酸序列。本領(lǐng)域還理解，"突變體"包括相比于分別發(fā)現(xiàn)于野生型多肽或多核苷酸中的對(duì) 應(yīng)的氨基酸或核酸具有至少一個(gè)氨基酸或核酸的修飾的多肽或多核苷酸序列。術(shù)語突變體 包括單核苷酸多態(tài)性（SNP)，其中相比于最廣泛的（野生型）核酸鏈，單一的堿基對(duì)區(qū)別存 在于核酸鏈序列中。
[0212] 作為 BRAF、KRAS、NRAS、HRAS、SOSl、NFl、EGFR、ErbB2、c-Kit 或 PDGFR 的野生型或 突變體的癌癥，或具有 BRAF、KRAS、NRAS、HRAS、NF1、EGFR、ErbB2、c-Kit 或 PDGFR 的擴(kuò)增或 過表達(dá)的癌癥，被已知方法所識(shí)別。
[0213] 例如，野生型或突變體BRAF、KRAS、NRAS、HRAS、S0Sl、NFl、EGFR、ErbB2、c-Kit或 TOGFR，腫瘤細(xì)胞可通過DNA擴(kuò)增和測(cè)序技術(shù)、DNA和RNA檢測(cè)技術(shù)而識(shí)別，所述技術(shù)包括但 不限于RNA印跡和DNA印跡，和/或多種生物芯片和陣列技術(shù)或原位雜交。野生型和突變 體多肽可通過多種技術(shù)檢測(cè)，包括但不限于免疫診斷技術(shù)如ELISA、蛋白質(zhì)印跡或免疫細(xì)胞 化學(xué)。
[0214] 本發(fā)明提供一種組合，其包含2-甲基甲基-3-(三氟甲基）苯基]甲 基} -6-(4-嗎啉基）-IH-苯并咪唑-4-羧酸，或其藥物可接受的鹽，適當(dāng)?shù)貫槠?-氨 基-2-(羥基甲基）_1，3-丙二醇鹽，和N-{3-[3-環(huán)丙基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨 基）-6,8_二甲基-2,4,7-三氧代-3,4,6,7-四氫-2H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-1-基]苯 基}乙酰胺，或其藥物可接受的鹽或溶劑化物，適當(dāng)?shù)貫槠涠谆鶃嗧咳軇┗铩?br>[0215] 本發(fā)明還提供一種組合，其包含2-甲基甲基-3-(三氟甲基）苯基] 甲基}-6-(4-嗎啉基）-IH-苯并咪唑-4-羧酸，或其藥物可接受的鹽，適當(dāng)?shù)貫槠?-氨 基-2-(羥基甲基）_1，3-丙二醇鹽，和N-{3-[3-環(huán)丙基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨 基）-6,8_二甲基-2,4,7-三氧代-3,4,6,7-四氫-2H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-1-基]苯 基}乙酰胺，或其藥物可接受的鹽或溶劑化物，適當(dāng)?shù)貫槠涠谆鶃嗧咳軇┗铮溆糜谥?療。
[0216] 本發(fā)明還提供一種組合，其包含2-甲基甲基-3-(三氟甲基）苯基] 甲基}-6-(4-嗎啉基）-IH-苯并咪唑-4-羧酸，或其藥物可接受的鹽，適當(dāng)?shù)貫槠?-氨 基-2-(羥基甲基）_1，3-丙二醇鹽，和N-{3-[3-環(huán)丙基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨 基）-6,8-二甲基-2,4,7-三氧代-3,4,6,7-四氫-2H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-1-基]苯 基}乙酰胺，或其藥物可接受的鹽或溶劑化物，適當(dāng)?shù)貫槠涠谆鶃嗧咳軇┗铮溆糜谥?療癌癥。
[0217] 本發(fā)明還提供一種藥物組合物，其包含以下組合，該組合為2-甲基-1-{[2_甲 基-3-(三氟甲基）苯基]甲基}-6-(4_嗎啉基）-lH-苯并咪唑-4-羧酸，或其藥物 可接受的鹽，適當(dāng)?shù)貫槠?-氨基-2-(羥基甲基）-1，3_丙二醇鹽，和N-{3-[3-環(huán)丙 基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨基）-6, 8-二甲基-2, 4, 7-三氧代-3, 4, 6, 7-四氫-2H-吡啶 并[4, 3-d]嘧啶-1-基]苯基}乙酰胺，或其藥物可接受的鹽或溶劑化物，適當(dāng)?shù)貫槠涠?基亞砜溶劑化物的組合。
[0218] 本發(fā)明還提供組合試劑盒，其包含2-甲基甲基-3-(三氟甲基）苯 基]甲基}-6_(4_嗎啉基）-lH-苯并咪唑-4-羧酸，或其藥物可接受的鹽，適當(dāng)?shù)貫槠?2_氨基-2-(羥基甲基）-1，3-丙二醇鹽，和N-{3-[3-環(huán)丙基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨 基）-6,8_二甲基-2,4,7-三氧代-3,4,6,7-四氫-2H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-1-基]苯 基}乙酰胺，或其藥物可接受的鹽或溶劑化物，適當(dāng)?shù)貫槠涠谆鶃嗧咳軇┗铩?br>[0219] 本發(fā)明還提供組合在制備藥物中的用途，該組合包含2-甲基甲 基-3-(三氟甲基）苯基]甲基}-6-(4_嗎啉基）-lH-苯并咪唑-4-羧酸，或其藥物 可接受的鹽，適當(dāng)?shù)貫槠?-氨基-2-(羥基甲基）-1，3_丙二醇鹽，和N-{3-[3-環(huán)丙 基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨基）-6, 8-二甲基-2, 4, 7-三氧代-3, 4, 6, 7-四氫-2H-吡啶 并[4, 3-d]嘧啶-1-基]苯基}乙酰胺，或其藥物可接受的鹽或溶劑化物，適當(dāng)?shù)貫槠涠?基亞砜溶劑化物。
[0220] 本發(fā)明還提供組合在制備治療癌癥的藥物中的用途，該組合包含2-甲 基-1-{ [2-甲基-3-(三氟甲基）苯基]甲基}-6-(4-嗎啉基）-IH-苯并咪唑-4-羧酸，或 其藥物可接受的鹽，適當(dāng)?shù)貫槠?-氨基-2-(羥基甲基）-1，3-丙二醇鹽，和N- {3-[3-環(huán)丙 基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨基）-6, 8-二甲基-2, 4, 7-三氧代-3, 4, 6, 7-四氫-2H-吡啶 并[4, 3-d]嘧啶-1-基]苯基}乙酰胺，或其藥物可接受的鹽或溶劑化物，適當(dāng)?shù)貫槠涠?基亞砜溶劑化物。
[0221] 本發(fā)明還提供治療癌癥的方法，其包括向需要的受試者給藥一種組合，該組合為 2-甲基-1- {[2-甲基-3-(三氟甲基）苯基]甲基} -6- (4-嗎啉基）-IH-苯并咪唑-4-羧酸， 或其藥物可接受的鹽，適當(dāng)?shù)貫槠?-氨基-2-(羥基甲基）-1，3-丙二醇鹽，和N- {3-[3-環(huán) 丙基-5- (2-氟-4-碘-苯基氨基）-6, 8-二甲基-2, 4, 7-三氧代-3, 4, 6, 7-四氫-2H-吡 啶并[4, 3-d]嘧啶-1-基]苯基}乙酰胺，或其藥物可接受的鹽或溶劑化物，適當(dāng)?shù)貫槠涠?甲基亞砜溶劑化物的組合。
[0222] 如所說明的，將治療有效量的本發(fā)明組合（化合物A2與化合物B2組合）給藥于 人。典型地，給藥的本發(fā)明藥物的治療有效量將取決于許多因素，包括，例如，受試者的年齡 和重量、需要治療的確切病癥、該病癥的嚴(yán)重程度、制劑的性質(zhì)和給藥途徑。最后，治療有效 量依據(jù)主治醫(yī)師的決定。
[0223] 根據(jù)已知的方法測(cè)試本發(fā)明的組合的功效、有利和協(xié)同性質(zhì)。適當(dāng)?shù)?，一般根?jù)以 下的聯(lián)合細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)測(cè)試本發(fā)明的組合的功效、優(yōu)勢(shì)和協(xié)同性質(zhì)。在384-孔板中在適于 各細(xì)胞類型、且補(bǔ)充了 10 % FBS和1 %青霉素/鏈霉素的培養(yǎng)基中以500個(gè)細(xì)胞/孔將細(xì)胞 鋪板，并在37°C、5%C02-育過夜。在384孔板上從左往右使用化合物A 2的各稀釋液（20 個(gè)稀釋液，包括無化合物、從l_20mM化合物開始以2-倍稀釋的稀釋液）以格柵方式處理細(xì) 胞，并在384孔板上從上向下用化合物B 2 (20個(gè)稀釋液，包括無化合物、從l-20mM化合物開 始以2-倍稀釋的稀釋液）處理，并如上再孵育72小時(shí)。在一些情況中，以交錯(cuò)方式添加化 合物，并且可以將孵育時(shí)間延長(zhǎng)到最高達(dá)7天。使用CellTiter-Glo?試劑根據(jù)制造商的實(shí) 驗(yàn)規(guī)范測(cè)量細(xì)胞生長(zhǎng)，在PerkinElmer EnVision?讀數(shù)器上讀取信號(hào)（設(shè)為發(fā)光模式，0.5 秒一個(gè)讀數(shù)）。如下所述對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。
[0224] 結(jié)果表達(dá)為t = 0時(shí)的值的百分比，并且針對(duì)化合物濃度作圖。t = 0時(shí)的值歸 一化為100 %，并且表示添加化合物時(shí)刻存在的細(xì)胞數(shù)。各個(gè)化合物和/或化合物組合的 細(xì)胞響應(yīng)如下確定：使用用于Microsoft Excel軟件的IDBSXLfit plug-in對(duì)細(xì)胞存活 力-濃度進(jìn)行4-或6-參數(shù)曲線擬合，并確定50%抑制細(xì)胞生長(zhǎng)所需要的濃度（gIC5(l)。背 景校正通過減去不含細(xì)胞的孔中的值來進(jìn)行。對(duì)于各藥物組合，組合指數(shù)（Combination Index, Cl)、超過最高單藥物的量（Excess Over Highest Single Agent，E0HSA)和超過 Bliss 的量（Excess Over Bliss，EOBliss)根據(jù)例如記載于 Chou and Talalay(1984) Advances in Enzyme Regulation, 22, 37 至 55 ;和 Berenbaum, MC (1981)Adv. Cancer Research, 35, 269-335中的已知方法計(jì)算。
[0225] 本發(fā)明的組合在以上測(cè)試中檢測(cè)以確定在治療癌癥中的有利治療效用。
[0226] 以下實(shí)施例僅用于解釋而不用于以任何方式限制本發(fā)明的范圍。
[0227] 實(shí)駘細(xì)節(jié)
[0228] 實(shí)施例1-膠囊組合物
[0229] 按照下面表1中所示比例，用各成分填充標(biāo)準(zhǔn)雙部分硬明膠膠囊，制備用于給藥 本發(fā)明組合的口服劑型。
[0230]表1
[0231]
[0232] 實(shí)施例2-膠囊組合物
[0233] 按照下面表1I中所示比例，用各成分填充標(biāo)準(zhǔn)雙部分硬明膠膠囊，制備用于給藥 本發(fā)明化合物之一的口服劑型。
[0234]表1I
[0235]
[0236] 實(shí)施例3-膠囊組合物
[0237] 按照下面表1II中所示比例，用各成分填充標(biāo)準(zhǔn)雙部分硬明膠膠囊，制備用于給 藥本發(fā)明化合物之一的口服劑型。
[0238]表1II
[0239]
[0240] 實(shí)施例4_片劑組合物
[0241] 用10%的明膠溶液，將下面表1V所示的蔗糖、微晶纖維素和本發(fā)明組合中的化合 物按所示的比例混合和造粒。將濕的顆粒篩分，干燥，并與淀粉、滑石和硬脂酸混合；然后篩 分并壓制成片劑。
[0242]表1V
[0243]
[0245] 實(shí)施例5-片劑組合物
[0246] 用10%的明膠溶液，將下面表V所示的蔗糖、微晶纖維素和本發(fā)明組合中的一種 化合物按所示的比例混合和造粒。將濕的顆粒篩分，干燥，并與淀粉、滑石和硬脂酸混合；然 后篩分并壓制成片劑。
[0247]表 V
[0248]
[0249] 實(shí)施例6-片劑組合物
[0250] 用10%的明膠溶液，將下面表VI所示的蔗糖、微晶纖維素和本發(fā)明組合中的一種 化合物按所示的比例混合和造粒。將濕的顆粒篩分，干燥，并與淀粉、滑石和硬脂酸混合；然 后篩分并壓制成片劑。
[0251]表 VI
[0252]
[0253] 盡管上面已經(jīng)示例說明了本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案，但是應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明并不限 于本文中所公開的明確說明，而且保留對(duì)在權(quán)利要求書范圍內(nèi)的所有修改的權(quán)利。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種組合，包含： (i) 結(jié)構(gòu)⑴的化合物：或其藥物可接受的鹽；和 (ii) 結(jié)構(gòu)（Π )的化合物：或其藥物可接受的鹽或溶劑化物。2. 根據(jù)權(quán)利要求1的組合，其中結(jié)構(gòu)（I)的化合物為2-氨基-2-(羥基甲基）-1，3-丙 二醇鹽的形式且結(jié)構(gòu)（II)的化合物為二甲基亞砜溶劑化物的形式。3. 試劑盒，其包含根據(jù)權(quán)利要求1或2的組合以及一種或多種藥物可接受的載體。4. 根據(jù)權(quán)利要求1至3任一項(xiàng)的組合，其中結(jié)構(gòu)（I)的化合物的量選自：約5mg、25mg 和lOOmg，且該量每天給藥一次，且結(jié)構(gòu)（II)的化合物的量為選自以下的量：約0. 5mg、Img 和2mg，且該量每天給藥一次。5. 根據(jù)權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)的組合在制備用于治療癌癥的一種或多種藥物中的用 途。6. 在需要的人中治療癌癥的方法，其包括向該人體內(nèi)給藥治療有效量的2-甲 基-1-{ [2-甲基-3-(三氟甲基）苯基]甲基}-6-(4-嗎啉基）-IH-苯并咪唑-4-羧酸的 2_氨基-2-(羥基甲基）-1，3-丙二醇鹽，和N-{3-[3-環(huán)丙基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨 基）-6,8_二甲基-2,4,7-三氧代-3,4,6,7-四氫-2H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-1-基]苯 基}乙酰胺，或其藥物可接受的鹽或溶劑化物，其中該組合在規(guī)定的期間內(nèi)給藥，且其中該 組合在一段持續(xù)的時(shí)間內(nèi)給藥。7. 根據(jù)權(quán)利要求6的在需要的人中治療癌癥的方法，其中規(guī)定的期間為24小時(shí)內(nèi)。8. 在需要的人中治療癌癥或減輕癌癥的嚴(yán)重性的方法，其包括體內(nèi)給藥2-甲 基甲基-3-(三氟甲基）苯基]甲基}-6-(4_嗎啉基）-1Η-苯并咪唑-4-羧酸 的2-氨基-2-(羥基甲基）-1，3-丙二醇鹽和N- {3- [3-環(huán)丙基-5- (2-氟-4-碘-苯基氨 基）-6,8_二甲基-2,4,7-三氧代-3,4,6,7-四氫-2H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-1-基]苯 基}乙酰胺二甲基亞砜；其中2-甲基-1-{[2-甲基-3-(三氟甲基）苯基]甲基}-6-(4_嗎 啉基）-IH-苯并咪唑-4-羧酸的2-氨基-2-(羥基甲基）-1，3-丙二醇鹽每天給藥一次， 每次給藥的量選自約5mg、25mg和lOOmg，且N-{3_[3-環(huán)丙基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨 基）-6,8_二甲基-2,4,7-三氧代-3,4,6,7-四氫-2H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-1-基]苯 基}乙酰胺二甲基亞砜每天給藥一次，每次給藥的量選自約0. 5mg、約Img和約2mg，適當(dāng)?shù)?約2mg，以上的量基于未溶劑化的化合物的重量。9. 根據(jù)權(quán)利要求8的方法，其中所述癌癥選自：乳腺癌、炎性乳腺癌、導(dǎo)管癌、小葉癌、 結(jié)腸癌、胰腺癌、胰島素瘤、腺癌、導(dǎo)管腺癌、腺鱗癌、腺泡細(xì)胞癌、胰高血糖素瘤、黑素瘤、轉(zhuǎn) 移性黑素瘤、肺癌、小細(xì)胞肺癌、非小細(xì)胞肺癌、鱗狀上皮細(xì)胞癌、腺癌、和大細(xì)胞癌、腦癌 (神經(jīng)膠質(zhì)瘤）、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、星形細(xì)胞瘤、多形性成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、Bannayan-Zonana綜合 征、考登病、Lhermitte-Duclos病、維爾姆斯腫瘤、尤因肉瘤、橫紋肌肉瘤、室管膜瘤、成神經(jīng) 管細(xì)胞瘤、頭與頸癌、腎癌、肝癌、黑素瘤、卵巢癌、胰腺癌、腺癌、導(dǎo)管腺癌、腺鱗癌、腺泡細(xì) 胞癌、胰高血糖素瘤、胰島素瘤、前列腺癌、肉瘤、骨肉瘤、骨的巨細(xì)胞腫瘤、甲狀腺癌、淋巴 細(xì)胞性T細(xì)胞白血病、慢性髓細(xì)胞性白血病、慢性淋巴細(xì)胞性白血病、毛細(xì)胞白血病、急性 成淋巴細(xì)胞性白血病、急性骨髓性白血病、慢性中性粒細(xì)胞性白血病、急性淋巴細(xì)胞性T細(xì) 胞白血病、漿細(xì)胞瘤、成免疫細(xì)胞性大細(xì)胞白血病、套細(xì)胞白血病、多發(fā)性骨髓瘤、巨核細(xì)胞 白血病、多發(fā)性骨髓瘤、急性巨核細(xì)胞白血病、前髓細(xì)胞性白血病、紅白血病、惡性淋巴瘤、 霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、淋巴細(xì)胞性T細(xì)胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、濾泡性淋巴瘤、 成神經(jīng)細(xì)胞瘤、膀胱癌、尿道上皮癌、外陰癌、子宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌、腎癌、間皮瘤、食管癌、 唾液腺癌、肝細(xì)胞癌、胃癌、鼻咽癌、頰癌、口腔癌、GIST (胃腸道間質(zhì)瘤）和睪丸癌。10. 根據(jù)權(quán)利要求8的方法，其中所述癌癥選自卵巢癌、乳腺癌、胰腺癌和前列腺癌。11. 在需要的人中治療癌癥或減輕癌癥的嚴(yán)重性的方法，所述癌癥為BRAF、KRAS、 NRAS、HRAS、S0S1、NF1、EGFR、ErbB2、c-Kit、H)GFR、或 ErbB-2 基因的野生型或突變體或 具有過表達(dá)的EGFR或ErbB2蛋白，所述方法包括向該人體內(nèi)給藥治療有效量的2-甲 基-1-{ [2-甲基-3-(三氟甲基）苯基]甲基}-6-(4-嗎啉基）-IH-苯并咪唑-4-羧酸或其 藥物可接受的鹽，和N-{3-[3-環(huán)丙基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨基）-6, 8-二甲基-2, 4, 7-三 氧代-3, 4, 6, 7-四氫-2H-吡啶并[4, 3-d]嘧啶-1-基]苯基}乙酰胺或其藥物可接受的 鹽或溶劑化物，其中該組合在規(guī)定的期間內(nèi)給藥，且其中該組合在一段持續(xù)的時(shí)間內(nèi)給藥。12. 根據(jù)權(quán)利要求11的方法，其中所述癌癥選自卵巢癌、乳腺癌、胰腺癌和前列腺癌。13. 根據(jù)權(quán)利要求11的方法，其中規(guī)定的期間為24小時(shí)內(nèi)。14. 根據(jù)權(quán)利要求6的在需要的人中治療癌癥的方法，其中規(guī)定的期間為24小時(shí)內(nèi)且 持續(xù)時(shí)間為7天。15. 根據(jù)權(quán)利要求6的在需要的人中治療癌癥的方法，其中規(guī)定的期間為24小時(shí)內(nèi)且 持續(xù)時(shí)間為14天。
【專利摘要】本發(fā)明涉及治療人的癌癥的方法，且涉及可用于該治療的藥物組合。特別是，該方法涉及癌癥治療方法，其包括向需要的人給藥2-甲基-1-{[2-甲基-3-(三氟甲基)苯基]甲基}-6-(4-嗎啉基)-1H-苯并咪唑-4-羧酸或其藥物可接受的鹽，和N-{3-[3-環(huán)丙基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨基)-6,8-二甲基-2,4,7-三氧代-3,4,6,7-四氫-2H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-1-基]苯基}乙酰胺，或其藥物可接受的鹽或溶劑化物。
【IPC分類】A61K31/5377, A61P35/00, A61K31/4375
【公開號(hào)】CN104902896
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201480004244
【發(fā)明人】K.E.巴克曼, J.D.格雷肖克, M.A.哈德威克
【申請(qǐng)人】葛蘭素史密斯克萊知識(shí)產(chǎn)權(quán)（第2 號(hào)）有限公司
【公開日】2015年9月9日
【申請(qǐng)日】2014年1月8日
【公告號(hào)】CA2897559A1, EP2943199A1, US20150342957, WO2014108837A1