中的蛋白質(zhì)或酶在儲(chǔ)存時(shí)和當(dāng)暴露在較高溫度下時(shí)基本上 保持其物理和化學(xué)穩(wěn)定性和完整性的制劑。用于測(cè)量肽穩(wěn)定性的各種分析技術(shù)是本領(lǐng)域中 已知的并且綜述在以下文獻(xiàn)中：Peptide and Protein Drug Delivery, 247-301，Vincent Lee 編，Marcel Dekker，Inc.，New York, N.Y.，Pubs. (1991)和 Jones, A. (1993) Adv. Drug Delivery Rev. 10:29-90。穩(wěn)定性可以在選定溫度下測(cè)量持續(xù)選定時(shí)段。
[0044] "哺乳動(dòng)物"對(duì)于治療目的是指任何被歸類為哺乳動(dòng)物中的動(dòng)物，包括人、家畜和 農(nóng)畜，以及動(dòng)物園動(dòng)物、運(yùn)動(dòng)玩賞用動(dòng)物，諸如狗、馬、貓、牛等。優(yōu)選地，哺乳動(dòng)物是人。
[0045] "病癥"是指任何從用本發(fā)明要求保護(hù)的方法和組合物的治療中受益的任何病況。
[0046] I.包含環(huán)丙沙星的脂質(zhì)體的產(chǎn)生
[0047] 根據(jù)本發(fā)明的各方面，提供了通過(guò)將環(huán)丙沙星和其它抗感染藥物包封在脂質(zhì)體內(nèi) 而配制環(huán)丙沙星和其它抗感染藥物的方法。由生物相容的和生物可降解的天然存在的材料 組成的脂質(zhì)體用于包封生物學(xué)活性材料用于許多目的。已經(jīng)開(kāi)發(fā)了制備具有許多層、大小、 表面電荷和組成的脂質(zhì)體和在該脂質(zhì)體內(nèi)包封藥物的許多方法，其中有一些已經(jīng)按比例放 大到工業(yè)水平。脂質(zhì)體可被設(shè)計(jì)用于作為持續(xù)釋放藥物儲(chǔ)庫(kù)并且在某些應(yīng)用中幫助藥物穿 過(guò)細(xì)胞膜。
[0048] 脂質(zhì)體的持續(xù)釋放性質(zhì)可通過(guò)脂質(zhì)膜的性質(zhì)以及通過(guò)在脂質(zhì)體組合物內(nèi)包含其 它的賦形劑進(jìn)行調(diào)節(jié)。多年以來(lái)對(duì)脂質(zhì)體技術(shù)的廣泛研宄已經(jīng)獲得了基于脂質(zhì)體制劑的組 成對(duì)藥物釋放速率進(jìn)行合理的預(yù)測(cè)。藥物釋放速率主要依賴于磷脂的性質(zhì)例如氫化（一H) 或未氫化（一G)或磷脂/膽固醇的比率（這一比率越高，則釋放速率越快）、活性成分的親 水性/親脂性及脂質(zhì)體的制造方法的不同而異。
[0049] 制造生物粘附性脂質(zhì)體的方法可見(jiàn)于U. S. 5, 401，511 (其作為參考被全文并入本 文）以及其中所引述的專利和公報(bào)，其描述了脂質(zhì)體和脂質(zhì)體的制造方法。最近幾年中，已 經(jīng)成功地對(duì)脂質(zhì)體結(jié)合了不同的物質(zhì)。例如，已經(jīng)研宄了將糜蛋白酶結(jié)合到脂質(zhì)體作為用 于將物質(zhì)結(jié)合到脂質(zhì)體表面的模型?？紤]到包括抗體、糖蛋白和凝集素在內(nèi)的物質(zhì)已被結(jié) 合到脂質(zhì)體表面以試圖比較脂質(zhì)體的靶向特異性。
[0050] 脂質(zhì)體表面上用于共價(jià)結(jié)合的離散位點(diǎn)的數(shù)目和表面密度受脂質(zhì)體制劑和脂質(zhì) 體類型支配。脂質(zhì)體表面還具有非共價(jià)結(jié)合的位點(diǎn)。共價(jià)結(jié)合是優(yōu)選的，因?yàn)榉枪矁r(jià)結(jié)合 可能導(dǎo)致在給藥部位處所考慮的物質(zhì)與脂質(zhì)體發(fā)生分離，因?yàn)橹|(zhì)體和目標(biāo)位點(diǎn)的生物粘 附性配對(duì)物（即生物粘附性物質(zhì)）爭(zhēng)奪被考慮的物質(zhì)。這種分離將被給予的經(jīng)過(guò)修飾的脂 質(zhì)體逆轉(zhuǎn)形成規(guī)則的未經(jīng)修飾的脂質(zhì)體，從而使得給藥經(jīng)修飾的脂質(zhì)體的給藥目的失敗。
[0051] 為了形成被考慮的物質(zhì)與脂質(zhì)體的共價(jià)綴合物，已經(jīng)研宄了交聯(lián)試劑用于有效性 和生物相容性。一個(gè)這種試劑是戊二醛（GAD)。通過(guò)GAD交聯(lián)的復(fù)合化學(xué)，建立了被考慮的 物質(zhì)的胺殘基與脂質(zhì)體之間的鏈接。
[0052] 交聯(lián)試劑可包括戊二醛（GAD)和水溶性的碳二亞胺，優(yōu)選1-乙基-3-(3-二甲基 氨基丙基）碳二亞胺（EDC)。被考慮的物質(zhì)包括明膠、膠原和透明質(zhì)酸（HA)。在這些方法 之后，被考慮的物質(zhì)可被用作附著劑或膠質(zhì)以附著于脂質(zhì)體，到達(dá)目標(biāo)區(qū)域諸如肺上。
[0053] 因此，盡管對(duì)于本發(fā)明是可有可無(wú)的，但是這種生物粘附性脂質(zhì)體的使用，特別是 那些具有透明質(zhì)酸作為生物粘附性配體的脂質(zhì)體的使用，將可能增加在肺部的渚留時(shí)間， 減少粘膜纖毛清除和巨噬細(xì)胞攝取。
[0054] 通常，在本發(fā)明制劑中優(yōu)選使用環(huán)丙沙星，盡管可使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其 它抗生素或抗感染藥物。
[0055] 根據(jù)本領(lǐng)域公知技術(shù)制備多層小泡（MLV)。簡(jiǎn)而言之，在一實(shí)施方案中，將脂質(zhì)稱 重并溶解在適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑（諸如氯仿或氯仿-甲醇混合物）中。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中在低 壓下在約37-40°C的溫度下將有機(jī)溶劑蒸發(fā)到全干。在蒸發(fā)后，將環(huán)丙沙星溶液加入到干 脂質(zhì)膜。有力地混合該系統(tǒng)，然后在例如振蕩浴室中在適于脂質(zhì)組合物的溫度范圍下溫育 約2小時(shí)。然后優(yōu)選通過(guò)例如加入十分之一體積的10倍濃縮的pH 7. 4的磷酸鹽緩沖鹽水 (PBS)對(duì)該制備物進(jìn)行緩沖。
[0056] 在一實(shí)施方案中，如上所述產(chǎn)生的MLV用作酸性單層小泡（ULV)的源材料。例如， MLV如上所述進(jìn)行制備并在諸如例如由Lipex Biomembranes Inc. (Vancouver, British Columbia)制造的裝置中經(jīng)歷擠出過(guò)程。擠出通過(guò)一系列具有逐漸變小的孔徑的膜進(jìn)行，諸 如，例如，從范圍在0. 8到1. 0微米的孔徑開(kāi)始（每個(gè)孔徑大小進(jìn)行1到2次循環(huán)）并終止 于根據(jù)所需脂質(zhì)體大小所選擇的孔徑大小范圍（例如，在最終的孔徑大小下進(jìn)行約7次擠 出循環(huán)）。
[0057] 示例性的脂質(zhì)體組合物及其制造方法公開(kāi)在美國(guó)專利6, 890, 555 ;6, 855, 296 ; 6, 770, 291 ;6, 759, 057 ;6, 623, 671 ;6, 534, 018 ; ;6, 316, 024 ;6, 221，385 和 6, 197, 333 中， 所有這些專利并入本文作為參考。本發(fā)明的脂質(zhì)體可以是多層、單層的，或諸如在上述專利 中所述的任何已知的結(jié)構(gòu)。本發(fā)明的脂質(zhì)體優(yōu)選由生物相容性脂質(zhì)制造。通常，產(chǎn)生的脂 質(zhì)體的大小根據(jù)遞送方式而異而具有寬范圍，例如，對(duì)于肺遞送，直徑為1納米到10微米或 20納米到1微米或約100納米±20%。
[0058] II.包含環(huán)丙沙星的脂質(zhì)體的藥物制劑
[0059] 在優(yōu)選方案中，用脂質(zhì)體包封的環(huán)丙沙星在氣霧吸入裝置中被給藥到患者，但是 可通過(guò)IV途徑給予。在一些實(shí)施方案中，環(huán)丙沙星與也被包封的其它藥物組合被包封在脂 質(zhì)體內(nèi)。在一些實(shí)施方案中，環(huán)丙沙星與未包封的其它藥物組合被包封在脂質(zhì)體內(nèi)。在一 些實(shí)施方案中，脂質(zhì)體與未包封的環(huán)丙沙星、與未包封的藥物或其不同組合進(jìn)行組合給藥。
[0060] 本發(fā)明的制劑可包括包含環(huán)丙沙星并結(jié)合一定量的有效增強(qiáng)脂質(zhì)體穿過(guò)患者的 肺表面并進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)內(nèi)的肺泡表面活性物質(zhì)蛋白的脂質(zhì)體。1991年4月9日授權(quán)的美國(guó) 專利No. 5, 006, 343 (其作為參考并入本文）公開(kāi)了脂質(zhì)體和用于肺內(nèi)遞送的脂質(zhì)體制劑。 美國(guó)專利No. 5, 006, 343中公開(kāi)的制劑和方法可進(jìn)行改編以應(yīng)用環(huán)丙沙星并且可被包含在 本發(fā)明的遞送裝置內(nèi)從而提供了對(duì)囊性纖維化患者的有效治療。
[0061] 不管藥物制劑的形式如何，優(yōu)選制造用于吸入的小滴或粒子處在約0.5 ym到 12 ym，優(yōu)選1 ym到6 ym，更優(yōu)選約2-4 ym的范圍內(nèi)。通過(guò)制造具有相對(duì)較窄粒度范圍的 吸入粒子，有可能進(jìn)一步增加藥物遞送系統(tǒng)的效率和改善劑量給藥的再現(xiàn)性。因此，優(yōu)選粒 子不僅具有在〇. 5 ym到12 ym或2 ym到6 ym或約3-4 ym范圍內(nèi)的粒度，而且平均粒度處 在窄范圍內(nèi)以便被遞送給患者的80%以上的粒子具有的粒子直徑位于平均粒度的±20% 內(nèi)，優(yōu)選位于平均粒度的±10%和更優(yōu)選平均粒度的±5%內(nèi)。
[0062] 本發(fā)明的制劑可使用一次性包裝和便攜式的、手持式的、電池供電的裝置諸如 AERx裝置被給藥到患者（美國(guó)專利No. 5, 823, 178, Aradigm，Hayward，CA)。作為替代，本發(fā) 明的制劑可使用機(jī)械（非電子）裝置進(jìn)行。其它吸入裝置可用于遞送制劑，包括常規(guī)的噴 射噴霧器，超聲噴霧器，軟霧吸入器，干粉吸入器0PI)，計(jì)量式劑量吸入器（MDIs)，凝結(jié)氣 溶膠發(fā)生器和其它系統(tǒng)。
[0063] 氣霧劑可通過(guò)使藥物強(qiáng)行通過(guò)具有孔大小在約0. 25到6微米范圍內(nèi)的孔的膜來(lái) 產(chǎn)生（美國(guó)專利5, 823, 178)。當(dāng)孔具有這一大小時(shí)，脫離通過(guò)該孔而產(chǎn)生氣霧劑的粒子的 直徑將為〇. 5到12微米。
[0064] 藥物粒子可隨著試圖保持處在這一粒度范圍內(nèi)的粒子的氣流被釋放。小粒子的產(chǎn) 生可通過(guò)利用振動(dòng)裝置得以促進(jìn)，所述振動(dòng)裝置提供了約800到約4000千赫的振動(dòng)頻率。 本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠認(rèn)識(shí)到，基于制劑的密度和粘度，可對(duì)諸如由其釋放藥物的孔的大小、 振動(dòng)頻率、壓力和其它參數(shù)的參數(shù)進(jìn)行一些調(diào)整，切記一些實(shí)施方案的目的是提供具有直 徑在約0. 5到12微米范圍內(nèi)的氣霧化粒子。
[0065] 脂質(zhì)體制劑可以是低粘度液體制劑。藥物自身或結(jié)合載體的粘度應(yīng)當(dāng)足夠低以便 該制劑可以被迫使脫離出孔以形成氣霧劑，例如，使用20到200psi以形成優(yōu)選具有的粒度 為約0. 5到12微米的氣霧劑。
[0066] 在一實(shí)施方案中，低沸點(diǎn)易揮發(fā)推進(jìn)劑與本發(fā)明的脂質(zhì)體和可藥用賦形劑組合使 用。脂質(zhì)體可作為在推進(jìn)劑中的懸浮液或干粉末形式被提供，或者，在另一個(gè)實(shí)施方案中， 脂質(zhì)體被溶解在位于推進(jìn)劑內(nèi)的溶液中。這兩種制劑可被容易地容納在具有閥作為其唯一 開(kāi)口的容器中。因?yàn)橥七M(jìn)劑是易揮發(fā)的，即，具有低沸點(diǎn)，因此容器的內(nèi)容物處在壓力下。
[0067] 根據(jù)另一個(gè)制劑，包含環(huán)丙沙星的脂質(zhì)體作為單獨(dú)的干粉劑形式被提供，并且根 據(jù)又一個(gè)制劑，包含環(huán)丙沙星的脂質(zhì)體作為溶液制劑形式被提供。干粉末可通過(guò)允許僅僅 在用于每次遞送的相同計(jì)量的吸氣流速和吸氣體積條件下被吸入被直接吸入。粉末可被 溶解在水性溶劑中以產(chǎn)生溶液，該溶液穿過(guò)多孔膜以得到用于吸入的氣霧劑。使得有可能 制造可借助于肺內(nèi)途徑被吸入并遞送給患者的包含環(huán)丙沙星的脂質(zhì)體的氣霧化形式的任 何制劑可與本發(fā)明關(guān)聯(lián)使用。關(guān)于可與氣霧化遞送裝置關(guān)聯(lián)使用的制劑的具體信息描述于 Remington's Pharmaceutical Sciences, A. R. Gennaro 編者（最新版本）Mack Publishing Company中。關(guān)于胰島素制劑，其也可用于關(guān)注Sciarra等人，（1976)的發(fā)現(xiàn)。當(dāng)使用低 沸點(diǎn)發(fā)射劑時(shí)，發(fā)射劑被保持在裝置的加壓罐內(nèi)并保持為液體狀態(tài)。當(dāng)閥被啟動(dòng)時(shí)，推進(jìn)劑 被釋放并強(qiáng)迫活性成分與推進(jìn)劑一起從罐中被釋放。推進(jìn)劑當(dāng)暴露于周圍氣氛下時(shí)將"消 失"，即，推進(jìn)劑立即蒸發(fā)。消失發(fā)生如此快使得實(shí)際上基本上純的活性成分被遞送到患者 的肺。
[0068] III?劑量給藥方案
[0069] 基于以上所述，本領(lǐng)域技術(shù)人員可理解的是，可使用許多的不同的療法和給藥手 段來(lái)治療單個(gè)患者。因此，已經(jīng)接受這種藥物例如作為靜脈內(nèi)給藥的環(huán)丙沙星或抗生素等