對象為非小細(xì)胞癌組織和/或癌旁組織。
[0018] 在另一優(yōu)選例中，所述的標(biāo)簽或說明書中注明以下內(nèi)容：
[0019] 當(dāng)檢測樣本中的IL-12表達(dá)量C1與對照樣本中IL-12表達(dá)量C0相比， C1彡1. 3C0,較佳地C1彡1. 5C0,更佳地，C1彡2. 0C0,則表明該檢測樣本為有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的 非小細(xì)胞肺癌概率大，或表面該非小細(xì)胞肺癌樣本可能發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。
[0020] 本發(fā)明第三方面，提供了一種IL-12抑制劑的用途，用于制備抑制非小細(xì)胞肺癌 遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和/或抑制非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞侵襲或遷移的藥物組合物。
[0021] 在另一優(yōu)選例中，所述的IL-12抑制劑包括IL-12特異性抗體、IL-12的活性抑制 劑和受體拮抗劑。
[0022] 在另一優(yōu)選例中，所述的藥物組合物含有IL-12抑制劑，和藥學(xué)上可接受的載體。
[0023] 在另一優(yōu)選例中，所述的藥物組合物還含有任選的化療劑。
[0024] 在另一優(yōu)選例中，所述的藥物組合物中IL-12的施用量為0· 01-10mg/kg，較佳地， 為 0· l_5mg/kg〇
[0025] 本發(fā)明第四方面，提供給了一種非診斷性的預(yù)測或判斷非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株是否 為高侵襲性細(xì)胞株的方法，包括步驟：測定所述的非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株中IL-12的表達(dá)量， 當(dāng)IL-12的表達(dá)量顯著高于正常肺細(xì)胞內(nèi)IL-12的表達(dá)量，則說明所述非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 株為高侵襲性細(xì)胞株。
[0026] 本發(fā)明第五方面，提供了一種體外非治療性的抑制非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞侵襲或遷移 的方法，包括步驟：
[0027] 在IL-12抑制劑存在的條件下，培養(yǎng)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞，從而抑制非小細(xì)胞肺癌 侵襲或遷移。
[0028] 本發(fā)明第六方面，提供了一種篩選IL-12抑制劑的方法，包括步驟：
[0029] (a)在非小細(xì)胞癌腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)體系中添加候選化合物，作為測試組，在相同的細(xì) 胞培養(yǎng)體系中不添加候選化合物，作為對照組；
[0030] (b)觀察測試組中細(xì)胞的侵襲和遷移，其中，當(dāng)測試組中細(xì)胞的侵襲和遷移程度 Ml顯著低于對照組中細(xì)胞的侵襲和遷移程度M0,則表明所述的候選化合物為11-12抑制 劑。
[0031] 本發(fā)明第七方面，提供了一種制備非小細(xì)胞肺癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移動(dòng)物模型的方法，包括 步驟：向非小細(xì)胞肺癌荷瘤動(dòng)物施用IL-12,從而產(chǎn)生非小細(xì)胞肺癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移動(dòng)物模型。
[0032] 本發(fā)明第八方面，提供了一種治療轉(zhuǎn)移性非小細(xì)胞肺癌的方法，向需要的對象施 用IL-12抑制劑，從而治療轉(zhuǎn)移性非小細(xì)胞肺癌。
[0033] 應(yīng)理解，在本發(fā)明范圍內(nèi)中，本發(fā)明的上述各技術(shù)特征和在下文（如實(shí)施例）中具 體描述的各技術(shù)特征之間都可以互相組合，從而構(gòu)成新的或優(yōu)選的技術(shù)方案。限于篇幅，在 此不再一一累述。
【具體實(shí)施方式】
[0034] 本發(fā)明人經(jīng)過廣泛而深入的研究，通過大樣本的篩選，首次意外地發(fā)現(xiàn)，炎癥細(xì)胞 因子IL-12參與了非小細(xì)胞肺癌（鱗癌）遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的發(fā)生和發(fā)展，即IL-12在非小細(xì)胞肺 癌中具有促進(jìn)轉(zhuǎn)移、侵襲的作用，因此當(dāng)在非小細(xì)胞肺癌組織（或血清）中檢測出具有表達(dá) 量過高的IL-12時(shí)，可以認(rèn)為該腫瘤組織是具有（或患者患有）高侵襲性的非小細(xì)胞肺癌。 此外，本發(fā)明人還發(fā)現(xiàn)，通過IL-12的抑制劑降低IL-12的表達(dá)量，能夠減弱非小細(xì)胞肺癌 的侵襲性、降低癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力。在此基礎(chǔ)上，完成了本發(fā)明。
[0035] 術(shù)語
[0036] 如本文所用，術(shù)語"侵襲"、"轉(zhuǎn)移"、"遷移"均指的是非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移 能力，例如在transwell侵襲實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)或證實(shí)的腫瘤細(xì)胞的侵襲能力；或在體內(nèi)，原發(fā) 性的非小細(xì)胞肺癌在除肺部以外的其他組織、器官的生長與增殖。術(shù)語"高侵襲性細(xì)胞株" 指的是易發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移或遷移的細(xì)胞株。
[0037] 非小細(xì)胞肺癌
[0038] 肺癌從病理分型上可以分為非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC)和小細(xì)胞肺癌（small cell lung cancer, SCLC)兩大類，其中非小細(xì)胞肺癌 (NSCLC)占所有肺癌病例的80 %~85 %，包括鱗癌、腺癌、未分化癌（低分化癌）、非小細(xì)胞 型肺癌和大細(xì)胞癌。其中，未分化癌（低分化癌）指的病理上確定該類型細(xì)胞癌為原始的 肺癌細(xì)胞；而非小細(xì)胞型肺癌指的是病理上無法歸為鱗癌、腺癌、大細(xì)胞癌或未分化癌任意 一種，且也不屬于小細(xì)胞肺癌的非小細(xì)胞肺癌。
[0039] 白介素-12
[0040] 白介素-12 (IL-12)是具有廣泛生物學(xué)活性的細(xì)胞因子，主要由B細(xì)胞和巨噬細(xì)胞 產(chǎn)生；IL-12主要作用于T細(xì)胞和NK細(xì)胞，刺激活化型T細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)NK細(xì)胞的細(xì)胞毒 活性并促進(jìn)其分泌IFN- γ、TNF- a、GM-CSF等細(xì)胞因子；增強(qiáng)對腫瘤細(xì)胞的殺傷效應(yīng)。
[0041] 通常認(rèn)為，IL-12有助于對腫瘤細(xì)胞的殺傷作用，據(jù)報(bào)道，在胃癌、結(jié)直腸癌、宮頸 癌中，IL-12的表達(dá)量均有不同程度的降低。然而，本發(fā)明人通過病理樣本篩選以及實(shí)驗(yàn)驗(yàn) 證發(fā)現(xiàn)，IL-12在非小細(xì)胞肺癌（尤其是鱗癌）中呈高表達(dá)表現(xiàn)，且與癌癥的侵襲程度密切 相關(guān)