Herceptin'處理72小時(shí)且沒有用LGT-E預(yù)處理的 HerceptinK.抗性、HER2-陽(yáng)性乳腺導(dǎo)管癌系BT474-TXR的磺酰羅丹明B(SRB)細(xì)胞生存力 測(cè)定結(jié)果。
[0038] 表28報(bào)告了用12. 5 μ g/ml的LGT-E預(yù)處理、隨后用多種濃度的拉帕替尼處理72 小時(shí)的Herceptin?.抗性、HER2-陽(yáng)性乳腺導(dǎo)管癌BT474-TXR細(xì)胞的SRB細(xì)胞生存力測(cè)定 結(jié)果。
[0039] 表29報(bào)告了用多種濃度的拉帕替尼處理72小時(shí)且沒有用LGT-E預(yù)處理的 HerceptinH抗性、HER2-陽(yáng)性乳腺導(dǎo)管癌BT474-TXR細(xì)胞的SRB細(xì)胞生存力測(cè)定結(jié)果。
[0040] 表30報(bào)告了用25 μ g/ml的LGT-E預(yù)處理、隨后用多種濃度的拉帕替尼處理72小 時(shí)的Herceptin"杭性、HER2-陽(yáng)性乳腺導(dǎo)管癌BT474-TXR細(xì)胞的SRB細(xì)胞生存力測(cè)定結(jié) 果。
[0041] 表31報(bào)告了用多種濃度的拉帕替尼處理72小時(shí)且沒有用LGT-E預(yù)處理的 Herceptinljt性、HER2-陽(yáng)性乳腺導(dǎo)管癌BT474-TXR細(xì)胞的SRB細(xì)胞生存力測(cè)定結(jié)果。
[0042] 表32報(bào)告了在拉帕替尼敏感性、HER2-陽(yáng)性乳腺癌系中拉帕替尼敏感度的拉帕替 尼劑量響應(yīng)分析的SRB細(xì)胞生存力測(cè)定結(jié)果。
[0043] 表33報(bào)告了在拉帕替尼抗性、HER2-陽(yáng)性乳腺癌系中拉帕替尼敏感度的拉帕替尼 劑量響應(yīng)分析的SRB細(xì)胞生存力測(cè)定結(jié)果。
[0044] 表34報(bào)告了用12. 5 μ g/ml的LGT-E預(yù)處理、隨后用多種濃度的拉帕替尼處理72 小時(shí)的拉帕替尼抗性、HER2-陽(yáng)性乳腺癌SkBr3-TxR細(xì)胞的SRB細(xì)胞生存力測(cè)定結(jié)果。
[0045] 表35報(bào)告了用多種濃度的拉帕替尼處理72小時(shí)且沒有用LGT-E預(yù)處理的拉帕替 尼抗性、HER2-陽(yáng)性乳腺癌SkBr3-TxR細(xì)胞的SRB細(xì)胞生存力測(cè)定結(jié)果。
[0046] 表36報(bào)告了用25 μ g/ml的LGT-E預(yù)處理、隨后用多種濃度的柔紅霉素處理72小 時(shí)的柔紅霉素敏感性髓性白血病K562細(xì)胞的SRB細(xì)胞生存力測(cè)定結(jié)果。
[0047] 表37報(bào)告了用多種濃度的柔紅霉素處理72小時(shí)且沒有用LGT-E預(yù)處理的柔紅霉 素敏感性髓性白血病K562細(xì)胞的SRB細(xì)胞生存力測(cè)定結(jié)果。
[0048] 表38報(bào)告了用25 μ g/ml的LGT-E預(yù)處理、隨后用多種濃度的柔紅霉素處理72小 時(shí)的柔紅霉素抗性髓性白血病K562/D〇X細(xì)胞的SRB細(xì)胞生存力測(cè)定結(jié)果。
[0049] 表39報(bào)告了用多種濃度的柔紅霉素處理72小時(shí)且沒有用LGT-E預(yù)處理的柔紅霉 素抗性髓性白血病K562/D 〇X細(xì)胞的SRB細(xì)胞生存力測(cè)定結(jié)果。
[0050] 附圖簡(jiǎn)述
[0051] 圖1示出了雷公藤㈧根皮和⑶木質(zhì)部組織的高壓液相色譜-二極管-陣列檢 測(cè)（HPLC-DAD)色譜指紋。
[0052] 圖2示出了雷公藤提取物產(chǎn)品-雷公藤提取物（LGT-E)的液相色譜和質(zhì)譜色譜 圖。
[0053] 圖3示出了來自用（A) 12 μ g/ml的雷公藤提取物（LGT-E)或（B) 25 μ g/ml的LGT-E 預(yù)處理、隨后用多種濃度的多西他賽處理72小時(shí)的多西他賽抗性PC3-TxR細(xì)胞的磺酰羅丹 明B(SRB)細(xì)胞生存力測(cè)定結(jié)果。參見表1-4。
[0054] 圖 4 示出了來自用⑷ 50 μ g/ml 的 LGT-E、（B) 25 μ g/ml 的 LGT-E 或（C) 12. 5 μ g/ ml的LGT-E預(yù)處理、隨后用多種濃度的多西他賽處理72小時(shí)的多西他賽抗性DU145-TxR細(xì) 胞的磺酰羅丹明B(SRB)細(xì)胞生存力測(cè)定結(jié)果。參見表5-10。
[0055] 圖5示出了來自（A)多西他賽抗性的PC3-TxR細(xì)胞和（B)多西他賽敏感性PC3細(xì) 胞的多西他賽劑量響應(yīng)分析的磺酰羅丹明B(SRB)細(xì)胞生存力測(cè)定結(jié)果。參見表11和12。
[0056] 圖6示出了來自（A)多西他賽敏感性PC3和多西他賽抗性PC3-TXR細(xì)胞以及（B) 多西他賽敏感性DU145細(xì)胞和多西他賽抗性DU145-TXR細(xì)胞的磺酰羅丹明B(SRB)細(xì)胞生 存力測(cè)定結(jié)果。參見表13-16。
[0057] 圖7示出了來自用50 μ g/ml的LGT-E預(yù)處理的多西他賽敏感性DU145細(xì)胞的多 西他賽劑量響應(yīng)分析的磺酰羅丹明B(SRB)細(xì)胞生存力測(cè)定結(jié)果。參見表19-20。
[0058] 圖8示出了來自用13μ g/ml的LGT-E預(yù)處理的Herceptinw^感性、HER2陽(yáng)性 乳腺導(dǎo)管癌系BT474的Herceptiii?^^量響應(yīng)分析的磺酰羅丹明B(SRB)細(xì)胞生存力測(cè)定 結(jié)果。參見表21-22。
[0059] 圖9示出了來自用13 μ g/ml的LGT-E預(yù)處理Herceptin'抗性、HER2陽(yáng)性乳腺 導(dǎo)管癌系BT474/Her的丨Ierceptinli劑量響應(yīng)分析的磺酰羅丹明B(SRB)細(xì)胞生存力測(cè)定 結(jié)果。參見表23-24。
[0060] 圖?ο示出了來自Herceptin?'敏感性BT474細(xì)胞的Herceptin?劑量響應(yīng)分析 的磺酰羅丹明B(SRB)細(xì)胞生存力測(cè)定結(jié)果。參見表25。
[0061 ]圖11出示了來自用Ι3μ g/ml的LGT-E預(yù)處理的Herceptin?杭性、HER2陽(yáng)性乳 腺導(dǎo)管癌系BT474/Her的Herceptin11劑量響應(yīng)分析的磺酰羅丹明B(SRB)細(xì)胞生存力測(cè) 定結(jié)果。參見表26-27。
[0062] 圖12示出了來自用（A) 12 μ g/ml或⑶25 μ g/ml的LGT-E預(yù)處理、隨后用多種濃 度的拉帕替尼處理72小時(shí)的Herceptin?抗性、HER2陽(yáng)性乳腺導(dǎo)管癌BT474-TXR細(xì)胞的 磺酰羅丹明B(SRB)細(xì)胞生存力測(cè)定結(jié)果。參見表28-31。
[0063] 圖13示出了來自拉帕替尼敏感性、HER2陽(yáng)性乳腺癌系SkBr3對(duì)其拉帕替尼抗性 亞系SkBr3-TxR的拉帕替尼敏感度的拉帕替尼劑量響應(yīng)分析的磺酰羅丹明B(SRB)細(xì)胞生 存力測(cè)定結(jié)果。參見表32-33。
[0064] 圖14示出了來自用12. 5 μ g/ml的LGT-E預(yù)處理、隨后用多種濃度的拉帕替尼處 理72小時(shí)的拉帕替尼抗性、HER2陽(yáng)性乳腺癌SkBr3-TxR細(xì)胞的磺酰羅丹明B(SRB)細(xì)胞生 存力測(cè)定結(jié)果。參見表34-35。
[0065] 圖15示出了來自用25 μ g/ml的LGT-E預(yù)處理、隨后用多種濃度的柔紅霉素處理 72小時(shí)的柔紅霉素敏感性髓性白血病K562細(xì)胞的磺酰羅丹明B(SRB)細(xì)胞生存力測(cè)定結(jié) 果。參見表36-37。
[0066] 圖16示出了用25 μ g/ml的LGT-E預(yù)處理、隨后用多種濃度的柔紅霉素處理72個(gè) 小時(shí)的柔紅霉素抗性髓性白血病K562/D〇X細(xì)胞的磺酰羅丹明B(SRB)細(xì)胞生存力測(cè)定結(jié) 果。參見表38-39。
[0067] 圖9例示了體內(nèi)LGT-E的化學(xué)增敏作用。圖17A涉及在15天的用20mg/kg體 重的多西他賽處理期間，SCID小鼠腫瘤寄主中PC3-TxR細(xì)胞腫瘤相對(duì)于多西他賽敏感性 PC3-ATCC細(xì)胞腫瘤針對(duì)腫瘤大小的多西他賽抗性，施用多西他賽的第0天為Doc處理的第 1天。圖17B涉及LGT-E(500mg/kg體重）相對(duì)于多西他賽處理PC3-TXR腫瘤的化學(xué)增敏 作用，使用圖17A中所述的PC3-TxR腫瘤模型，包括未經(jīng)處理的腫瘤、LGT-E處理的腫瘤和 LGT-E和多西他賽處理的腫瘤。
[0068] 發(fā)明詳述
[0069] 本文中描述了通過向有此需要的患者施用雷公藤的乙醇提取物和化學(xué)治療藥物 的組合來治療癌癥的方法和藥物制劑，其中雷公藤的乙醇提取物和化學(xué)治療藥物以有效治 療癌癥的組合量來施用。在多種實(shí)施方案中，本發(fā)明的方法治療至少部分地對(duì)單獨(dú)施用化 學(xué)治療藥物（即不存在雷公藤的乙醇提取物）時(shí)的化學(xué)治療藥物治療有抗性的癌癥。因此， 在多種實(shí)施方案中，本發(fā)明的方法通過使化學(xué)治療藥物抗性癌細(xì)胞與本文所述雷公藤乙醇 提取物的至少一種組分接觸來克服抗癌化學(xué)治療藥物抗性并且引起細(xì)胞對(duì)化學(xué)治療藥物 的抗性逆轉(zhuǎn)，從而使得化學(xué)治療藥物引起抗藥性癌細(xì)胞的死亡或細(xì)胞抑制（cytostasis)。 因此，本發(fā)明的治療方法用于抑制、延遲或阻止那些對(duì)化學(xué)治療劑有抗藥性的腫瘤細(xì)胞的 生長(zhǎng)。
[0070] 本發(fā)明的雷公藤提取物是從中國(guó)吉林省獲得的藥用植物雷公藤（Tripterygium wilfordii Hook f.)的根木質(zhì)部獲得的。如上所述，本發(fā)明的方法使用雷公藤的乙醇提取 物。在多種實(shí)施方案中，本發(fā)明的方法使用通過合并來自一系列95%的乙醇提取的所提取 材料而制備的雷公藤的乙醇提取物。在多種其他實(shí)施方案中，通過將所提取材料吸附到硅 膠中并使被吸附的材料經(jīng)受額外的乙醇提取來進(jìn)一步提取經(jīng)乙醇提取的雷公藤材料。通常 通過將提取物置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，從提取物中除去乙醇。干燥的材料可任選為凍干的。最 后，通過本方法使用的雷公藤之干燥的乙醇提取物稱為L(zhǎng)GT-E，并且其特征在于具有如圖2 中所述的液相色譜和質(zhì)譜色譜圖。
[0071] 可由本發(fā)明的方法治療的癌癥包括多種器官的實(shí)體腫瘤和血液學(xué)腫瘤兩者。實(shí) 體腫瘤的非限制性實(shí)例是轉(zhuǎn)移性乳腺癌和前列腺癌（包括雄激素依賴性和雄激素非依賴 性前