組合的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及治療哺乳動物癌癥的方法，且涉及可用于該治療的組合。特別是， 該方法涉及新的組合，其包含PI3K抑制劑：2-甲基-1-{[2-甲基-3-(三氟甲基）苯 基]甲基}-6-(4-嗎啉基）-IH-苯并咪唑-4-羧酸或其藥物可接受的鹽，和MEK抑制劑： N- {3- [3-環(huán)丙基-5- (2-氟-4-碘-苯基氨基）-6, 8-二甲基-2, 4, 7-三氧代-3, 4, 6, 7-四 氫-2H-吡啶并[4, 3-d]嘧啶-1-基]苯基}乙酰胺或其藥物可接受的鹽或溶劑化物，涉及 包含該組合的藥物組合物，且涉及使用該組合治療癌癥的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 通常，癌癥由控制細(xì)胞分裂、分化和細(xì)胞凋亡的正常過程中的失調(diào)而產(chǎn)生。凋亡 (程序性細(xì)胞死亡）在胚胎發(fā)育和各種疾病的發(fā)病機(jī)制中起重要作用，所述疾病如變性神 經(jīng)元疾?。╠egenerative neuronal diseases)、心血管疾病和癌癥。一種最常見的涉及激 酶調(diào)節(jié)凋亡的研宄途徑是從細(xì)胞表面生長因子受體向細(xì)胞核的細(xì)胞信號傳導(dǎo)（Crews and Erikson, Cell, 74:215-17, 1993)〇
[0003] 磷酸肌醇3-激酶（PI3K)途徑是人癌癥中最?；罨闹磺以谥掳┳饔弥械闹?要性是良好建立的。（Samuels Y和Ericson K. Oncogenic PI3K and its role in cancer. Current Opinion in Oncology，2006; 18:77-82)〇
[0004] PI3K途徑和癌癥之間的聯(lián)系得到了研宄的證實，所述研宄鑒別出在編碼PllO a 蛋白的PIK3CA基因中的體細(xì)胞突變。隨后，已經(jīng)在眾多癌癥中鑒別出PIK3CA中的突變， 所述癌癥包括結(jié)腸直腸癌、乳腺癌、膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、卵巢癌和肺癌。與PIK3CA不同，尚未在 0亞型中鑒別出體細(xì)胞突變。但是，在過表達(dá)研宄中，已經(jīng)暗示PI3K0亞型是PTEN腫瘤 抑制物的喪失或滅活在體外和在體內(nèi)誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)化所必需的（Torbett NE, Luna A, Knight ZA,等人，A chemical screen in diverse breast cancer cell lines reveals genetic enhancers and suppressors of sensitivity to PI3K isotype-selective inhibition. Biochem J2008 ；415:97-110 ；Zhao JJjLiu ZjWang LjShin EjLoda MFjRoberts TMjThe oncogenic properties of mutant pllOa and pllOb phosphatidyl inositol 3-kinases in human mammary epithelial cells.Proc Natl Acad Sci USA2005 ; 102:18443-8)〇 與 該發(fā)現(xiàn)相一致，已經(jīng)在一些膀胱癌、結(jié)腸癌、膠質(zhì)母細(xì)胞瘤和白血病中鑒別出PIK3CB基 因的過表達(dá)，并且siRNA介導(dǎo)的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系中的pll〇0的敲低（knockdown) 會導(dǎo)致腫瘤體外和體內(nèi)生長的抑制（Pu P，Kang C，Zhang Z，等人，Downregulation of PIK3CB by siRNA suppresses malignant glioma cell growth in vitro and in vivo. Technolo Cancer Res Treat 2006;5:271-280)。使用 shRNA 的更新的數(shù)據(jù)證實，減量 調(diào)節(jié)pllOe且不減量調(diào)節(jié)pllOa，會導(dǎo)致PI3K途徑滅活，并隨后在體外和在體內(nèi)滅活 缺乏 PTEN 的癌細(xì)胞中的腫瘤細(xì)胞生長（Wee S，Wiederschain，Maira S_M，Loo A，Miller C，等人，PTEN-deficient cancers depend on PIK3CB. Proc Natl Acad Sci 2008; 105:13057-13062)。與PIK3CB信號傳遞在沒有PTEN的腫瘤中的作用相一致，據(jù)報道， PllO 0是在沒有PTEN的前列腺癌模型中的轉(zhuǎn)化表型所必需的（Jia S，Liu Z，Zhang S，Liu P, Zhang L,等人，Essential roles of PI (3)K-pll0b in cell growth, metabolism and tumorgenesis.Nature2008;10:1038)。總之，這些發(fā)現(xiàn)表明PI3K pll〇0是癌癥治療中有 希望的祀點(diǎn)。
[0005] 促細(xì)胞分裂劑-活化的蛋白質(zhì)（MAP)激酶/細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶（ERK)激酶 (下文稱為MEK)已知與大量細(xì)胞過程的調(diào)節(jié)相關(guān)。Raf家族（B-Raf，C-Raf等人）激 活MEK家族（MEK-1，MEK-2等）且MEK家族激活ERK家族（ERK-1和ERK-2)。廣泛來 說，RAF/MEK/ERK途徑的信號傳導(dǎo)活化控制mRNA轉(zhuǎn)移。這包括與細(xì)胞周期相關(guān)的基因。 因此，該途徑的過度活化會引起不受控制的細(xì)胞增殖。由于ERK過度活化造成的RAF/ MEK/ERK途徑的反常在約30 %的所有人惡性腫瘤中被發(fā)現(xiàn)（Allen，LF，et al. Semin. Oncol. 2003. 30 (5Suppl 16) : 105-16)?？梢越?jīng)由 PI3K/AKT 和 RAF/MEK/ERK 傳導(dǎo)信號的 RAS 在15%的所有癌癥中具有突變的致癌蛋白（Davies, H.et al. Nature. 2002. 417:949-54)。 同樣地，活化性BRAF突變已經(jīng)在特定的腫瘤類型（例如黑素瘤）被高頻率鑒定出來 (Davies, H. et al. Nature. 2002. 417:949-54)。盡管在人癌癥中不經(jīng)常出現(xiàn)MEK本身的活化 性突變，但是MEK由于其在ERK途徑中的重要作用而被認(rèn)為是治療人癌癥的重要藥物靶標(biāo)。 此外，MEK抑制活性有效地誘導(dǎo)了 ERK1/2活性的抑制和細(xì)胞增殖的抑制（The Journal of Biological Chemistry, vol. 276, No. 4, pp. 2686-2692, 2001)，期望該化合物顯示出對由不 期望的細(xì)胞增殖引起的疾病如腫瘤發(fā)生和/或癌癥的作用。
[0006] 有用的是提供一種改善的療法，該療法向經(jīng)受癌癥作用的個體提供更有效的和/ 或增強(qiáng)的治療。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明一個實施方案提供一種組合，其包含：
[0008] ⑴結(jié)構(gòu)⑴的化合物：
[0010] 或其藥物可接受的鹽；和
[0011] (ii)結(jié)構(gòu)（II)的化合物：
[0013] 或其藥物可接受的鹽或溶劑化物。
[0014] 本發(fā)明一個實施方案提供在需要的人中治療癌癥的方法，其包括向該人體應(yīng)給藥 治療有效量的組合，該組合為2-甲基-1-{[2-甲基-3-(三氟甲基）苯基]甲基}-6-(4-嗎 啉基）-lH_苯并咪唑-4-羧酸，或其藥物可接受的鹽，適當(dāng)?shù)貫槠?-氨基-2-(羥基 甲基）-1，3_丙二醇鹽，和N-{3-[3-環(huán)丙基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨基）-6,8_二甲 基-2, 4, 7-三氧代-3, 4, 6, 7-四氫-2H-吡啶并[4, 3-d]嘧啶-1-基]苯基}乙酰胺，或其 藥物可接受的鹽或溶劑化物，適當(dāng)?shù)貫槠涠谆鶃嗧咳軇┗锏慕M合。
[0015] 本發(fā)明一個實施方案提供在需要的人中治療癌癥的方法，其包括向該人體應(yīng)給藥 治療有效量的組合，該組合為2-甲基-1-{[2-甲基-3-(三氟甲基）苯基]甲基}-6-(4-嗎 啉基）-lH-苯并咪唑-4-羧酸，或其藥物可接受的鹽，適當(dāng)?shù)貫槠?-氨基-2-(羥基 甲基）-1，3_丙二醇鹽，和N-{3-[3-環(huán)丙基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨基）-6,8_二甲 基-2, 4, 7-三氧代-3, 4, 6, 7-四氫-2H-吡啶并[4, 3-d]嘧啶-1-基]苯基}乙酰胺，或其 藥物可接受的鹽或溶劑化物，適當(dāng)?shù)貫槠涠谆鶃嗧咳軇┗锏慕M合，其中該組合在規(guī)定 的期間內(nèi)給藥，且其中該組合在一段持續(xù)的時間內(nèi)給藥。
[0016] 本發(fā)明一個實施方案提供在需要的人中治療癌癥的方法，其包括向該人體應(yīng)給藥 治療有效量的組合，該組合為2-甲基-1-{[2-甲基-3-(三氟甲基）苯基]甲基}-6-(4-嗎 啉基）-lH-苯并咪唑-4-羧酸，或其藥物可接受的鹽，適當(dāng)?shù)貫槠?-氨基-2-(羥基 甲基）-1，3_丙二醇鹽，和N-{3-[3-環(huán)丙基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨基）-6,8_二甲 基-2, 4, 7-三氧代-3, 4, 6, 7-四氫-2H-吡啶并[4, 3-d]嘧啶-1-基]苯基}乙酰胺，或其 藥物可接受的鹽或溶劑化物，適當(dāng)?shù)貫槠涠谆鶃嗧咳軇┗锏慕M合，其中所述組合的化 合物相繼給藥。
[0017] 發(fā)明詳沐
[0018] 本發(fā)明涉及具有抗增殖活性的組合。適當(dāng)?shù)?，所述方法涉及治療癌癥的方法，其通 過共同給藥：
[0019] 2-甲基-1-{ [2-甲基-3-(三氟甲基）苯基]甲基}-6-(4-嗎啉基）-IH-苯并咪 唑-4-羧酸，或其藥物可接受的鹽，適當(dāng)?shù)貫槠?-氨基-2-(羥基甲基）-1，3-丙二醇鹽， (以下稱為化合物A，或其藥物可接受的鹽，適當(dāng)?shù)貫槠?-氨基-2-(羥基甲基）-1，3-丙二 醇鹽），該化合物由結(jié)構(gòu)I表示：
[0021] 和N-{3-[3_環(huán)丙基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨基）-6, 8-二甲基-2, 4, 7-三氧 代-3, 4, 6, 7-四氫-2H-吡啶并[4, 3-d]嘧啶-1-基]苯基}乙酰胺，或其藥物可接受的鹽 或溶劑化物，適當(dāng)?shù)貫槠涠谆鶃嗧咳軇┗?，（以下稱為化合物B或其藥物可接受的鹽或 溶劑化物，適當(dāng)?shù)貫槠涠谆鶃嗧咳軇┗铮?br>[0022] 該化合物由結(jié)構(gòu)II表示：
[0024] 化合物A可按照國際申請?zhí)枮镻CT/US2011/052857的專利申請中描述的實施例31 所制備。
[0025] 適當(dāng)?shù)?，化合物A為2-氨基-2-(羥基甲基）-1,3-丙二醇鹽的形式?；衔顰的 2_氨基-2-(羥基甲基）-1，3-丙二醇鹽可按照國際申請?zhí)枮镻CT/US2011/052857的專利申 請中描述的實施例86所制備。
[0026] 化合物B以及其藥物可接受的鹽和溶劑化物，可用作MEK活性的抑制劑，特別是治 療癌癥，其在如下中公開并要求保護(hù)：國際申請?zhí)朠CT/JP2005/011082，該申請的國際申請 日為2005年6月10日；國際公開號為WO 2005/121142且國際公開日為2005年12月22 日，其整個公開在此引入作為參考，化合物B為實施例4-1的化合物。化合物B可按照國際 申請?zhí)朠CT/JP2005/011082所述的制備。化合物B可按照美國專利公開號US 2006/0014768 制備，2006年1月19日公開，其整個公開在此引入作為參考。
[0027] 適當(dāng)?shù)兀衔顱為二甲基亞砜溶劑化物的形式。適當(dāng)?shù)兀衔顱為鈉鹽的形 式。適當(dāng)?shù)?，化合物B為溶劑化物的形式，該溶劑化物選自：水合物、乙酸、乙醇、硝基甲烷、 氯苯、1-戊醇、異丙醇、乙二醇和3-甲基-1-丁醇的溶劑化物。這些溶劑化物和鹽形式可通 過本領(lǐng)域技術(shù)人員由國際申請?zhí)朠CT/JP2005/011082或美國專利公開號US 2006/0014768 的描述制備。
[0028] 給藥治療有效量的本發(fā)明的組合相比單獨(dú)組分化合物是有利的，因為當(dāng)相比于單 獨(dú)給藥治療有效量的組分化合物時，該組合提供以下一種或多種改善的性質(zhì)：i)與活性最 大的單個藥物（agent)相比有更高的抗癌作用，ii)協(xié)同的或高度協(xié)同的抗癌活性，iii)提 供增強(qiáng)的抗癌活性和減少的副作用分布的給藥方案，iv)毒性作用分布減少，V)治療窗口 增加，或者vi)組分化合物中的一個或兩者的生物利用度增加。
[0029] 本發(fā)明的各化合物可以含有一個或多個手性原子，或者可以以兩個對映異構(gòu)體存 在。因此，本發(fā)明的化合物包括對映異構(gòu)體的混合物以及純化的對映異構(gòu)體或?qū)τ钞悩?gòu)體 富集的混合物。還應(yīng)當(dāng)理解所有的互變異構(gòu)體和互變異構(gòu)體的混合物均包括在化合物A和 其可藥用鹽以及化合物B和其可藥用鹽或溶劑化物的范圍內(nèi)。
[0030] 本發(fā)明的化合物可以形成溶劑化物，其可以理解為由溶質(zhì)（在本發(fā)明中，化合物A 或其鹽和/或化合物B或其鹽）和溶劑形成的各種化學(xué)計量的復(fù)合物。用于本發(fā)明目的的 這些溶劑不可以干擾溶質(zhì)的生物學(xué)活性。合適溶劑的實例包括但不限于：水、甲醇、二甲基 亞砜、乙醇和乙酸。適當(dāng)?shù)?，所使用的溶劑為可藥用的溶劑。適當(dāng)?shù)?，所用的溶劑為水或?甲基亞砜。
[0031] 本領(lǐng)域技術(shù)人員可以容易地制備本發(fā)明化合物的可藥用鹽。
[0032] 本發(fā)明還包括使用本發(fā)明的組合治療癌癥的方法，其中給藥以前藥形式的化合物 A或其可藥用鹽和/或化合物B或其可藥用鹽或溶劑化物。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以容易地制 備本發(fā)明化合物的可藥用前藥。
[0033] 當(dāng)涉及給藥方案（給藥方案）時，術(shù)語"天"、"每天"等是指日歷上一天內(nèi)的時間， 其從子夜開始，結(jié)束于下一個子夜。
[0034]如本文所使用的，術(shù)語"治療"及其相關(guān)表述表示治療性治療。當(dāng)涉及具體的病 癥時，治療表示：（1)改善或預(yù)防該病癥的一個或多個生物學(xué)表現(xiàn)的狀況，（2)干擾（a)引 起或響應(yīng)于該病癥的生物學(xué)級聯(lián)中的一個或多個點(diǎn)，或（b)該病癥的一個或多個生物學(xué)表 現(xiàn)，（3)減輕與該病癥或其治療相關(guān)的一個或多個癥狀、作用或副作用，或者（4)減緩該病 癥的進(jìn)展，或者減緩該病癥的一個或多個生物學(xué)表現(xiàn)。由此，也包括了預(yù)防性治療。本領(lǐng)域 技術(shù)人員將會理解"預(yù)防"不是絕對的術(shù)語。在醫(yī)學(xué)中，將"預(yù)防"理解為預(yù)防性給藥以基 本上減少病癥或其生物學(xué)表現(xiàn)的可能性或嚴(yán)重性，或者以延緩這種病癥或其生物學(xué)表現(xiàn)的 開始。例如，當(dāng)受試者被認(rèn)為處于患癌癥的高風(fēng)險時，例如當(dāng)受試者具有強(qiáng)大的癌癥家族史 時或者當(dāng)受試者已經(jīng)暴露于致癌物質(zhì)時，預(yù)防性治療是合適的。
[0035]如本文所使用的，術(shù)語"有效量"表示產(chǎn)生例如研宄者或臨床醫(yī)師所尋求的組織、 系統(tǒng)、動物或人的生物學(xué)或藥學(xué)響應(yīng)的藥物或藥用制劑的量。此外，術(shù)語"治療有效量"表 示，與沒有接受該量的相應(yīng)受試者相比，引起疾病、病癥或副作用的改進(jìn)治療、治愈、預(yù)防或 減輕的量，或者引起疾病或病癥的進(jìn)展的速率降低的量。該術(shù)語還包括在其范圍內(nèi)有效地 增強(qiáng)正常生理功能的量。
[0036] 除非另有所述，如本文所使用的術(shù)語"組合"及其相關(guān)表述表示同時給藥或者以任 何分開的順序給藥治療有效量的化合物A或其可藥用鹽和化合物B或其可藥用鹽。優(yōu)選地， 如果給藥不是同時的，那么所述化合物以彼此緊密相鄰的時間給藥。此外，化合物是否以相 同的劑型給藥是無關(guān)緊要的，例如一個化合物可以局部給藥，另一個化合物可以口服給藥。 適當(dāng)?shù)?，化合物A通過靜脈內(nèi)給藥且化合物B 口服給藥。
[0037] 如本文所使用的，術(shù)語"組合試劑盒"，表示用于給藥根據(jù)本發(fā)明的化合物A或其 可藥用鹽和化合物B或其可藥用鹽的一種或多種藥物組合物。當(dāng)該兩種化合物同時給藥 時，所述組合試劑盒可以含有在單個藥物組合物如片劑或在分開的藥物組合物中的化合物 A或其可藥用鹽和化合物B或其可藥用鹽或溶劑化物。當(dāng)不同時給藥所述化合物時，所述 組合試劑盒將含有在分開的藥物組合物中的化合物A或其可藥用鹽和化合物B或其可藥用 鹽或溶劑化物。該組合試劑盒可以包括在在單個包裝中的分開的藥物組合物中，或在分開 包裝中的分開的藥物組合物中的化合物A或其可藥用鹽和化合物B或其可藥用鹽或溶劑化 物。
[0038] 在一個方面中提供了包含下列成分的組合試劑盒：
[0039] 化合物A，或其藥物可接受的鹽，以及藥物可接受的載體；和
[0040] 化合物B，或其藥物可接受的鹽或溶劑化物，以及藥物可接受的載體。
[0041] 在本發(fā)明一個實施方案中該組合試劑盒包含以下成分：
[0042] 化合物A，或其藥物可接受的鹽，以及藥物可接受的載體；和
[0043] 化合物B，或其藥物可接受的鹽或溶劑化物，以及藥物可接受的載體，
[0044] 其中各成分以適于順序、分開和/或同時給藥的形式提供。
[0045] 在一個實施方案中，該組合試劑盒包含：
[0046] 第一容器，其包含化合物A或其可藥用鹽以及可藥用載體；和
[0047] 第二容器，其包含化合物B或其可藥用鹽以及可藥用載體；和用于容納所述第一 容器和第二容器的容器裝置。
[0048] 所述"組合試劑盒"還可以提供說明書，如劑量和給藥說明書。這些劑量和給藥說 明書可以為向醫(yī)師提供的類型，例如藥物產(chǎn)品標(biāo)簽，或者它們可以為由醫(yī)師提供的類型，如 向患者提供的說明書。
[0049] 如本文所述，術(shù)語"化合物