，并且在ER應(yīng)激誘導(dǎo)的蛋白質(zhì)水解后，它通 過存在于編碼ER蛋白伴侶的基因的啟動(dòng)子中的順式作用ER應(yīng)激應(yīng)答元件化RSE)而起到細(xì) 胞核轉(zhuǎn)錄因子的作用。該蛋白質(zhì)已經(jīng)被鑒定為靜止的而非增殖性鱗狀癌細(xì)胞的存活因子。 5. ASKl
[0062] 調(diào)亡信號調(diào)節(jié)激酶I (ASKl)也稱為絲裂原活化蛋白激酶5(MAP3K5)，它是MAP激酶 家族的成員，并且同樣是絲裂原活化蛋白激酶通路的一部分。ASKl直接將MKK4(SEK1)/MKK7 和MKK3/MKK6憐酸化，運(yùn)隨之響應(yīng)于一系列應(yīng)激如氧化應(yīng)激、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和巧流入，W不依 賴Raf的方式激活C-Jun N末端激酶(JNK)和p38絲裂原活化蛋白激酶。
[0063] 在無應(yīng)激條件下，ASKl通過其C末端卷曲螺旋域(CCC)進(jìn)行寡聚（對于其活化是必 需的），但由于減少的硫氧還蛋白（Trx)和巧W及整合素結(jié)合蛋白I(CIBl)的抑制作用，其仍 保持為無活性形式。Trx通過直接與其N末端卷曲螺旋域(NCC)結(jié)合而抑制ASKl激酶活性。 Trx和CIBl分別W氧化還原或巧敏感性方式調(diào)節(jié)ASKl活化。兩者似乎都與TNF-a受體相關(guān)因 子2(TRAF2)---種ASKl活化劑相競爭。然后，TRAF2和TRAro被募集到ASKl，W形成更大分 子量的復(fù)合物(參見圖2A)。隨后，ASKl不僅通過CCC，還通過NCC來形成同寡聚相互作用，運(yùn) 導(dǎo)致ASKl通過在蘇氨酸845處的自憐酸化而完全活化。 6. JNK
[0064] C-Jun-N末端激酶(JNK1/2/3)是在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的絲裂原活化蛋白激酶 (MAPK)級聯(lián)的S個(gè)主要組之一的下游組分，其中另外兩個(gè)由細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶化RK1/2) 和p38蛋白激酶(p38.a、e、丫、S)組成。每一組的激酶均為包括MAPK的=模塊級聯(lián)的一部分， 該MPK通過由MAPK激酶(MAPKK)引起的憐酸化而得到激活，該MPK激酶隨之通過由MAPKK激 酶(MAPKKK)引起的憐酸化而得到激活。已將JNK和p38的活化與調(diào)亡的誘導(dǎo)相聯(lián)系。通過采 用多種細(xì)胞類型，證明了 JNK的持續(xù)活化誘導(dǎo)細(xì)胞死亡，并且證明通過顯性陰性化N)抑制劑 對JNK活化的阻滯阻止了由一系列調(diào)亡刺激導(dǎo)致的殺傷。通過對祀向破壞化k基因的小鼠的 分析也證明了 JNK在調(diào)亡中的作用。JNKl和JNK2均缺乏的小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEF)對由多 種應(yīng)激刺激導(dǎo)致的調(diào)亡具有完全的抗性，該應(yīng)激刺激包括基因毒物、UV福射和茵香霉素，并 且化k3-/-神經(jīng)元在對興奮毒素的調(diào)亡反應(yīng)中表現(xiàn)出嚴(yán)重的缺陷。而且，已證明JNK2對于在 未成熟胸腺細(xì)胞中的抗-CD3誘導(dǎo)的調(diào)亡是必需的。 7. P38MAP 激酶
[0065] P38MAP激酶(a、e、丫和S)是MAPK家族的成員，并且W下四種P38MPK均已經(jīng)在高等 真核生物中進(jìn)行克隆：p38-a/XMpk2/CSBP、p38-e/p38-的2、p38- 丫 /SAPK3/ERK6和p38-S/ SAPK4。運(yùn)四種蛋白質(zhì)在其氨基酸序列上有60-70%相同，并且均被MKK6(MAPK激酶-6)激活。 已證明另一種MPK激酶一MKK3(MAPK激酶-3)將p38-a、p38-丫和P38-S(而非P38-02)憐酸化 并激活。哺乳動(dòng)物P38MAPK家族通過細(xì)胞應(yīng)激而激活，該細(xì)胞應(yīng)激包括UV福射、熱激和高滲 透應(yīng)激。
[0066] 由于越來越多的轉(zhuǎn)錄因子被認(rèn)為是p38的直接祀標(biāo)，因此P38MAP激酶的活化還可 直接影響基因轉(zhuǎn)錄。已經(jīng)描述了 ATFUATF2和ATF-6、MEF2A/C(肌細(xì)胞增強(qiáng)因子-2A/C)、 SAPlA(信號傳導(dǎo)淋己細(xì)胞活化分子相關(guān)蛋白-1A) W及ElkUETS域轉(zhuǎn)錄因子-1)的直接憐酸 化和活化。 8. MEK
[0067] "MEK1"和"MEK2"是絲裂原活化的邸K活化激酶的縮寫巧中邸K是細(xì)胞外信號調(diào)節(jié) 蛋白激酶，MAPK的另一個(gè)名稱）dMEK巧PMEK2是雙功能的絲氨酸/蘇氨酸和酪氨酸蛋白激酶， 并且也被稱為MAP激酶。Ras-GTP激活Raf ,Raf激活MEKl和MEK2，而MEKl和MEK2激活MAP激酶 (MAPK)。一旦被激活，Raf和其他激酶將兩個(gè)相鄰的絲氨酸殘基(在MEK-I的情況下為S 2IS和 S222 )上的MEK憐酸化。運(yùn)些憐酸化對于MEK活化為激酶是必需的。隨之，MEK將在由單個(gè)氨基 酸分開的兩個(gè)殘基上的MAP激酶憐酸化，該單個(gè)氨基酸為:酪氨酸(Y"5)和蘇氨酸(T"3)。在 將MP激酶憐酸化之前，MEK似乎與MAP激酶緊密關(guān)聯(lián)，表明MEK對MAP激酶的憐酸化可能需要 兩種蛋白質(zhì)之間預(yù)先的強(qiáng)相互作用。 9. PI3K-Akt 通路
[0068] 憐脂酷肌醇3'-激酶(PUK)-Akt信號傳導(dǎo)通路被多種類型的細(xì)胞刺激或毒性損傷 激活，并且調(diào)芐基本的細(xì)胞功能如轉(zhuǎn)錄、翻譯、增殖、生長和存活。生長因子與其受體酪氨酸 激酶(RTK)或G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)的結(jié)合分別刺激Ia和Ib類PI3K同種型。PUK催化憐脂酷 肌醇-3,4,5-S憐酸(PIP3)在細(xì)胞膜處的產(chǎn)生。PIP3轉(zhuǎn)而作為幫助激活A(yù)kt的第二信使。一 旦成為活性的，Akt可通過使參與調(diào)亡、蛋白質(zhì)合成、代謝和細(xì)胞循環(huán)的底物憐酸化來控制 關(guān)鍵的細(xì)胞過程。 10. XBP-I
[0069] 該基因編碼通過與被稱為X盒的啟動(dòng)子元件結(jié)合而調(diào)節(jié)MHC II類基因的轉(zhuǎn)錄因 子。該基因產(chǎn)物為bZIP蛋白，其也被鑒定為與T細(xì)胞白血病病毒I型啟動(dòng)子的啟動(dòng)子中的增 強(qiáng)子結(jié)合的細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，未折疊蛋白質(zhì)在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)巧R)中積累時(shí)，該基因的mRNA 通過經(jīng)由核酸內(nèi)切酶肌醇需求酶I(IREl)介導(dǎo)的非常規(guī)剪接機(jī)制被加工成活性形式。所產(chǎn) 生的來自剪接的mRNA的26nt的損失導(dǎo)致移碼和同種型XBPl(S),該同種型XBPl(S)是功能活 性轉(zhuǎn)錄因子。由未剪接的mRNA編碼的同種型一XBPl(U)是組成型表達(dá)的，并且被認(rèn)為起到 XBPl(S)的負(fù)反饋調(diào)節(jié)物的作用，其關(guān)閉祀基因在邸應(yīng)激的恢復(fù)階段中的轉(zhuǎn)錄。XBPl的假基 因已被鑒別出且位于5號染色體。 11. eIF2-a
[0070] eIF2-a是翻譯起始因子，其通過與GTP和起始因子tRNA形成S元復(fù)合物而在蛋白 質(zhì)合成的早期步驟中起作用。該復(fù)合物與40s核糖體亞基結(jié)合，隨后與mRNA結(jié)合形成43S起 始前復(fù)合物。連接60S核糖體亞基W形成80S起始復(fù)合物之前，將與eIF-2結(jié)合的GTP水解并 釋放eIF-2-GDP二元復(fù)合物。為了 eIF-2再循環(huán)并催化另一輪的引發(fā)，與eIF-2結(jié)合的GDP必 須W經(jīng)由eIF-2B催化的反應(yīng)的方式與GTP交換。eIF2-a被陽服、GCN2、皿I和PKR等至少4種激 酶被憐酸化，并且憐酸化使eIF-2/GDP/eIF-2B復(fù)合物穩(wěn)定化并阻止GDP/GTP交換反應(yīng)，由此 減少eIF-2在連續(xù)數(shù)輪引發(fā)之間的再循環(huán)并導(dǎo)致翻譯的全面抑制。 12. GSK3
[0071] 糖原合成酶激酶-3(GSK3)最初被鑒定為參與糖原代謝的控制的酶。近年來已經(jīng)證 明它在調(diào)節(jié)各種不同的細(xì)胞功能中具有關(guān)鍵作用，運(yùn)些細(xì)胞功能包括蛋白質(zhì)合成的引發(fā)、 細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、調(diào)亡，并且其作為Wnt信號傳導(dǎo)級聯(lián)的組分是胚胎發(fā)育所必需的。GSK3 作為膜島素信號傳導(dǎo)通路中的核屯、負(fù)調(diào)節(jié)物且在膜島素抗性中發(fā)揮作用。 13. NRF2
[0072] 核因子(紅系衍生2)樣2也被稱為NFE2L2或NRF2,是在人類中由NFE2L2基因所編碼 的轉(zhuǎn)錄因子。NRF2抗氧化反應(yīng)通路是針對氧化應(yīng)激的細(xì)胞毒性效應(yīng)的主要細(xì)胞防御。NRF2 增加了若干種抗氧化酶的表達(dá)。
[0073] NRF2是堿性亮氨酸拉鏈(bZIP)轉(zhuǎn)錄因子。在正?；蛭磻?yīng)激的條件下，NRF2通過 Kelch樣-ECH-相關(guān)蛋白UKEAP1)和滯蛋白3(化Ilin 3)(其通過泛素化降解NRF2)保持在細(xì) 胞質(zhì)中。在氧化應(yīng)激下，NRF2不被降解，而是轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核中，在那里它引發(fā)抗氧化基因及 其蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)錄。 14. KEAPl
[0074] 已經(jīng)證明Kelch樣ECH相關(guān)蛋白UKEAPl)與NRF2(抗氧化反應(yīng)的主要調(diào)節(jié)物）相互 作用。在靜態(tài)下，NRF2通過與KEAPl結(jié)合而錯(cuò)定在細(xì)胞質(zhì)中，KEAPl轉(zhuǎn)而促進(jìn)泛素化和隨后的 NRF2蛋白質(zhì)水解。運(yùn)種結(jié)合和NRF2在細(xì)胞質(zhì)中的進(jìn)一步降解是KEAP1對NRF2的抑制效應(yīng)的 機(jī)制。 15. ATF4
[007引激活轉(zhuǎn)錄因子4(化X-響應(yīng)性增強(qiáng)子元件B67)也稱為ATF4,是人類中由ATF4基因編 碼的蛋白質(zhì)。該基因編碼最初被鑒定為廣泛表達(dá)的哺乳動(dòng)物DNA結(jié)合蛋白的轉(zhuǎn)錄因子，該 DNA結(jié)合蛋白可W結(jié)合HTLV-I的LTR中的tax-響應(yīng)性增強(qiáng)子元件。編碼的蛋白質(zhì)還被分離并 被稱為cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白2 (CREB-2)。由該基因編碼的蛋白質(zhì)屬于DNA結(jié)合蛋白家族， 該家族包括轉(zhuǎn)錄因子的AP-I家族、cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白（CREB)和CR邸樣蛋白。運(yùn)些轉(zhuǎn)錄 因子共享蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用中設(shè)及的亮氨酸拉鏈區(qū)，該亮氨酸拉鏈區(qū)位于充當(dāng)DNA結(jié) 合域的一段堿性氨基酸的C末端。已描述了編碼相同蛋白質(zhì)的兩個(gè)替代轉(zhuǎn)錄物。兩個(gè)假基因 位于X染色體上含有較大反向重復(fù)的區(qū)域中的q28處。 干燥儲(chǔ)存穩(wěn)定劑 1.天然和合成的氨基酸
[0076] 同樣如本文所述的，某些實(shí)施方案中脫水制劑可在用于將功能性細(xì)胞在環(huán)境溫度 下基本干燥儲(chǔ)存的脫水制劑中包含至少一種氨基酸或合成氨基酸。
[0077] 在某些實(shí)施方案中，該天然氨基酸選自甘氨酸、谷氨酷胺、谷氨酸和脯氨酸。
[0078] 在某些其他實(shí)施方案中，該脫水制劑和組合物可含有一種或多種具有通式I的合 成氨基酸，
其中Ri、R2、R3獨(dú)立地選自芳基、芳烷基、-H、-C出和-C出-C曲，其中當(dāng)Ri和R2為C出或Ofe-C出時(shí)，化為H或不存在，其中X選自-C出-，-C出CH2-，-OfcC出CH2-，-OfcC出OfcC出-，
并且其中Y選自COO和S03。
[0079] 在所述組合物中有用的示例性合成氨基酸包括在W02010132508和美國專利8， 519,125中描述的那些，運(yùn)些文獻(xiàn)的內(nèi)容通過引用全文并入本文?？稍诒景l(fā)明組合物中采用 的合成氨基酸包括徑脯氨酸和甜菜堿(N，N，N-S甲基甘氨酸）。 2. 膚
[0080] 在某些實(shí)施方案中，本文所述的用于將細(xì)胞在環(huán)境溫度下基本干燥儲(chǔ)存的脫水制 劑可含有膚。有利的是，已確定包含穩(wěn)定量(例如，約IOmM到200mM)的小二膚或二膚類似物 的某些脫水制劑(包括表1中列出的那些）出乎意料地能夠?qū)⒓?xì)胞在環(huán)境溫度下基本干燥儲(chǔ) 存，并且儲(chǔ)存持續(xù)超過運(yùn)些細(xì)胞的冷藏的時(shí)間段。示例性的二膚具有氨基酸序列丙氨酸-谷 氨酷胺。 3. =糖
[0081] 如本文所述，本文所述的某些實(shí)施方案中，所述制劑可在用于將細(xì)胞在環(huán)境溫度 下基本干燥儲(chǔ)存的脫水制劑或組合物中包含至少一種=糖。=糖是由兩個(gè)糖巧鍵連接的= 個(gè)單糖組成的寡糖。糖巧鍵可在組分單糖上的任意徑基基團(tuán)之間形成，且不同的鍵組合（區(qū) 域選擇性)和立體化學(xué)(a-或e-)產(chǎn)生S糖，該S糖為具有不同的化學(xué)和物理性質(zhì)的非對映 異構(gòu)體。可基于本公開內(nèi)容并根據(jù)本領(lǐng)域的常規(guī)實(shí)踐來完成穩(wěn)定儲(chǔ)存組合物中所包含的一 種或多種特定=糖的選擇，并且該選擇可受到包括其他制劑組分在內(nèi)的多個(gè)因素的影響。 示例性的=糖包括但不限于麥芽=糖、異麥芽=糖、棉子糖、松=糖(melezitriose)、黑曲 霉=糖和酬糖。在用于細(xì)胞的基本干燥儲(chǔ)存的某些實(shí)施方案(包括表1中列出的制劑）中，該 S糖是松S糖并且優(yōu)選濃度為約1 %-20 %，更優(yōu)選約5.0-15 %，其中"約"可理解為表示量 的變化，該量的變化可W是比所述量高或低少于25%，更優(yōu)選少于20%，且更優(yōu)選少于 15%、10%、5% 或 1%。 4. 水溶性聚合物
[0082] 如本文所述，某些實(shí)施方案可在用于全血樣品中核酸和/或多膚分子的基本穩(wěn)定 儲(chǔ)存的制劑和組合物中包含至少一種水溶性聚合物。運(yùn)樣的水溶性聚合物包括聚乙締化咯 燒和聚乙締醇，并且可W理解，技術(shù)人員根據(jù)本公開內(nèi)容可選擇用于基本干燥儲(chǔ)存的制劑 和組合物的其他水溶性聚合物，因?yàn)槠淇苫谒捎玫慕M合物的其他組分和被儲(chǔ)存的特定 細(xì)胞類型而變化。某些實(shí)施方案(包括但不限于在表1中所示的那些)預(yù)期包含濃度(基于體 積，即vol/vol)為約0.1-10% (vol/vol)，更優(yōu)選約0. l-5%(vol/vol)，且更優(yōu)選1.0% (vol/vol)的水溶性聚合物，其中"約"可理解為表示量的變化，該量的變化可W是比所述量 高或低少于50%，更優(yōu)選少于40%，更優(yōu)選少于30%，且更優(yōu)選少于20%、15%、10%或5%。 在某些實(shí)施方案中，該水溶性聚合物為分子量范圍為約30-70，000道爾頓且約87-90 %水解 的聚乙締醇，其中"約"可理解為表示量的變化，該量的變化可W是比所述量高或低少于 50%，更優(yōu)選少于40%，更優(yōu)選少于30%，且更優(yōu)選少于20%、15%、10%或5%。 5. 非還原糖
[0083] 同樣如本文所述，某些實(shí)施方案可在環(huán)境溫度下的預(yù)脫水和/或脫水制劑W及組 合物中包含至少一種非還原糖。非還原糖為缺少功能性醒基的糖分子。示例性的非還原糖 包括薦糖和海藻糖。在用于細(xì)胞的基本干燥儲(chǔ)存的實(shí)施方案中，該非還原糖為W約1.0-200mM，優(yōu)選約50mM-200mM，且更優(yōu)選約150mM的濃度存在的海藻糖，其中"約"可理解為表示 量的變化，該量的變化可W是比所述量高或低少于25%，更優(yōu)選少于20%，且更優(yōu)選少于 15%、10%、5% 或 1%。 6. 聚酸
[0084] 根據(jù)某些實(shí)施方案，聚酸可包含在本文所述的用于將功能性細(xì)胞在環(huán)境溫度下基 本穩(wěn)定儲(chǔ)存的脫水制劑中。聚酸通常是指在其主鏈中含有多于一個(gè)酸官能團(tuán)的聚合物。聚 酸是通過醇脫水形成的相對穩(wěn)定的化合物。用于在所述制劑、組合物和方法中使用的示例 性的聚酸包括但不限于聚乙二醇、聚丙二醇和聚苯酸。在某些實(shí)施方案中，聚酸的分子量為 約5,000到15,000道爾頓。 7.四氨喀晚
[0085] 在某些實(shí)施方案中，所述干燥儲(chǔ)存穩(wěn)定劑是四氨喀晚。示例性的四氨喀晚為5-徑 基四氨喀晚巧-hydro巧ectoine)。在某些脫水制劑和組合物中，使用約IOmM到約200mM濃度 的5-徑基四氨喀晚。 制劑試劑 1. pH緩沖液
[0086] 根據(jù)某些實(shí)施方案，本文所述的、用于將功能性細(xì)胞在環(huán)境溫度下基本干燥儲(chǔ)存 的脫水制劑和組合物可包含一種或多種抑緩沖液，該pH緩沖液可W是由于其抵抗溶液(如 pH緩沖液存在于其中的水溶液)的pH變化的能力而被本領(lǐng)域所知的大量化合物中的任意化 合物。可基于本公開內(nèi)容并根據(jù)本領(lǐng)域中的常規(guī)實(shí)踐來完成包含在穩(wěn)定儲(chǔ)存組合物中的一 種或多種特定抑緩沖液的選擇，并且該選擇可受到多種因素的影響，該因素包括期望維持 的pH、生物樣品的性質(zhì)、將要采用的溶劑條件、將要使用的制劑的其他組分W及其他標(biāo)準(zhǔn)。 例如，通常使用在質(zhì)子解離常數(shù)(pKa)為約0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9或 1.0抑單位內(nèi)的抑下的抑緩沖液，質(zhì)子解離常數(shù)是緩沖液的特征。
[0087] pH緩沖液的非限制性實(shí)例包括巧樣酸、酒石酸、蘋果酸、橫基水楊酸、橫基間苯二 甲酸、草酸、棚酸鹽、CAPS(3-(環(huán)己基氨基)-1-丙橫酸）、CAPS0(3-(環(huán)己基氨基)-2-徑基-1-丙橫酸）、EPPS(4-(2-^基乙基)-1-贓嗦丙橫酸）、肥PES(4-(2-^基乙基）贓嗦-1-乙橫酸）、 MES(2-(N-嗎嘟基）乙橫酸）、M0PS(3-(N-嗎嘟基）丙橫酸）、M0PS0(3-嗎嘟基-2-徑基丙橫 酸）、PIPES(1，4-贓嗦二乙橫酸）、TAPS(N-[S(^基甲基）甲基]-3-氨基丙橫酸）、TAPS0(2-徑基-3-[^(徑基甲基）甲基氨基]-1-丙橫酸）、TES(N-[S(^基甲基）甲基]-2-氨基乙橫 酸）、bicine(N，N-雙（2-徑基乙基)甘氨酸）、化icine(N-[S(^基甲基）甲基]甘氨酸）、S (^巧圣基甲基）氨基甲燒）和雙-S(2-[雙（2-徑基乙基）氨基]-2-巧圣基甲基）-1,3-丙二 醇）。本文中設(shè)及的某些實(shí)施方案(包括表X中列出的那些中的多個(gè))可W WpH為約4.0、4.1、 4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、 6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、 8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9或9.0的制劑為特征，其中"約"可理解為表示 量的變化，該量的變化可W是比所述抑值高或低少于1，優(yōu)選少于0.5,優(yōu)選少于0.25,且更 優(yōu)選少于0.1個(gè)抑單位。 2. 馨合劑
[008引根據(jù)某些實(shí)施方案，馨合劑(化elating agent)或馨合劑(化elator)可包含在本 文所述的、用于血液樣品中的完整活細(xì)胞的基本穩(wěn)定儲(chǔ)存的組合物中，并且由于其與金屬 陽離子復(fù)合并阻礙金屬陽離子的反應(yīng)性的能力而被熟悉本領(lǐng)域的技術(shù)人員所知。示例性的 馨合劑包括二乙締 S胺五乙酸(DTPA)、乙二胺四乙酸化DTA)、乙二醇四乙酸化GTA)、反式- 1,2-二氨基環(huán)己燒-N，N，N'，N'-四乙酸(CDTA)、l，2-雙（2-氨基苯氧基）乙燒-N，N，N'，N'-四 乙酸(BAPTA)、l，4,7，10-四氮雜環(huán)十二燒-l，4,7，10-四乙酸(D0TA)、N-(2-?基乙基）乙二 胺-N，N'，N'-S乙酸、葡萄糖酸鋼和次氮基S乙酸(NTA)。一種馨合劑是葡萄糖酸鋼并且W 約1.0-50mM，更優(yōu)選約10-40mM，且更優(yōu)選約25mM的濃度存在，其中"約"可理解為表示量的 變化，該量的變化可W是比所述量高或低少于25%，更優(yōu)選少于20%，且更優(yōu)選少于15%、 10%、5% 或 1%。 表1 用于將功能性細(xì)胞在環(huán)境溫度下基本干燥儲(chǔ)存的示例性脫水制劑













脫水過程
[0089] 本發(fā)明的MCS脫水制劑能夠在存在或不存在采用預(yù)脫水制劑的先前處理的情況 下，在脫水過程中維持細(xì)胞膜和細(xì)胞器的完整性W及細(xì)胞的總體形態(tài)，W使得細(xì)胞在基本 干燥儲(chǔ)存后再水化時(shí)，細(xì)胞保持至少一種如脫水之前的細(xì)胞的功能性質(zhì)，例如，細(xì)胞活力。
[0090] 例如，可通過簡單的目測來確定脫水細(xì)胞的干燥，W確保所有水分均已蒸發(fā)或去 除。在一些實(shí)施方案中，可優(yōu)選地包括水分指示物，W確定已經(jīng)實(shí)現(xiàn)的干燥程度。將細(xì)胞基 本干燥的時(shí)間可根據(jù)MCS脫水制劑中存在的試劑而變化。根據(jù)制劑組分和細(xì)胞所固定的器 皿的幾何形狀，細(xì)胞最適宜在約一到S小時(shí)的時(shí)間段內(nèi)脫水。細(xì)胞在約32°C-39°C的溫度范 圍內(nèi)，優(yōu)選在約37°C下脫水，并可在培養(yǎng)箱中或在采用控制溫度、氧氣水平和相對濕度的環(huán) 境室的更加受控的條件下脫水。通過調(diào)節(jié)相對濕度可調(diào)節(jié)脫水的速率。例如，在包含水溶性 聚合物(例如，PVA)的MCS制劑中脫水的細(xì)胞將花費(fèi)更長的時(shí)間來脫水，所W可降低相對濕 度W有利于優(yōu)化脫水時(shí)間。另外，多種干細(xì)胞的基本干燥儲(chǔ)存在5 %的氧氣濃度下進(jìn)行，W 確保細(xì)胞維持在基本在免疫學(xué)上未分化的狀態(tài)。
[0091] 可采用在細(xì)胞上方保持活躍的空氣流動(dòng)同時(shí)控制溫度和濕度的其他脫水方法。
[0092] 可采用可氣密密封的罩或袋來儲(chǔ)存基本干燥的細(xì)胞，W使得內(nèi)容物可被密封W在 與用于細(xì)胞脫水的條件相似的氣候條件下儲(chǔ)存。基本干燥儲(chǔ)存的細(xì)胞最適宜在恒溫如室溫 下儲(chǔ)存。 調(diào)亡抑制劑
[0093] 在某些實(shí)施方案中，本文所述的預(yù)脫水制劑、脫水制劑和/或再水化制劑包含至少 一種調(diào)亡抑制劑。在某些實(shí)施方案中，該至少一種調(diào)亡抑制劑阻斷細(xì)胞調(diào)亡的誘導(dǎo)。在其他 實(shí)施方案中，該調(diào)亡抑制劑阻斷ER應(yīng)激通路中的至少一個(gè)步驟，且優(yōu)選為可逆抑制劑。
[0094] 在某些實(shí)施方案中，所述脫水制劑包含至少一種調(diào)亡抑制劑。在其他實(shí)施方案中， 所述預(yù)脫水制劑或再水化制劑包含至少一種調(diào)亡抑制劑，并且在其他實(shí)施方案中，所述預(yù) 脫水制劑和再水化制劑各自包含至少一種調(diào)亡抑制劑。在