層并將該有機(jī)層經(jīng)娃藻±墊和硅膠墊過(guò)濾并濃縮。娃 膠柱純化，使用乙酸乙醋/己燒作為洗脫液，得到化合物l(13g)。
[0220]向化合物I (26g)在I，4-二嗯燒(25mL)中的溶液中加入4N HCl/二嗯燒(25mL)，然 后加入濃HCl(2mL)并在室溫?cái)埌?h。將溶劑蒸饋掉，加入二氯甲燒并蒸饋掉并向該殘余物 中加入乙酸乙醋（150mL)并在室溫?cái)埌柽^(guò)夜并過(guò)濾沉淀物，用乙酸乙醋、己燒洗涂并真空干 燥。得到的化合物l-HCl(24.8g)為白色固體。
[02引]iH-NMR(CDCl3)S8.72(d，2H，J = 5.2Hz)，8.17(d，lH，J = 2.4Hz)，7.59-7.63(m，3H)， 7.26(d，2H，J = 3.2Hz)，7.22(t，lH，J = 4.細(xì)z)，7.10(d，lH，J = 8.4Hz)，5.10(s，2H)，4.56 (t，2H，J = 5.0Hz)，3.77(t，2H，J = 5.0Hz);MS m/z 416.UM+H)。
[0222] 實(shí)施例2:4-(喀晚-2-基甲基)-7-(4-(^氣甲基)苯基)-3,4-二氨苯并[f] [I，4]氧 氮雜革-5 (2H)-酬(化合物2)
[0223] 化合物2根據(jù)化合物1的類(lèi)似方法進(jìn)行制備，除了使用4-S氣甲基苯基棚酸代替4-=氣甲氧基苯基棚酸。
[0224] 實(shí)施例3:生物數(shù)據(jù)
[0225] 測(cè)試化合物在縮短QT間期的有效性的方法是本領(lǐng)域已知的。
[0226] 化合物1顯示了動(dòng)作電位持續(xù)時(shí)間(APD)的縮短（圖1)。
[0227] 化合物1顯示了在長(zhǎng)QT綜合征-3化QT3)模型中每搏差異性的降低（圖2)。
[0228] 化合物1顯示了 QTc相對(duì)于基線(xiàn)的變化(圖3)。
[0229] 化合物1顯示了 LQT3患者的PK性質(zhì)與健康志愿者的類(lèi)似(圖4)。
[0230] 表A.雷諾嗦和化合物1對(duì)抑制LQT3突變中增強(qiáng)的晚INa的效力
[0232] IOmg的化合物1在3例患有遺傳型LQT3的患者中顯示出初步的療效(QTc縮短或T波 形態(tài)）。在單次劑量給藥后，化合物1具有W下特點(diǎn):快速吸收、雙相減退、低清除率和長(zhǎng)半衰 期。
[023引在LQT-3臨床研究中，向10例患者給藥單一劑量的化合物l(10mg、20mg、30mg或 60mg)。在運(yùn)些受試者中，QTc被縮短的范圍為20-100毫秒。發(fā)現(xiàn)了化合物1在所述患者中良 好耐受。
[0234]實(shí)施例4:化合物（I)在LQT3患者中的效果
[023引在正在進(jìn)行的第1階段中，評(píng)估了在LQT3患者中，口服化合物（I)對(duì)QTc間期的影 響。將招募經(jīng)LQTS研究協(xié)作組化QTS registry)鑒定的LQT3受試者，其在屯、臟鋼通道上具有 確定的突變且QTc〉460msec。招募4個(gè)連續(xù)的單劑量組和1個(gè)多劑量組，并且接受單劑量的化 合物（I)(組1:1 Omg;組2 :20mg;組3: 30mg;組4:60mg)或多劑量的化合物（I)(組5 :第1天-20mg，第2天-40mg，第3-7天-每日 6mg)。
[0236] 招募10名受試者。在運(yùn)10名受試者中，3名受試者接受單一口服劑量的化合物（I)， 5名受試者W2種不同的劑量周期接受化合物（I)，和2名受試者W3種不同的劑量周期接受 化合物（I)。初步安全評(píng)估表明，化合物（I)在所有受試者中良好耐受。W2種不同的方式分 析QTc間期由基線(xiàn)的變化(-1天，組1-4;-2天和-1天的平均值，組5): 1)在給藥后12小時(shí)的過(guò) 程中，平均日間QTc的變化(QTc間期AUCo-12/12)和2)在給藥后12小時(shí)之內(nèi)，最大時(shí)間匹配的 QTc變化。在全部劑量水平觀(guān)測(cè)到QTc的縮短。在多劑量組(如圖5-6所示），化合物（I)對(duì)QTc 縮短的效果是劑量依賴(lài)性的，相比于第1天的20mg，第2天的40mg具有更大的QTc縮短。更重 要的是，所述QTc縮短在第3-7天的6mg維持劑量得W維持。
[0237] 此外，化合物（I)對(duì)屯、功能的影響通過(guò)EC冊(cè)評(píng)估。對(duì)于單劑量組，在基線(xiàn)（-1天）和 在第1天單一口服給藥化合物（I)后3和6小時(shí)進(jìn)行超聲屯、動(dòng)圖化CH0)。對(duì)于多劑量組(組5)， 在基線(xiàn)(-1天）、在第1天單一口服給藥化合物（I)后3和6小時(shí)W及在第4天和第7天給藥后3 小時(shí)進(jìn)行ECHO?；衔?I)并沒(méi)有影響EC冊(cè)評(píng)估的左屯、室(LV)功能。
[0238] 總之，基于迄今為止針對(duì)參與到第1階段研究的受試者的初步數(shù)據(jù)，化合物（I)良 好耐受且對(duì)EC冊(cè)測(cè)定的屯、臟功能沒(méi)有影響?；衔铮↖)在單一劑量后縮短QTc間期，其在多 劑量給藥后維持?；衔?I)對(duì)QTc縮短的效果與突變或同時(shí)使用b阻滯劑無(wú)關(guān)。
[0239] 實(shí)施例5:兔離體屯、臟實(shí)驗(yàn)
[0240] 在運(yùn)個(gè)研究中使用兔（新西蘭白色成年雌性，2-4kg;Weste;rn Oregon Rabbit Company,Philomath,OR)符合。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物護(hù)理和使用指南（Guide for the化'日and Use of LaboratoiT Animals)" (NIH publication No.85-23,1996年修訂）并經(jīng)吉利德科學(xué)的 動(dòng)物護(hù)理和使用委員會(huì)批準(zhǔn)。用前文所述的Langendo計(jì)f方法將屯、臟分離并灌注(Wu等人， 2009)。簡(jiǎn)而言之，房室結(jié)區(qū)域被熱燒蝕W產(chǎn)生屯、臟傳導(dǎo)阻滯，并將屯、臟WlHz的速率起搏。 記錄左屯、室屯、外膜和偽12導(dǎo)聯(lián)屯、電圖化CG)的單相動(dòng)作電位(MAP)。在10-20min平衡期之 后，將屯、臟暴露于載劑（改良的Krebs-Henseleit緩沖液KE-4031，然后在始終存在E-4031 的情況下提高化合物1的濃度直至達(dá)到穩(wěn)態(tài)效果。測(cè)量在復(fù)極化完成90%的水平下的MP持 續(xù)時(shí)間(MPD90)。結(jié)果如圖7所示。
[0241] 實(shí)施例6:兔離體左屯、室模形標(biāo)本
[0242] 兔離體左屯、室模形標(biāo)本按如上所述制備(Yan等人，1996,2009)。簡(jiǎn)而言之，通過(guò)左 側(cè)開(kāi)胸術(shù)將其胸部剖開(kāi)，并將屯、臟切除，置于由含有20mmol/Ur]。的冷的(4°C)Tyrode溶液 組成的屯、臟停搏液中并轉(zhuǎn)移至解剖盤(pán)。將具有大約1 X 1 X 0.8或0.8 X 0.8 X 0.4cm3尺寸的 透壁模形標(biāo)本從該左屯、室切出。將該組織經(jīng)由左前降動(dòng)脈或另一冠狀動(dòng)脈的?。ㄖ睆?，-lOOwn)分支進(jìn)行插管并用屯、臟停搏液灌注。從該屯、臟的切除到動(dòng)脈插管和灌注的總時(shí)間不 到4分鐘。將未灌注的組織用刀片小屯、地除去。然后將該制品置于組織浴中并用W下組成 (mmol/L)的Tyrode溶液進(jìn)行動(dòng)脈灌注：化Cl 129、KC1 4、化出P〇4〇. 9、化HC0320、CaCbl. 8、 MgSCkO. 5、葡萄糖5.5和膜島素1U/L，用95 %化/5 %C〇2(36 ± rC )緩沖。所述灌注液通過(guò)滾壓 累（Cole Parmer Instrument Co)遞送至動(dòng)脈。用壓力傳感器（World Precision Ins化uments，Inc)監(jiān)測(cè)灌注壓并通過(guò)調(diào)節(jié)灌注流速維持40和50mm Hg。將該制品保持浸沒(méi) 在動(dòng)脈灌注液中，使該動(dòng)脈灌注液升至高于該組織表面水平2至3mm(36±rC)。結(jié)果如圖8 所示。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 在人患者中治療LQT綜合征的方法，所述方法包括向所述患者給藥有效量的化合物 ⑴或⑵：或其藥學(xué)上可接受的鹽。2. 在人患者中縮短QTc間期的方法，所述QTc間期通過(guò)超聲心動(dòng)圖或磁共振成像評(píng)估， 所述方法包括向所述患者給藥有效量的化合物1或2:或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述QTc間期是由SCN5A基因突變導(dǎo)致的。3. 根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述化合物為或其藥學(xué)上可接受的4. 根據(jù)權(quán)利要求1的75. 根據(jù)權(quán)利要求1的7 或其藥學(xué)上可接受的鹽。6. 根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述化合物為7. 根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法，其中所述化合物通過(guò)靜脈內(nèi)給藥。8. 根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法，其中所述化合物通過(guò)口服給藥。9. 根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法，其中所述有效量為每日約0. lmg至約lOOmg。10. 根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法，其中所述有效量為每日約lmg、3mg、6mg、9mg、1 Omg、 12mg、18mg、20mg、30mg、40mgS60mg。11. 根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法，其中所述有效量為每日約lmg、3mg、6mg、9mg、12mg和 18mg〇12. 根據(jù)權(quán)利要求7-11中任一項(xiàng)的方法，其中所述化合物每日給藥一次。13. 根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述LQT綜合征為L(zhǎng)QT3。14. 根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述LQT綜合征為L(zhǎng)QT1或LQT2。15. 化合物1或2:或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備用于在人患者中縮短QT間期延長(zhǎng)的藥物中的用途，其中 所述QT間期延長(zhǎng)是由SCN5A基因突變導(dǎo)致的。16. 化合物1或2或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備用于治療LQT綜合征的藥物中的用途。17. 根據(jù)權(quán)利要求15或16中的用途，其中所述化合物為化合物1:18. 根據(jù)權(quán)利要求15或16中的用途，其中所述化合物為化合物2:ο19. 根據(jù)權(quán)利要求16的用途，其中所述LQT綜合征為L(zhǎng)QT3。20. 根據(jù)權(quán)利要求16的用途，其中所述LQT綜合征為L(zhǎng)QT1或LQT2。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及通過(guò)給藥有效量的高效且選擇性的晚鈉離子通道阻滯劑來(lái)治療長(zhǎng)QT綜合征的方法。
【IPC分類(lèi)】A61K31/506, A61P9/06
【公開(kāi)號(hào)】CN105611931
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201480042409
【發(fā)明人】L.貝拉迪尼利, S.拉加馬尼, D.曾
【申請(qǐng)人】吉利德科學(xué)公司
【公開(kāi)日】2016年5月25日
【申請(qǐng)日】2014年7月31日
【公告號(hào)】CA2919757A1, EP3027190A1, US9126989, US20150038489, WO2015017661A1