2000獲得。
[0370] 溶解性測(cè)定
[0371] 將RGC、合成的白藜蘆醇（S-RES ;Sigma-Aldrich)及從植物虎杖（Polygonum capsidatum)中提取的白藜蘆醇（植物-RES)溶解于80%甲醇中以實(shí)現(xiàn)100%溶解。然后， 將所有RES來(lái)源在pH 2和pH 7均溶解于水中，在水中的溶解百分比與在甲醇中的溶解百 分比對(duì)比。所有樣品中的RES均在306nm基于其特征性吸光圖譜監(jiān)測(cè)，其濃度通過(guò)白藜蘆 醇分析標(biāo)準(zhǔn)的標(biāo)定曲線確定。
[0372] 結(jié)果
[0373] LC/MS
[0374] RGC粉末的負(fù)離子模式的質(zhì)譜和代表性LC/MS層析圖在圖6A和6B中顯示。針 對(duì)RGC中白藜蘆醇（m/z-227. 0701-227. 0737的四種衍生物檢測(cè)的LC-MS分析，均顯示在 306nm的UV吸光度。這些衍生物中三種是反式-RES異構(gòu)體的己糖苷，在4. 6、5. 3和6. 1分 鐘的保留時(shí)間檢測(cè)到。第四種衍生物是反式-RES，在6. 9分鐘的保留時(shí)間檢測(cè)到（表12)。 證實(shí)四種衍生物的相同性，如通過(guò)ESI質(zhì)譜顯示（圖7)。
[0375] 表12:RGC中白藜蘆醇衍生物的鑒定
[0376]
[0377] 溶解性
[0378] 將RGC-RES的溶解性與兩種反式-RES產(chǎn)物對(duì)比：合成的RES和植物虎杖RES。所 有三種所檢測(cè)的產(chǎn)物均完全溶解于80%甲醇溶液中。然而，當(dāng)這三種RES產(chǎn)物溶解于模擬 胃pH條件的酸化水（pH = 2)以及在pH 7. 0時(shí)，RGC-RES的溶解比兩種其它RES的溶解高 6倍，RGC-RES為44%，兩種其它RES為7% (圖8)。
[0379] 人生物利用度研究
[0380] 該研究是單一劑量隨機(jī)的交叉對(duì)比性藥動(dòng)學(xué)研究。15個(gè)成人健康禁食男性對(duì)象接 受研究產(chǎn)物RGC (口服劑量等價(jià)于50mg或150mg反式-RES)，間隔至少7天沖洗（washout) 期）。在給藥后4小時(shí)提供標(biāo)準(zhǔn)飲食。遵循以色列衛(wèi)生部（M0H)的所有規(guī)章制度及根據(jù) ICHGCP指導(dǎo)進(jìn)行研究。該方案由Soroka University Medical Center IRB許可，包括給每 個(gè)患者施用一次50或150mg劑量，隨后7天沖洗，第二次施用，這次與第一次不同，由此開(kāi) 始接受50mg的患者將接受150mg，反之亦然。在這項(xiàng)研究中征募15個(gè)健康非吸煙男性志愿 者。志愿者資格標(biāo)準(zhǔn)包括年齡在18-55歲，BMI彡19及彡30。要求對(duì)象在第一次給藥之前 7天及在整個(gè)研究期間禁食含有RES的食物、營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑或飲料，及禁食所有藥物包括非處 方藥。
[0381] 樣品收集和處理
[0382] 將在施用前（t0)和施用后 0?33、0. 67、1、1. 5、2、2. 5、3、4、5、6、8、10和12小時(shí)的 靜脈血樣品收集在含有K2EDTA的試管中。將血液樣品保持在冰浴中，并在黃光下立即處理。
[0383] 血漿中白藜蘆醇含量分析
[0384] 由PRACS Institute (Toronto, Canada)進(jìn)行樣品制備及血衆(zhòng)樣品中游離和總RES 的LC-MS分析。血漿樣品經(jīng)液體-液體提取并用于LC-MS/MS系統(tǒng)進(jìn)行分析。對(duì)于游離和 總RES的較低限度定量（LL0Q)分別為0. 5和20ng/mL。對(duì)于總RES分析，在LC-MS/MS分析 之前進(jìn)行酶促水解和蛋白質(zhì)沉淀提取。
[0385] 藥代動(dòng)力學(xué)分析
[0386] 使用未分區(qū)藥代動(dòng)力學(xué)方法針對(duì)游離RES和總RES(游離和綴合的）計(jì)算下列藥 代動(dòng)力學(xué)變量：最大血漿濃度（Cmax)和最大血漿濃度時(shí)間（Tmax)，在整個(gè)收集期間的平均 濃度，通過(guò)梯形法的從時(shí)間（0)至最后可計(jì)量濃度（Clast，高于L0Q)的血漿濃度對(duì)時(shí)間曲 線下面積（AUC)。
[0387] LDL氧化試驗(yàn)
[0388] LDL制備：通過(guò)不連續(xù)的密度梯度超速離心法從健康正常血脂的志愿者分離LDL。
[0389] 銅離子誘導(dǎo)的LDL氧化：LDL(100mg蛋白質(zhì)/mL)與各實(shí)驗(yàn)中濃度升高的葡萄粉末 的乙醇提取物在室溫溫育10分鐘。添加CuS04并將試管在37°C溫育2小時(shí)。在溫育結(jié)束 后，通過(guò)測(cè)量所產(chǎn)生的硫代巴比妥酸反應(yīng)性物質(zhì)（TBARS)和脂質(zhì)過(guò)氧化物的量確定LDL氧 化的程度。
[0390] 脂質(zhì)過(guò)氧化試驗(yàn)：通過(guò)在532nm的硫代巴比妥酸反應(yīng)性物質(zhì)（TBARS)試驗(yàn)直接在 培養(yǎng)基中測(cè)量LDL氧化的程度，使用丙二醛（MDA)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。還通過(guò)脂質(zhì)過(guò)氧化物測(cè)試 確定脂蛋白氧化，所述測(cè)試通過(guò)脂質(zhì)過(guò)氧化物將碘化物轉(zhuǎn)變成碘的能力（如在365nm用分 光光度計(jì)所測(cè)量的）分析脂質(zhì)過(guò)氧化物形成。
[0391] 結(jié)果
[0392] 人口統(tǒng)計(jì)學(xué)和安全性：15個(gè)健康男性志愿者參與這項(xiàng)研究。對(duì)象年齡范圍是 28-55歲（平均42. 1歲），BMI范圍是21. 4-30 (平均25. 8)。所有對(duì)象在篩選和準(zhǔn)入時(shí)均 檢測(cè)對(duì)藥物和乙醇是陰性的，關(guān)于實(shí)驗(yàn)室參數(shù)和生命體征測(cè)量無(wú)臨床顯著異常。在整個(gè)研 究中無(wú)不利事件觀測(cè)到或報(bào)道。
[0393] 游離和總白藜蘆醇的血漿藥代動(dòng)力學(xué)：總RES和游離RES的平均反式-RGC-RES血 漿濃度與時(shí)間曲線在圖9中顯示。正如所見(jiàn)，在兩個(gè)濃度的RGC圖展示兩個(gè)清晰的濃度峰， 第一個(gè)峰在1小時(shí)后，第二個(gè)峰（更高）在5小時(shí)后。
[0394] t-RES的平均藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)在表12A和12B中概括。
[0395] 表13A和13B:在補(bǔ)加RGC之后血漿藥代動(dòng)力學(xué)數(shù)值
[0396]A?總白藜蘆醇
[0397]
[0400] 在前兩個(gè)測(cè)量時(shí)間點(diǎn)0. 33和0. 67小時(shí)分析表明在接受RGC的對(duì)象血漿中RES的 可測(cè)量數(shù)量（表14)。此外，在0. 33小時(shí)時(shí)間點(diǎn)期間，RGC組中所有對(duì)象（除了RGC150mg 組中的一個(gè)）均具有可測(cè)量的總RES濃度（表14和15)。
[0401] 表14 :在前兩個(gè)測(cè)量時(shí)間點(diǎn)血漿中具有可檢測(cè)量RES(總/游離）的對(duì)象
[0402]
[0403] 表15 :在施用后前三個(gè)測(cè)量時(shí)間點(diǎn)的總RES和游離RES的濃度（ng/mL)
[0404]
[0405] 結(jié)論
[0406] 源自RGC中的RES特征在于添加一個(gè)己糖部分。盡管己糖的提取類型及其精確 定位還未鑒定，但是很可能的是，RGC RES是云杉新甙-天然存在于紅葡萄中的最常見(jiàn)類型 的RES。在游離和總體形式的RES中證實(shí)的兩個(gè)峰的現(xiàn)象是獨(dú)特的及在其它類型RES中未 觀測(cè)到?？赡躌GC RES中糖苷基團(tuán)的存在使其更可溶，這可以在溶解性檢測(cè)中觀測(cè)到，其中 RGC-RES與合成的和植物衍生的RES相比更溶于水。這種獨(dú)特的兩個(gè)濃度峰的模式也可歸 因于RGC的獨(dú)特成分及之間的協(xié)同，所述RGC含有完全的紅葡萄基質(zhì)和高水平的糖苷白藜 蘆醇。發(fā)現(xiàn)這種性狀在高濃度RES存在的情況下以高速率表現(xiàn)，快達(dá)施用后20分鐘。
[0407] 如在濃度/時(shí)間曲線（圖9A)中清晰可見(jiàn)的，RGC-RES在1和5小時(shí)出現(xiàn)兩個(gè)非 常明顯的濃度峰。
[0408] 重要地，合成的或酵母發(fā)酵來(lái)源的RES(Poulsen，et al.，2013)以及植物來(lái)源的 RES(Amiot，et al.，2013)的濃度時(shí)間曲線顯示明顯的單一濃度峰。這顯示一天補(bǔ)充一次 RGC對(duì)于延長(zhǎng)作用是足夠的，而在其它產(chǎn)物中，可需要多于一次的補(bǔ)充或者每天更高水平以 達(dá)到相同作用。
[0409] 實(shí)施例7 :臨床研究-RGC粉末對(duì)患有高血壓前期或輕微高血壓的人中的血壓、血 管功能和血漿氧化參數(shù)的作用
[0410] 進(jìn)行隨機(jī)、雙盲、安慰劑對(duì)照的研究。登記合格的對(duì)象并將其分為三個(gè)治療方案， 接受200mgRGC粉末或400mgRGC粉末或安慰劑。所治療的對(duì)象不同時(shí)攝取其他相關(guān)的藥 物。臨床試用的產(chǎn)品或安慰劑每天攝取一次，共12周。在所施用的劑量中的白藜蘆醇和總 多酚的量在下表16中顯示。
[0411] 表16 :RGC中的白藜蘆醇和總多酚水平
[0412]
[0413] 結(jié)果
[0414] 55個(gè)對(duì)象中的46個(gè)（92% )完成了研究。在所有處理組中基線標(biāo)準(zhǔn)是相當(dāng)?shù)摹?200mg組與其它兩個(gè)處理組相比具有更高的BMI。研究人群的平均年齡是57. 5 ±7. 2歲（范 圍：41. 7 - 70. 0 歲）。
[0415] 安全性
[0416] 用RGC治療是安全且耐受良好的。一起嚴(yán)重的不良事件是燒心轉(zhuǎn)變?yōu)樾夭刻弁矗?在第二天同時(shí)解決了，并且被認(rèn)為是中度的SAE，不太可能與研究的產(chǎn)品有關(guān)。所有其它的 不良事件是輕微或中度的，并且不被認(rèn)為與研究的產(chǎn)品有關(guān)。在研究過(guò)程中沒(méi)有出現(xiàn)臨床 顯著的至關(guān)重要的標(biāo)志或?qū)嶒?yàn)室值的變化。
[0417] 效力
[0418] 表17:比較RGC對(duì)所有補(bǔ)充12周的測(cè)量結(jié)果的作用
[0419]
[0420] *括號(hào)中的數(shù)字代表"N"，是所測(cè)試的對(duì)象的數(shù)量。
[0421]血壓（BP)
[0422] 在RGC200mg組中，舒張BP降低-4. 18±8. 96mmHg。不同組間的比較顯示，這一 變化與安慰劑組具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著地差異（表17,p= 0. 0320)。
[0423] 在RGC200mg組中，觀察到在基線和治療結(jié)束時(shí)收縮BP的細(xì)小變化（表17)。
[0424] 血漿氧化參數(shù)
[0425] 如表17所示，用RGC400mg治療使脂質(zhì)過(guò)氧化物值在基線和治療結(jié)束之間顯著降 低了 31. 4±56. 0。在200mg治療組中還觀察到30. 0±48. 2的脂質(zhì)過(guò)氧化物值降低。
[0426] 當(dāng)將來(lái)自兩個(gè)RGC治療組的脂質(zhì)過(guò)氧化物值結(jié)合而得到更大的樣品量時(shí)，平均脂 質(zhì)過(guò)氧化物值降低31. 0±52. 3nmole/ml(圖10,p=0. 013)。
[0427] 通過(guò)流量介導(dǎo)的擴(kuò)張（FMD)測(cè)量的血管功能
[0428] 通過(guò)FMD在來(lái)自200mg組的六個(gè)對(duì)象、來(lái)自400mg組的八個(gè)對(duì)象和解釋安慰劑 的九個(gè)對(duì)象中測(cè)量血管功能。在RGC 400mg組中在基線與治療結(jié)束之間觀察到FMD的 2. 14±1. 82mm Hg的統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性增加（表17,p = 0. 013)。通過(guò)給上臂上的血壓袖套充氣 到200mm Hg 5分鐘然后在松釋所述袖套后60、90和120秒超聲測(cè)量動(dòng)脈擴(kuò)張來(lái)進(jìn)行FMD。
[0429] 與來(lái)自200mg治療組的六個(gè)對(duì)象中的兩個(gè)（33.3% )和接受安慰劑的九個(gè)對(duì) 象中的兩個(gè)（22. 2% )相比，來(lái)自400mg治療組的所有八個(gè)對(duì)象經(jīng)歷陽(yáng)性的相對(duì)變化 (FMD>70% )(圖11)。400mg治療組中所觀察到的改進(jìn)率與200mg組和安慰劑組所觀察到 的具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異（對(duì)于400mg vs200mg，p = 0. 015,而對(duì)于400mg vs安慰劑，p = 0. 0023) 〇
[0430] 本文顯示的結(jié)果表明，每天攝取RGC粉末改進(jìn)FMD并且可以改進(jìn)輕微高血壓對(duì)象 中的氧化脅迫。RGC還可以未受醫(yī)學(xué)治療的具有中度高血壓的對(duì)象中的降低舒張和收縮血 壓。
[0431] 實(shí)施例8:隨機(jī)、雙盲、安慰劑對(duì)照的紅葡萄細(xì)胞（RGC)粉末攝取對(duì)健康的適度訓(xùn) 練的自行車運(yùn)動(dòng)員的量度的作用的研究
[0432] 實(shí)驗(yàn)步驟
[0433] 根據(jù)實(shí)施例1制備RGC細(xì)胞培養(yǎng)物粉末。
[0434] 在三組健康的適度訓(xùn)練的自行車運(yùn)動(dòng)員進(jìn)行臨床研究。15個(gè)對(duì)象接受劑量為 200mg每天的RGC，并且14個(gè)對(duì)象接受劑量為lOOOmg每天的RGC，共六周。15個(gè)對(duì)象（對(duì) 照組）接受安慰劑六周。
[0435] 在攝取RGC前的基線訪視，所述對(duì)象經(jīng)歷人體測(cè)量學(xué)檢測(cè)，包括體重和身高和體 脂百分比測(cè)量。然后所述對(duì)象經(jīng)歷使用固定的自行車測(cè)力器的心肺運(yùn)動(dòng)測(cè)試。所測(cè)量的參 數(shù)包括靜息和運(yùn)動(dòng)高峰期的心率和血液，以及一系列有氧健身參數(shù)。在攝取RGC或安慰劑 六周后，重復(fù)精確的測(cè)量。
[0436] 如表18中可見(jiàn)的，補(bǔ)充后僅在兩個(gè)RGC組中發(fā)現(xiàn)靜息舒張血壓的顯著的5% -6% 的降低。相似地，平均靜息收縮壓也更低。測(cè)量舒張和收縮血壓降低的對(duì)象的數(shù)量表明，與 安慰劑相比，兩個(gè)RGC組中這樣的對(duì)象的數(shù)量將近兩倍。
[0437] 在運(yùn)動(dòng)高峰期（表19)，僅在低劑量組中在研究結(jié)束時(shí)舒張血壓更低，具有邊界 (borderline)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。與安慰劑組相比，在兩個(gè)RGC組中，在研究結(jié)束時(shí)運(yùn)動(dòng)高峰期 舒張血壓降低的參與者的數(shù)量都要高超過(guò)三倍。對(duì)于高峰期的最大收縮血壓測(cè)量觀察到相 似的趨勢(shì)。
[0438] 表18顯示在基線和在研究結(jié)束時(shí)的平均靜息心率和血壓以及其組間差異的數(shù) 據(jù)。各參數(shù)改進(jìn)的參與者的比例也在括號(hào)中顯示。
[0439]
[0441] 表19顯示在基線和在研究結(jié)束時(shí)的最大有氧能力的度量以及其組間差異的數(shù) 據(jù)。各參數(shù)改進(jìn)的參與者的比例也在括號(hào)中顯示。
[0442]
[0443] 雖然本發(fā)明的某些特征在本文已經(jīng)例證和描述，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員對(duì)本發(fā)明可 以進(jìn)行一些修改、取代、改變和等價(jià)處理。因此，應(yīng)理解所附權(quán)利要求涵蓋在本發(fā)明原理內(nèi) 的所有這些修改和變化。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 用于治療、減輕、緩解或預(yù)防代謝綜合征或代謝疾病的方法，所述方法包括施用包含 體外生長(zhǎng)的果實(shí)細(xì)胞的細(xì)胞系愈傷組織培養(yǎng)物的組合物。2. 權(quán)利要求1的方法，其中所述果實(shí)細(xì)胞是葡萄漿果細(xì)胞。3. 用于治療患有代謝綜合征的對(duì)象中的選自如下的一或多種病癥的方法： 冠心?。▌?dòng)脈粥樣硬化）、血壓、缺血性疾病、心臟衰竭、動(dòng)脈粥樣硬化、慢性腎?。–KD) 和腎臟疾病、系統(tǒng)性硬化、慢性心臟衰竭、高血壓、糖尿病、高脂血癥、糖耐量異常、肝性脂肪 變性、高血糖癥、糖尿病前狀態(tài)、新發(fā)糖尿病、胰島素抗性、糖尿病、空腹血糖異常、高甘油三 酯血癥、抗炎癥（脂聯(lián)素）、高膽固醇血癥、低HDL水平、脂肪肝和肥胖癥， 所述方法包括給所述對(duì)象施用包含體外生長(zhǎng)的果實(shí)細(xì)胞的細(xì)胞系愈傷組織培養(yǎng)物的 組合物的步驟。4. 用于治療或預(yù)防對(duì)象中的選自如下的一或多種病癥的方法： 冠心?。▌?dòng)脈粥樣硬化）、血壓、缺血性疾病、心臟衰竭、動(dòng)脈粥樣硬化、慢性腎病（CKD) 和腎臟疾病、系統(tǒng)性硬化、慢性心臟衰竭、高血壓、糖尿病、高脂血癥、糖耐量異常、肝性脂肪 變性、高血糖癥、糖尿病前狀態(tài)、新發(fā)糖尿病、胰島素抗性、糖尿病、空腹血糖異常、高甘油三 酯血癥、抗炎癥（脂聯(lián)素）、高膽固醇血癥、低HDL水平、脂肪肝和肥胖癥， 所述方法包括給所述對(duì)象施用包含體外生長(zhǎng)的果實(shí)細(xì)胞的細(xì)胞系愈傷組織培養(yǎng)物的 組合物的步驟。5. 權(quán)利要求3和4任一項(xiàng)的方法，其中所述一或多種病癥是高血壓、高甘油三酯血癥和 糖尿病。6. 權(quán)利要求1的方法，其中所述葡萄漿果細(xì)胞的細(xì)胞系愈傷組織培養(yǎng)物源自葡萄漿果 橫切片、葡萄漿果皮、葡萄漿果肉、葡萄種子、葡萄有種子或無(wú)種子栽培種的胚或葡萄種皮 中的一或多種。7. 權(quán)利要求1的方法，其中所述組合物是營(yíng)養(yǎng)組合物。8. 權(quán)利要求1的方法，其中所述營(yíng)養(yǎng)組合物的形式選自漱口水、粉末、條、泡沫、口香 糖、口腔噴霧劑、錠劑、膠囊、牙膏、食品成分添加劑（飲食補(bǔ)劑）、食品成分和食品以及飲 料。9. 權(quán)利要求1的方法，其中所述營(yíng)養(yǎng)組合物或干燥的體外生長(zhǎng)的果實(shí)細(xì)胞的細(xì)胞系愈 傷組織培養(yǎng)物是無(wú)味的。10. 權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)的方法，其中所述果實(shí)細(xì)胞的細(xì)胞系愈傷組織培養(yǎng)物是根據(jù) 大規(guī)模方法制備的，所述大規(guī)模方法包括： 使果實(shí)細(xì)胞在瓶中生長(zhǎng)； 將果實(shí)細(xì)胞從所述瓶接種到第一生物反應(yīng)器中； 將果實(shí)細(xì)胞從所述第一生物反應(yīng)器接種到另一個(gè)生物反應(yīng)器中，其中所述另一生物反 應(yīng)器是最后的生物反應(yīng)器或者是中間生物反應(yīng)器，且其中所述第一生物反應(yīng)器和另一個(gè)生 物反應(yīng)器的至少一個(gè)是一次性的；及 從最后的生物反應(yīng)器收獲果實(shí)細(xì)胞； 其中使從最后的生物反應(yīng)器收獲的果實(shí)細(xì)胞干燥。11. 權(quán)利要求10的大規(guī)模方法，其中用于該方法中的每個(gè)生物反應(yīng)器的大小大于果實(shí) 細(xì)胞先前在其中生長(zhǎng)的生物反應(yīng)器。12. 權(quán)利要求10的大規(guī)模方法，其中如果所述另一個(gè)生物反應(yīng)器是中間生物反應(yīng)器， 則進(jìn)行另外的將果實(shí)細(xì)胞接種于另一個(gè)中間生物反應(yīng)器或者最后的生物反應(yīng)器的步驟。13. 權(quán)利要求10的大規(guī)模方法，其中所述第一生物反應(yīng)器或另一個(gè)生物反應(yīng)器是4-10 升的生物反應(yīng)器。14. 權(quán)利要求10的大規(guī)模方法，其中所述第一生物反應(yīng)器或另一個(gè)生物反應(yīng)器是 10-50升的生物反應(yīng)器。15. 權(quán)利要求10的大規(guī)模方法，其中所述第一生物反應(yīng)器或另一個(gè)生物反應(yīng)器是 50-200升的生物反應(yīng)器。16. 權(quán)利要求10的大規(guī)模方法，其中所述第一生物反應(yīng)器或另一個(gè)生物反應(yīng)器是 200-500升的生物反應(yīng)器。17. 權(quán)利要求10的大規(guī)模方法，其中所述第一生物反應(yīng)器或另一個(gè)生物反應(yīng)器是 200-1000升的生物反應(yīng)器。18. 權(quán)利要求10的大規(guī)模方法，其中果實(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)于Gamborg B5培養(yǎng)基中。19. 權(quán)利要求18的大規(guī)模方法，其中所述Gamborg B5培養(yǎng)基補(bǔ)充有鎂鹽、磷酸鹽或硝 酸鹽或者其組合。20. 權(quán)利要求18的大規(guī)模方法，其中所述Gamborg B5培養(yǎng)基補(bǔ)充有KNO 3、MgS04、MgN03 或NaH2PO4或者其組合。21. 權(quán)利要求10的大規(guī)模方法，其中所述一次性生物反應(yīng)器是由一或多層聚乙烯制 成。22. 權(quán)利要求21的大規(guī)模方法，其中所述一次性生物反應(yīng)器是由聚乙烯內(nèi)層和外層及 中間的尼龍層制成。23. 權(quán)利要求18的大規(guī)模方法，其中所述Gamborg B5培養(yǎng)基不包含植物激素。24. 用于治療、減輕、緩解或預(yù)防代謝綜合征或代謝疾病的方法，所述方法包括施用包 含果實(shí)細(xì)胞的細(xì)胞系愈傷組織培養(yǎng)物的組合物，所述果實(shí)細(xì)胞是根據(jù)包括如下步驟的方法 制備的： 使果實(shí)細(xì)胞在瓶中生長(zhǎng)； 將果實(shí)細(xì)胞從所述瓶接種到第一生物反應(yīng)器中； 將果實(shí)細(xì)胞從所述第一生物反應(yīng)器接種到另一個(gè)生物反應(yīng)器中，其中所述另一生物反 應(yīng)器是最后的生物反應(yīng)器或者是中間生物反應(yīng)器，且其中所述第一生物反應(yīng)器和另一個(gè)生 物反應(yīng)器的至少一個(gè)是一次性的；及 從最后的生物反應(yīng)器收獲果實(shí)細(xì)胞； 其中使從最后的生物反應(yīng)器收獲的果實(shí)細(xì)胞干燥。25. 用于治療、減輕、緩解或預(yù)防炎癥的方法，所述方法包括施用包含果實(shí)細(xì)胞的細(xì)胞 系愈傷組織培養(yǎng)物的組合物，所述果實(shí)細(xì)胞是根據(jù)包括如下步驟的方法制備的： 使果實(shí)細(xì)胞在瓶中生長(zhǎng)； 將果實(shí)細(xì)胞從所述瓶接種到第一生物反應(yīng)器中； 將果實(shí)細(xì)胞從所述第一生物反應(yīng)器接種到另一個(gè)生物反應(yīng)器中，其中所述另一生物反 應(yīng)器是最后的生物反應(yīng)器或者是中間生物反應(yīng)器，且其中所述第一生物反應(yīng)器和另一個(gè)生 物反應(yīng)器的至少一個(gè)是一次性的；及 從最后的生物反應(yīng)器收獲果實(shí)細(xì)胞； 其中使從最后的生物反應(yīng)器收獲的果實(shí)細(xì)胞干燥。26. 權(quán)利要求1的方法，其中所述組合物每天施用一次。27. 粉末形式的組合物，其包含大規(guī)模方法中體外生長(zhǎng)的葡萄漿果細(xì)胞的細(xì)胞系愈傷 組織培養(yǎng)物，其中所述葡萄漿果細(xì)胞的細(xì)胞系愈傷組織培養(yǎng)物源自葡萄漿果橫切片、葡萄 漿果皮、葡萄漿果肉、葡萄種子、葡萄有種子或無(wú)種子栽培種的胚或葡萄種皮中的一或多 種；其中所述葡萄漿果細(xì)胞的細(xì)胞系愈傷組織培養(yǎng)物包含白藜蘆醇的量為至少l〇〇〇mg/kg 粉末。28. 權(quán)利要求27的組合物，其特征在于在施用一次所述組合物后血漿中白藜蘆醇的濃 度的兩個(gè)峰。29. 降低對(duì)象中的血壓的方法，其包括給所述對(duì)象施用包含體外生長(zhǎng)的果實(shí)細(xì)胞的細(xì) 胞系愈傷組織培養(yǎng)物的組合物的步驟。
【專利摘要】本發(fā)明的實(shí)施方案描述用于治療、減輕、緩解或預(yù)防代謝綜合征或代謝疾病的方法，所述方法包括施用包含體外生長(zhǎng)的果實(shí)細(xì)胞的細(xì)胞系愈傷組織培養(yǎng)物的組合物。另外的實(shí)施方案進(jìn)一步描述根據(jù)大規(guī)模方法制備的果實(shí)細(xì)胞。根據(jù)本發(fā)明的方法生產(chǎn)的葡萄漿果細(xì)胞的細(xì)胞系愈傷組織培養(yǎng)物包含白藜蘆醇的量為至少1000mg/kg粉末。
【IPC分類】A61K8/97, A01N63/00, A01H9/00, C12Q1/02
【公開(kāi)號(hào)】CN105072913
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201380073592
【發(fā)明人】Y·哈加伊, M·阿巴爾格爾, M·阿扎希, Y·羅斯, R·亞圖夫
【申請(qǐng)人】生物收獲有限公司
【公開(kāi)日】2015年11月18日
【申請(qǐng)日】2013年12月24日
【公告號(hào)】EP2938197A2, WO2014102776A2, WO2014102776A3