兩親性聚合物及其制備方法和兩親性聚合物納米顆粒及其制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，具體地，本發(fā)明涉及一種兩親性聚合物、一種兩親性聚合物 的制備方法、一種兩親性聚合物納米顆粒的制備方法、由兩親性聚合物納米顆粒的制備方 法制備得到的兩親性聚合物納米顆粒及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 陽(yáng)離子多肽因?yàn)槠鋸?qiáng)有力的抗菌活性、抗菌譜廣、可生物降解和生物相容性好而 得到了廣泛的關(guān)注。大多數(shù)陽(yáng)離子多肽能與微生物膜通過(guò)靜電相互作用在細(xì)菌表面造成細(xì) 菌細(xì)胞壁/膜的破壞。然而由于其免疫原性高、體內(nèi)半衰期短和成本高，限制了陽(yáng)離子多肽 的臨床應(yīng)用。
[0003] ε -多聚賴氨酸是一種由白色鏈霉菌產(chǎn)生的天然陽(yáng)離子多肽，由25-35個(gè)賴氨酸 殘基組成。ε-多聚賴氨酸對(duì)革蘭氏陽(yáng)性（如金黃色葡萄球菌）和革蘭氏陰性菌（如大腸 桿菌）顯示了潛在的抗菌活性，已經(jīng)被美國(guó)食品和藥物管理局（FDA)批準(zhǔn)可作為抗菌劑添 加在各式各樣的產(chǎn)品中。
[0004] 然而，由于大多數(shù)臨床使用抗生素并不損傷細(xì)菌的細(xì)胞膜或細(xì)胞壁，而是通過(guò)細(xì) 胞膜和/或細(xì)胞壁滲透到細(xì)胞內(nèi)來(lái)抑制蛋白質(zhì)合成和DNA復(fù)制，這種方式使得細(xì)菌容易對(duì) 抗生素產(chǎn)生耐藥性。近年來(lái)，大量的實(shí)驗(yàn)和臨床數(shù)據(jù)表明越來(lái)越多的細(xì)菌對(duì)傳統(tǒng)抗生素產(chǎn) 生耐藥性，因此需要開發(fā)新型抗菌制劑或材料來(lái)滿足臨床對(duì)抗菌制劑的需求。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是克服在單獨(dú)使用聚賴氨酸進(jìn)行抗菌時(shí)由于被細(xì)菌降解而導(dǎo)致的 抗菌性能消失的缺陷，提供一種生物安全性高、藥效發(fā)揮迅速、藥效持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)、抗菌譜廣 且成本低的兩親性聚合物及兩親性聚合物納米顆粒。
[0006] 為了實(shí)現(xiàn)上述目的，第一方面，本發(fā)明提供了一種兩親性聚合物，該兩親性聚合物 具有式（1)所示的結(jié)構(gòu)：
[0007]
[0008] 其中，m為20-100的整數(shù)，η為25-35的整數(shù)。
[0009] 第二方面，本發(fā)明提供了一種兩親性聚合物的制備方法，該方法包括：在溶劑和連 接劑的存在下，將式Α所示的聚合物與式Β所示的聚合物接觸，
[0010]
[0011] 其中，在式A所示的聚合物中，m為20-100的整數(shù)，優(yōu)選為21-30的整數(shù)；在式B 所示的聚合物中，η為25-35的整數(shù)。
[0012] 第三方面，本發(fā)明提供了一種兩親性聚合物納米顆粒的制備方法，該方法包括：在 乳化反應(yīng)條件下，將含有式（1)所示結(jié)構(gòu)的兩親性聚合物的溶液與含有穩(wěn)定劑的水溶液接 觸，
[0013]
[0014] 其中，m為20-100的整數(shù)，優(yōu)選為21-30的整數(shù)；η為25-35的整數(shù)。
[0015] 第四方面，本發(fā)明提供了一種通過(guò)本發(fā)明的兩親性聚合物納米顆粒的制備方法制 備得到的兩親性聚合物納米顆粒。
[0016] 第五方面，本發(fā)明提供了一種兩親性聚合物納米顆粒在制備抗菌藥物中的應(yīng)用。
[0017] 本發(fā)明提供的兩親性聚合物納米顆粒能夠克服在單獨(dú)使用聚賴氨酸進(jìn)行抗菌時(shí) 由于被細(xì)菌降解而導(dǎo)致的抗菌性能消失的缺陷，而且，本發(fā)明提供的兩親性聚合物納米顆 粒是一種生物安全性高、藥效發(fā)揮迅速、藥效持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)、抗菌譜廣且成本低的納米顆粒。
[0018] 另外，本發(fā)明提供的兩親性聚合物納米顆粒對(duì)細(xì)菌，特別是枯草芽孢桿菌抗菌、金 黃色葡萄球菌和大腸桿菌具有很好的抗菌活性。
[0019] 本發(fā)明的其它特征和優(yōu)點(diǎn)將在隨后的【具體實(shí)施方式】部分予以詳細(xì)說(shuō)明。
【附圖說(shuō)明】
[0020] 附圖是用來(lái)提供對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步理解，并且構(gòu)成說(shuō)明書的一部分，與下面的具 體實(shí)施方式一起用于解釋本發(fā)明，但并不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的限制。在附圖中：
[0021] 圖1是本發(fā)明實(shí)施例1的式Α所示的聚合物、式Β所示的聚合物和式⑴所示的 兩親性聚合物的紅外光譜圖。
[0022] 圖2是通過(guò)透射電鏡觀察本發(fā)明實(shí)施例1的兩親性聚合物納米顆粒的形貌圖。
[0023] 圖3是通過(guò)透射電鏡觀察本發(fā)明實(shí)施例1的兩親性聚合物納米顆粒的粒徑分布 圖。
[0024] 圖4是將聚賴氨酸以濃度為10 μ g/mL的水溶液形式和大腸桿菌共培養(yǎng)2小時(shí)后 的透射電鏡圖。
[0025] 圖5是將本發(fā)明實(shí)施例1的兩親性聚合物納米顆粒以濃度為10 μ g/mL的水溶液 形式和大腸桿菌共培養(yǎng)2小時(shí)后的透射電鏡圖。
【具體實(shí)施方式】
[0026] 以下對(duì)本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。應(yīng)當(dāng)理解的是，此處所描述的具體 實(shí)施方式僅用于說(shuō)明和解釋本發(fā)明，并不用于限制本發(fā)明。
[0027] 第一方面，本發(fā)明提供了一種兩親性聚合物，該兩親性聚合物具有式（1)所示的 結(jié)構(gòu)：
[0028]
[0029] 其中，m可以為20-100的整數(shù)，η可以為25-35的整數(shù)。
[0030] 根據(jù)本發(fā)明所述的式（1)所示的兩親性聚合物，優(yōu)選情況下，m可以為21-30的整 數(shù)，η可以為25-35的整數(shù)。
[0031] 更加優(yōu)選情況下，在本發(fā)明中，所述式（1)所示的兩親性聚合物的分子量可以為 5000-20000。
[0032] 在本發(fā)明中，需要特別說(shuō)明的是，所述20-100的整數(shù)是指包括20和100在內(nèi)的， 且包括20-100之間的每一個(gè)整數(shù)，也就是說(shuō)20-100之間的每一個(gè)整數(shù)都是本發(fā)明的技術(shù) 方案，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)實(shí)際需要選擇m值的大小。同樣的，針對(duì)η可以為25-35的 整數(shù)以及m優(yōu)選為21-30的整數(shù)也是如上類似的解釋，即η可以為25、26、27、28、29、30、31、 32、33、34和35中的任意一個(gè)整數(shù)，且m優(yōu)選可以為21、22、23、24、25、26、27、28、29和30中 的任意一個(gè)整數(shù)。
[0033] 第二方面，本發(fā)明還提供了一種兩親性聚合物的制備方法，該方法包括：在溶劑和 連接劑的存在下，將式A所示的聚合物與式B所示的聚合物接觸，
[0034]
[0035] 其中，在式A所示的聚合物中，m為20-100的整數(shù)，優(yōu)選為21-30的整數(shù)；在式B 所示的聚合物中，η為25-35的整數(shù)。
[0036] 在本發(fā)明的所述兩親性聚合物的制備方法中，通過(guò)該方法制備得到的即為本發(fā)明 上述的式（1)所示的兩親性聚合物，因此，有關(guān)式（1)所示的兩親性聚合物的相關(guān)定義和解 釋以及保護(hù)范圍均適用于本發(fā)明的所述兩親性聚合物的方法中。
[0037] 根據(jù)本發(fā)明所述的兩親性聚合物的制備方法，其中，所述式Α所示的聚合物、式Β 所示的聚合物和連接劑的用量摩爾比可以為1-20 :1 :5-20 ;優(yōu)選情況下，式A所示的聚合 物、式B所示的聚合物和連接劑的用量摩爾比為2-10 :1 :8-15。
[0038] 根據(jù)本發(fā)明所述的兩親性聚合物的制備方法，其中，所述接觸的條件包括：接觸的 溫度為〇_35°C ;優(yōu)選接觸的溫度為4_25°C。
[0039] 根據(jù)本發(fā)明所述的兩親性聚合物的制備方法，其中，所述接觸的條件包括：接觸的 時(shí)間為2_48h ;優(yōu)選接觸的時(shí)間為4_24h。
[0040] 在本發(fā)明所述的兩親性聚合物的制備方法中，所述連接劑可以包括1-乙 基-(3-二甲基氨基丙基）碳酰二亞胺鹽酸鹽和/或Ν，Ν' -二環(huán)己基碳酰亞胺。
[0041] 優(yōu)選情況下，在本發(fā)明所述的兩親性聚合物的制備方法中，所述溶劑選自二甲基 亞砜和/或Ν，Ν-二甲基甲酰胺。
[0042] 在本發(fā)明中，需要特別說(shuō)明的是，對(duì)所述溶劑的用量沒(méi)有特別的限定，本領(lǐng)域技術(shù) 人員可以根據(jù)常規(guī)用量進(jìn)行選擇。
[0043] 在本發(fā)明中，所述溶劑可以為二氯甲烷、二甲基亞砜、乙醇和丙酮中的至少一種。
[0044] 根據(jù)本發(fā)明所述的兩親性聚合物的制備方法，該方法還可以包括：將所述接觸后 得到的產(chǎn)物進(jìn)行過(guò)濾除去固體雜質(zhì)，并將過(guò)濾后得到的溶液在水中進(jìn)行透析，然后冷凍干 燥，即可得到本發(fā)明所述的式（1)所示的兩親性聚合物的固態(tài)產(chǎn)品。
[0045] 第三方面，本發(fā)明提供了一種兩親性聚合物納米顆粒的制備方法，該方法包括：在 乳化反應(yīng)條件下，將含有式（1)所示結(jié)構(gòu)的兩親性聚合物的溶液與含有穩(wěn)定劑的水溶液接 觸，
[0046]
[0047] ΑΤ，m 7? 丄DD 狀、」：^1，17匕32￡7? z丄
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[0048] 在本發(fā)明的所述兩親性聚合物納米顆粒的制備方法中，所使用的式（1)所示的兩 親性聚合物的相關(guān)定義和解釋以及保護(hù)范圍均與前相同，本發(fā)明在此不再贅述。
[0049] 根據(jù)本發(fā)明所