。各組數(shù)據(jù)化父主 (均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差)表示，采用方差分析(AN0VA)，設(shè)定P<0.05時(shí)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
[0257] 六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0258] 1、造模后一般情況觀察
[0259] 動物術(shù)后3天內(nèi)切口均呈輕度腫脹，2~3天后，新西蘭兔左前肢即可正常站立行 走。至術(shù)后6~7天切口周圍腫脹基本消失，無明顯排斥反應(yīng)。術(shù)后7~10天拆除縫線，切口呈 1/甲愈合。實(shí)驗(yàn)過程中1只新西蘭兔切口發(fā)生嚴(yán)重感染、化脈，分泌物呈淡黃色，經(jīng)換藥、擴(kuò) 倉ij、引流及抗炎等處理后切口愈合。有2只新西蘭兔頭頸部、腹部出現(xiàn)斑片狀突起，局部皮膚 發(fā)紅，界限清楚，涂抹復(fù)方酬康挫乳膏后，癥狀消失。另有1只新西蘭兔出現(xiàn)嚴(yán)重腹腹瀉終死 亡。死亡的動物予排除并及時(shí)補(bǔ)充動物的數(shù)量。
[0260] 2、X線片表現(xiàn)
[0261] 術(shù)后4周、8周、12周拍攝四組新西蘭兔的左尺榜骨正位X線片，觀察骨折愈合的影 像學(xué)變化。X線片檢查結(jié)果肉眼所見:術(shù)后各個時(shí)間點(diǎn)，A組骨折線均較B組模糊，周圍骨挪陰 影A組大于B組，術(shù)后12周兩組的X線片中仍可見部分脫蛋白骨殘留。C、D兩組仍可見骨缺損 處空缺，兩斷端萎縮光滑。
[0262] 統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示（見表4) :C、D兩組術(shù)后各個時(shí)間點(diǎn)X線片評分均為0分。術(shù)后4周、8 周、12周，A組與B組X線評分相比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)dA、B兩組分別與C、D兩組比 較有明顯差異(P<〇.05)。表明造模后均予植入異種脫蛋白骨，灌服本發(fā)明口服液組在骨形 成、骨缺損連接及骨塑形方面均優(yōu)于沒有灌服本發(fā)明口服液組。
[0263] 表4 lane-San化u X線評分結(jié)果（X±s )
[0264]
[02化]*與B組比較，P<0.05
[0266] 3、生物力學(xué)測試
[0267] 軸向壓縮剛度是指標(biāo)本在軸向壓縮載荷作用下抵抗軸向變形的能力大小。本實(shí)驗(yàn) 指的是標(biāo)本軸向壓縮1mm時(shí)，需壓縮載荷的大小。根據(jù)X線片所見，C、D兩組術(shù)后各個時(shí)間點(diǎn) 左曉骨骨缺損處仍空缺，遠(yuǎn)近兩斷端未見纖維連接或骨性連接，故術(shù)后4、8、12周C、D兩組標(biāo) 本未進(jìn)行生物力學(xué)測試。術(shù)后4、8、12周對A、B兩組新西蘭兔左曉骨的標(biāo)本進(jìn)行抗軸向壓縮 和抗扭轉(zhuǎn)剛度實(shí)驗(yàn)。測試結(jié)果見表5和表6。
[0%引 3.1、抗軸向壓縮剛度試驗(yàn)：
[0269] ①組內(nèi)比較:A、B兩組數(shù)據(jù)進(jìn)行組內(nèi)比較，結(jié)果顯示有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的差異(P<0.05)。
[0270] ②組間比較:術(shù)后4、8、12周，A組與B組間比較存在明顯差異(P<0.05)。
[0271] W上分析可見:抗軸向壓縮剛度數(shù)值比較結(jié)果顯示:A組〉B組。在骨愈合過程中A組 標(biāo)本的抗軸向壓縮強(qiáng)度是逐漸增強(qiáng)的；而B組標(biāo)本的抗軸向壓縮強(qiáng)度在8周前是降低的，但8 周后則升高。
[0272] 表5抗軸向壓縮試驗(yàn)結(jié)果(Nm/du)(及)'
[0273]
[0274] * 與 B組比較，P<0.05
[02巧]3.2、抗扭轉(zhuǎn)剛度試驗(yàn)
[0276] ①組內(nèi)比較:A、B兩組數(shù)據(jù)進(jìn)行組內(nèi)比較，結(jié)果顯示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
[0277] ②組間比較:術(shù)后4、8、12周，A組與B組組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
[0278] W上分析可見:抗扭轉(zhuǎn)剛度數(shù)值比較結(jié)果顯示:A組〉B組。在骨愈合過程中A組標(biāo)本 的抗扭轉(zhuǎn)強(qiáng)度是逐漸增強(qiáng)的;而B組標(biāo)本的抗扭轉(zhuǎn)剛度在8周前是降低的，但8周后則升高。
[0279] 表6抗扭轉(zhuǎn)剛度試驗(yàn)結(jié)果(Nm/du)|； Xis )
[0280]
[0281] * 與 B組比較，P<0.05
[0282] 4、骨密度測試
[0283] 術(shù)后4、8、12周，測量A、B兩組新西蘭兔的植骨區(qū)域的骨密度，結(jié)果及變化趨勢如 下：
[0284] 4.1、組內(nèi)比較:A組術(shù)后4周、12周之間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，B組相鄰 時(shí)間點(diǎn)間比較無明顯差異(P〉0.0 5)。
[0285] 4.2、組間比較:A組與B組在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)兩兩比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。術(shù) 后C、D兩組骨缺損處空缺，故未進(jìn)行骨密度測量。
[0286] 結(jié)果顯示:B組術(shù)后4周、8周骨密度呈輕度降低趨勢，而術(shù)后12周骨密度則又重新 升高;A組術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)骨密度呈增尚趨勢，但是術(shù)后8周增幅小于術(shù)后12周，A組在術(shù)后4、 8、12周的骨密度值均高于B組。表明了植入異種脫蛋白骨后4周、8周內(nèi)會發(fā)生骨密度輕度下 降，而術(shù)后12周骨密度則又增高。在植骨后給予灌服本發(fā)明中藥制劑，在術(shù)后8周內(nèi)可W使 植入骨密度保持在一個比較穩(wěn)定的水平。
[0287] 5、組織學(xué)觀察
[0288] 術(shù)后4、8、12周，A、B兩組標(biāo)本的植骨區(qū)域給予脫巧、固定等相關(guān)處理后，行皿染色 及Masson染色觀察新骨形成及膠原纖維組織形成情況。
[0289] 1、皿染色術(shù)后4周，A組異種脫蛋白骨與自體骨界面空隙小，界限稍模糊，并且相互 交錯;B組自體骨與異種脫蛋白骨界面空隙大，界限清楚，相互交錯較少。術(shù)后8周，A組植入 材料邊緣模糊不清，與自體骨相互融合，周圍骨細(xì)胞成熟;B組植入材料-自體骨融合情況較 A組差，界限漸模糊。術(shù)后12周，A組骨缺損區(qū)域可見新生骨和軟骨形成，骨小梁排列均勻;B 組植入材料與異種脫蛋白骨模糊不清，新生骨較少，骨小梁排列欠規(guī)則。
[0290] 2、Masson染色術(shù)后4周A組新生骨量少，脫蛋白松質(zhì)骨殘留，孔隙內(nèi)充滿纖維組織， B組未見新生骨形成，脫蛋白骨殘留；術(shù)后8周，A組可見少量類骨質(zhì)位于小梁骨尖端，原脫蛋 白骨膠原染色均勾，B組可見少量新骨形成，原脫蛋白骨膠原染色不均；術(shù)后12周，A組骨塊 內(nèi)染色較均勾，呈紅綠相間，紅色骨組織染色為主，B組可見少量類骨質(zhì)，膠原排列不規(guī)則。 [02川屯、結(jié)論
[0292] 總之，本實(shí)驗(yàn)研究無論從影像學(xué)檢查、生物力學(xué)測試、骨密度測量，還是從組織學(xué) 觀察，結(jié)果均證實(shí)了本發(fā)明制劑具有促進(jìn)異種脫蛋白骨修復(fù)骨缺損的作用W及增強(qiáng)植骨區(qū) 域的生物力學(xué)性能。當(dāng)然，本實(shí)驗(yàn)只是從宏觀上觀察其對異種脫蛋白骨修復(fù)骨缺損的療效， 有待于進(jìn)一步從分子生物學(xué)水平甚至是從基因水平研究本發(fā)明制劑對骨缺損修復(fù)作用的 機(jī)理。但是，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果可W指導(dǎo)臨床使用本發(fā)明制劑來促進(jìn)骨折愈合。
[0293] 所有上述的首要實(shí)施運(yùn)一知識產(chǎn)權(quán)，并沒有設(shè)定限制其他形式的實(shí)施運(yùn)種新產(chǎn)品 和/或新方法。本領(lǐng)域技術(shù)人員將利用運(yùn)一重要信息，上述內(nèi)容修改，W實(shí)現(xiàn)類似的執(zhí)行情 況。但是，所有修改或改造基于本發(fā)明新產(chǎn)品屬于保留的權(quán)利。
[0294] W上所述，僅是本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并非是對本發(fā)明作其它形式的限制，任 何熟悉本專業(yè)的技術(shù)人員可能利用上述掲示的技術(shù)內(nèi)容加 W變更或改型為等同變化的等 效實(shí)施例。但是凡是未脫離本發(fā)明技術(shù)方案內(nèi)容，依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實(shí)質(zhì)對W上實(shí)施例所 作的任何簡單修改、等同變化與改型，仍屬于本發(fā)明技術(shù)方案的保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種用于促進(jìn)股骨頸骨折愈合的中藥藥物，其特征在于：原料藥包括當(dāng)歸、赤芍、熟 地黃、川芎、桃仁、紅花、楓香脂、夏天無、土鱉蟲、懷牛膝、雞血藤、劉寄奴、桂枝、桑枝、骨碎 補(bǔ)、川續(xù)斷、三七、炒杜仲、鱉甲、炒白術(shù)和炙甘草。2. 如權(quán)利要求1所述的用于促進(jìn)股骨頸骨折愈合的中藥藥物，其特征在于:各原料藥的 重量份分別為當(dāng)歸10~15重量份、赤芍10~20重量份、熟地黃20~30重量份、川芎10~15重 量份、桃仁10~15重量份、紅花10~15重量份、楓香脂10~20重量份、夏天無10~15重量份、 土鱉蟲10~15重量份、懷牛膝15~30重量份、雞血藤15~30重量份、劉寄奴10~15重量份、 桂枝10~20重量份、桑枝10~15重量份、骨碎補(bǔ)15~25重量份、川續(xù)斷10~15重量份、三七 10~15重量份、炒杜仲20~30重量份、鱉甲10~15重量份、炒白術(shù)20~30重量份、炙甘草10 ~15重量份。3. 如權(quán)利要求1或2所述的用于促進(jìn)股骨頸骨折愈合的中藥藥物，其特征在于：各原料 藥的重量份分別為當(dāng)歸10~15重量份、赤芍15~20重量份、熟地黃20~25重量份、川芎10~ 15重量份、桃仁10~15重量份、紅花10~15重量份、楓香脂10~15重量份、夏天無10~15重 量份、土鱉蟲10~15重量份、懷牛膝25~30重量份、雞血藤25~30重量份、劉寄奴10~15重 量份、桂枝10~15重量份、桑枝10~15重量份、骨碎補(bǔ)20~25重量份、川續(xù)斷10~15重量份、 三七10~15重量份、炒杜仲25~30重量份、鱉甲10~15重量份、炒白術(shù)25~30重量份、炙甘 草10~15重量份。4. 如權(quán)利要求1至3所述的用于促進(jìn)股骨頸骨折愈合的中藥藥物，其特征在于：各原料 藥的重量份分別為當(dāng)歸15重量份、赤芍20重量份、熟地黃25重量份、川芎15重量份、桃仁15 重量份、紅花15重量份、楓香脂15重量份、夏天無10重量份、土鱉蟲10重量份、懷牛膝25重量 份、雞血藤25重量份、劉寄奴15重量份、桂枝10重量份、桑枝10重量份、骨碎補(bǔ)25重量份、川 續(xù)斷15重量份、三七15重量份、炒杜仲30重量份、鱉甲10重量份、炒白術(shù)30重量份、炙甘草15 重量份。5. 如權(quán)利要求1至4所述的用于促進(jìn)股骨頸骨折愈合的中藥藥物，其特征在于:所述中 藥藥物劑型可以為薄膜衣片劑、腸溶衣片劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、□服液、口含劑、顆粒劑、 沖劑、散劑、丹劑、注射劑。6. 如權(quán)利要求1至5所述的用于促進(jìn)股骨頸骨折愈合的中藥藥物，其特征在于:所述中 藥藥物劑型優(yōu)選為口服液。7. 權(quán)利要求1至6所述中藥藥物的制備方法，其特征在于：當(dāng)中藥藥物制備成口服液時(shí)， 具體包括， 第一步，按質(zhì)量稱取夏天無、懷牛膝、劉寄奴、桂枝、桑枝、骨碎補(bǔ)、三七、炒杜仲、炒白術(shù) 和炙甘草，分別洗凈，粉碎，混合在一起，加水煎煮3次，第一次加水量為該步獲得的混合物 質(zhì)量的4~8倍，第二次加水量為該步獲得的混合物質(zhì)量的2~5倍，第三次加水量為該步獲 得的混合物質(zhì)量的1~3倍，煎煮液合并，過濾，濃縮除去水，干燥，粉碎，獲得粉末； 第二步，按質(zhì)量稱取余下原料藥，分別洗凈，粉碎，加乙醇提取3次，第一次用相對于該 步獲得的混合物質(zhì)量6~8倍量的醇濃度為80 %乙醇回流提取2小時(shí)，第二次用相對于該步 獲得的混合物質(zhì)量4~6倍量的醇濃度為60 %乙醇回流提取2小時(shí)，第三次用相對于該步獲 得的混合物質(zhì)量4~6倍量的醇濃度為60 %乙醇回流提取2小時(shí)，提取液合并，加入第一步制 備的粉末，將合并的提取液加熱至30°C，攪拌至溶解完全，提取液濾過，回收乙醇溶劑并濃 縮至60 °C相對密度為1.10~1.15的濃縮液，靜置，濾過，備用； 第三步，將濃縮液后的藥液加入已處理好的D101大孔吸附樹脂，大孔吸附樹脂是濃縮 液體積的3~5倍，吸附6小時(shí)，吸附藥液的大孔吸附樹脂柱用5倍柱床體積水洗后再用10倍 柱床體積的50 %乙醇洗脫，收集水洗脫液和醇洗脫液，回收醇和水，濃縮至60°C相對密度為 1.25~1.35的濃縮液； 第四步，取第三步獲得的濃縮液l〇〇g，加入蔗糖50g、防腐劑2g，加水定容至1000ml，灌 封，輻照滅菌，包裝成品，制成口服液，即得。8.-種用于促進(jìn)股骨頸骨折愈合的口服液，其特征在于：原料藥包括當(dāng)歸、赤芍、熟地 黃、川芎、桃仁、紅花、楓香脂、夏天無、土鱉蟲、懷牛膝、雞血藤、劉寄奴、桂枝、桑枝、骨碎補(bǔ)、 川續(xù)斷、三七、炒杜仲、鱉甲、炒白術(shù)和炙甘草。
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種用于促進(jìn)股骨頸骨折愈合的中藥藥物，其特征在于原料藥包括當(dāng)歸、赤芍、熟地黃、川芎、桃仁、紅花、楓香脂、夏天無、土鱉蟲、懷牛膝、雞血藤、劉寄奴、桂枝、桑枝、骨碎補(bǔ)、川續(xù)斷、三七、炒杜仲、鱉甲、炒白術(shù)、炙甘草。該藥物集補(bǔ)腎活血益氣、接骨續(xù)筋、化瘀止痛的作用，通過臨床資料總結(jié)回顧，實(shí)驗(yàn)研究相結(jié)合，證實(shí)了本發(fā)明制劑具有降低骨頸骨折不愈合率及股骨頭壞死率的臨床效果，從而促進(jìn)股骨頸骨折的愈合和減少并發(fā)癥。
【IPC分類】A61K35/586, A61P19/08, A61K35/64, A61K36/804
【公開號】CN105596523
【申請?zhí)枴緾N201510822522
【發(fā)明人】不公告發(fā)明人
【申請人】青島金智高新技術(shù)有限公司
【公開日】2016年5月25日
【申請日】2015年11月24日