混合物混合W確保均質(zhì)性。
[0143] 8.然后將所得眼用懸浮液在約40攝氏度下固化約96小時，W促進處于Al多晶型 物形式的化合物A的懸浮顆粒至其更穩(wěn)定的Az多晶型物的轉(zhuǎn)化?；衔顰的多晶型物的 性質(zhì)描述于PCT/US2013/23166中，所述專利的內(nèi)容W其全部內(nèi)容結(jié)合在此。
[0144] 9.將棚酸W將使得最終配制品濃度為約0. 8%w/v的濃度無菌地添加至所得固化 懸浮液中。
[0145] 10.然后將所得無菌溶液用于裝入眼用容器中，W用于穩(wěn)定性研究。
[0146]連巧I3-配制品1
[0147]W下配制品根據(jù)上述配制品制備實例來制備，并且用氨氧化鋼調(diào)節(jié)pH。
[014引 成分 %, w/v 化合物A,微粉化的 0.5-3 0 CMC納，低拓度 0.70 項月酸 0.8 苯扎氯鎮(zhèn) 化Oi 聚山梁醋80 化05 蹲酸鹽緩沖劑 化]2 依地酸二納 0.015 NaOH/HCl(pH調(diào)節(jié)） pH 6.5 ± 化I 純化木 適量100.00。
[0149] 連例4-配制品2
[0150] W下配制品根據(jù)上述配制品制備實例來制備，
[0151] 成分 ％, W/\ 化合物A，微粉化的 0.5-3.0 CMC#!，低招度 0.70 刪酸 0.8 苯扎氣按 化005 聚山梨醋80 化05 鱗酸鹽緩沖劑 化12 依地酸二納 0.03 NaCl 0.4 NaOH/HCI(pH廟節(jié)） pH 6.5 ±0.1 純化水 適量100.()()。
[015引連例5-配制品3
[0153] W下配制品根據(jù)上述配制品制備實例來制備。
[0154] 成分 ％, W.-V 化合物A，微粉化的 0.5-3.0 CMC巧，低招度 0 70 瑚酸 OS 苯札氯按 0.刖 聚山梨醋80 OM 蹲酸鹽緩沖劑 0.0 依地酸二納 化膽 NaC! 0.4 NaOHZHCl(pH調(diào)節(jié)) 巧妊 6,5 ±化1
[0155] 魏化米 捷畫10化謝)。
[015引連例6-配制品4
[0157] W下配制品根據(jù)上述配制品制備實例來制備。
[015 引 成分 ％,W、 化合物A，微粉化的 0.5-3.0 CMC納，低招度 0.70 刪験 0.8 苯扎氯按 0.015 聚山梨醋80 0.05 蹲酸鹽緩沖劑 化12 依地醜二錦 化03 NaCl 0.4 NaOH/HCl(班r調(diào)帶） pH 6.5i0.1 純化水 適量！00.00。
[0159] 連例7-配制品5
[0160] W下配制品根據(jù)上述配制品制備實例來制備。
[0161] 成分%,、、/、 化合物A，微粉化的 0.5-3.0 CMC納，低招度 0.70 項月酸 0.8 苯化氯矮 0.01 聚山梨酶80 0.05 蹲酸鹽緩沖劑 0.12 依地酸二納 化06 NaCl 0.4 NaOH/HCUpH調(diào)節(jié)） pH 6.5 ± 0.1
[0162] 實例8-配制品6
[0163] 應理解的是，W上配制品中的任一個還可W滲加另外的眼用藥劑（例如，拉坦前 列素）。拉坦前列素已用作局部眼用藥物，用于通過降低眼內(nèi)壓來控制青光眼或高眼壓癥的 進展。它是通過增加來自眼睛的房水的流出量（通過色素層鞏膜途徑）而起作用的前列腺 素類似物。作為Xalatan?銷售的拉坦前列素被指示用于降低患有開角型青光眼或高眼壓 癥患者的升高的眼內(nèi)壓。臨床前研究顯示，化合物A與拉坦前列素的組合使用在血壓正常 的猴子中提供顯著的IOP降低扣S2011-0172177)。
[0164] 在固化步驟之后或在如上所述的全部其他配制步驟之后，通常無菌地將拉坦前列 素添加至所述配制品中。例如可W將拉坦前列素滲加到具有3. 0%的化合物A的配制品 3(上文實例5)中，W制備單位劑量的化合物A的組合，其中拉坦前列素的濃度為約50ug/ml。已經(jīng)進行了穩(wěn)定性研究，W研究作為配制品3的化合物A的懸浮液和拉坦前列素的組 合的穩(wěn)定性。W下描述所述穩(wěn)定性研究。
[0165] 穩(wěn)定性樣品制備：
[0166] 滲加有50yg/mL的拉坦前列素的化合物A的3%懸浮液的10血樣品用于所述 穩(wěn)定性研究。使用乙醇將拉坦前列素分散到化合物A的懸浮液中。最終溶液乙醇目標為 0. 5%，因此對于IOmL的懸浮液，拉坦前列素溶解在50yL乙醇中。
[0167] 對于10血的懸浮液，需要滲加0. 5mg拉坦前列素。取50JiL含有l(wèi)Omg/mL乙酸甲 醋中的拉坦前列素的商業(yè)溶液樣品并且在真空下去除溶劑。將殘余物溶于SOiiL乙醇中。
[0168] 將用5血自動移液管（2X4. 975血）取出的9. 950血懸浮液樣品在混合下滲加乙 醇溶液。
[016引取500yL的TO樣品后，將本體溶液化U化solution)分到3個容器中，所述容器 放置于 2°C至 8°C，25°C/60RHW及 40°C/75RH下。
[0170] 在轉(zhuǎn)移中應注意的是，所述懸浮液的總體積為8. 5ml而不是IOmU運表明用于取 樣的5ml自動移液管在測量所述懸浮液方面遇到了問題。在運種情況下，溶液將為8. 5mL體 積中的0. 5mg或58. 8yL/血的懸浮液中的拉坦前列素。因此對于分析，在用乙臘稀釋50% 后，溶液中的理論拉坦前列素為29. 4yg/mL。
[0171] 物巧前列素的巧準曲線
[017引通過取25yL的lOmg/mL拉坦前列素在乙酸甲醋中的溶液的樣品來制備拉坦前列 素校準曲線樣品。在溶劑去除后，將殘余物溶于300iiL乙醇中。
[0173] 從所述乙醇溶液中移取=個等分試樣：45iiLSOiiLW及75iiL。在溶劑去除 后，將殘余物溶于含有0.5 %乙醇的1血乙臘中。所得濃度為37.5yg/mL、50yg/mLW及 62. 5yg/mL的拉坦前列素。
[0174] 為了進行分析，將所述溶液溶解在50%水中，W相應地得到約18. 75yg/mL、 25Jig/mLW及31. 25Jig/mL的拉坦前列素。
[0175] 對于每個時間點，重復所述標準品制備，并且得到良好的線性W及一致的區(qū)域計 數(shù)。
[0176] 下表1示出用巧光檢測器得到的每個濃度和時間點的區(qū)域計數(shù)數(shù)據(jù)。（所述面積 是2次注射的平均值）
[0177] 拉坦前列素的區(qū)域計數(shù)
[017引表1-時間點-校準區(qū)域計數(shù)

。180] 物巧前列素酸的巧準曲線
[0181] 還使用含有IOmg/血在乙酸甲醋中的商業(yè)溶劑來制備拉坦前列素酸的校準曲線。
[0182] 與拉坦前列素標準品相比，所述溶液在100 %乙臘中制備。
[0183] 注入溶液為5yg/血、2. 5yg/mLW及1. 25yg/血的溶液。 陽184]測定結(jié)果:
[0185] 通過滿旋混合W及超聲處理所述懸浮液，隨后用乙臘稀釋50%來制備所述穩(wěn)定性 樣品。在離屯、后，將上清液注入HPLC上。
[0186] 測定結(jié)果在W下表2中示出，其中計算濃度Wyg/mL示出。（理論濃度是 29. 4Jig/mD，
[0187] 表 2-測定（ug/ml)
[0189] *樣品含有一些拉坦前列素雜質(zhì)，例如拉坦前列素酸。 陽190]純度:
[0191] T0、2周樣品W及2°C-8°C的4周樣品中不存在拉坦前列素酸。對于4周25°C/60 和40°C/75樣品，所計算的拉坦前列素酸的值對應地是0. 4iig/mL和0. 3iig/mL。在3個 月時雜質(zhì)略有增加。對于3個月25°C/60和40°C/75樣品，所計算的拉坦前列素酸的值 對應地是0. 63Jig/mL和3. 92Jig/mL。對于3個月2°C-8°C，雜質(zhì)峰太小而不能積分。除了 3個月時的4(TC/75樣品，所有其他樣品的值低于校準曲線濃度，并且因此低于本方法的檢 測水平。
[0192] 雖然拉坦前列素（特別是在2°C-8°C與25°C/60之間）的測定幾乎相同，但是FLD 和UV中的雜質(zhì)峰隨著時間和溫度而增加。
[0193] 4周樣品得到最局的雜質(zhì)峰，2周樣品和TO緊隨其后。2°C-8°C樣品具有最小量的 變化。
[0194] 連例9-穩(wěn)定忡研究
[0195] 經(jīng)6個月的時間在5°C下對在配制品實例5中制備的配制品的穩(wěn)定性進行研究。 在1個月、2個月、3個月、6個月、9個月、12個月W及18個月時取樣并且用液相色譜進行分 析。所述穩(wěn)定性發(fā)現(xiàn)匯總?cè)缦隆?br>[0196] 配制品連例5-在5°C下18個月后，此配制品已顯示出化學穩(wěn)定性并且沒有明顯的 粒度變化。
[0197] 配制品實例5的穩(wěn)定性結(jié)果。
[019 引
陽19引 大規(guī)橫配制品制備連例
[0200] 由5. 7升的第1部分配制品（參見W下表1)制備總體積7. 6升的強度為1. 5%化 合物A的配制品，所述第1部分配制品在4(TC下攬拌72小時來制備和固化，W將懸浮的、微 粉化的活性藥物成分（API)轉(zhuǎn)化成其更加穩(wěn)定的多晶型物。在運之后，添加1.9升的含有 棚酸的第2部分配制品（參見W下表2)，棚酸使懸浮的API顆粒穩(wěn)定。在將所述配制品填 充到滴眼器瓶中之后，使用5%API過剩量在懸浮液中獲得目標API濃度。
[0201] 5. 7升第1部分配制品的制備說明：
[0202] 第1部分配制品的成分在W下表1中列出。注意，調(diào)節(jié)第1部分的成分濃度，運樣 使得只有在與第2部分的配制品合并后才能獲得最終目標濃度。
[0203] 表1第1部分配制品成分
[0204]
[020引制備250血的IN化OH溶液用于抑調(diào)節(jié)。將聚山梨醋80溶解于200血室溫注射 用水（WFI)中。將苯扎氯錠50%度AK)預先溶解于約600血室溫WFI中。將2800+100g 的70°CWFI添加至配衡的混合容器中。在攬拌下，將簇甲基纖維素鋼噴灑到混合容器中， 并且用約200血WFI將所述CMC容器沖洗3次，并且添加至所述混合容器中。將所得溶液 攬拌至少30分鐘，直到所述溶液視覺上是澄清的。添加2800+100g室溫WFI并且攬拌直 到所述溶液溫度處于或低于35°C。將憐酸二氨鋼添加至所述混合容器中，并且用約IOOmL WFI將所述憐酸二氨鋼容器沖洗3次，并且添加至所述混合容器中。攬拌憐酸二氨鋼直到完 全溶解。將乙二胺四乙酸二鋼腳TA)添加至所述混合容器中，并且用約100血WFI將所述 邸TA容器沖洗3次，并且添加至所述混合容器中。攬拌所述溶液直到邸TA完全溶解。將預 先溶解的聚山梨醋80添加至所述混合容器中，并且用約IOOmLWFI將所述容器沖洗3次，并 且添加至所述混合容器中。將所得溶液混合至少3分鐘。將預先溶解的BAK添加至所述混 合容器中，并且用約IOOmLWFI將所述BAK容器沖洗3次，并且添加至所述混合容器中且混 合至少3分鐘。將氯化鋼（化Cl)添加至所述混合容器中，并且用約200血WFI將所述化Cl 容器沖洗3次，并且添加至所述混合容器中。將混合容器混合直到化Cl完全溶解。將WFI 添加至所述混合容器中，W獲得8550±50g的目標重量（約為最終定容重量的95% )。移 取本體溶液的5mL等分試樣用于抑測試。必要時，將IOmL的IN化OH的部分添加至所述 本體溶液中，直到獲得6.5 + 0. 1的抑，在化OH多次添加之間至少混合3分鐘。用室溫WFI 定容至9000±50邑。
[0206] 利用無菌制造條件，向配備有用于攬拌的葉輪的無菌、10升、不誘鋼、溫度受控的 配制品容器中裝入120g(對于7.化的1.575%化合物A，包含5%的過剩量）的丫滅菌的、 微粉化的化合物AAPI。然后，使4000g的第1部分溶液通過潤濕且凈化的無菌過濾器并且 無菌地傳送至所述配制品容器。將所述容器W2000±50rpm攬拌20分鐘，W在第1部分溶 液中均勻地懸浮微粉化的API。將1780g的第1部分配制品的最終等分試樣無菌過濾到所述 配制品容器中，W洗涂進入本體溶液中的任何未懸浮的API，并且產(chǎn)生5700g的最終配衡重 量。在W2000 + 50巧m攬拌20分鐘W勻化所述懸浮液之后，將攬拌速度降到60化pm±50， 并且將加熱器/再循環(huán)累設(shè)定為40°CW開始加熱所述溶液至40°C±5°C。一旦所述懸浮液 達到目標溫度，即將所述懸浮液攬拌72小時。
[0207] 4.0升第2部分配制品的制備說明
[020引第2部分配制品的成分在W下表2中列出。注意，調(diào)節(jié)第2部分的成分濃度，運樣 使得只有在與第1部分的配制品合并后才能獲得最終目標濃度。
[0209]表2:第2部分配制品成分
[02U] 將2500 +100g的70°CWFI添加至配衡的混合容器中。在攬拌下，將簇甲基纖維 素鋼噴灑到混合容器中，并且用約IOOmLWFI將所述CMC容器沖洗3次，并且添加至所述混 合容器中。將溶液攬拌至少30分鐘，直到所述溶液視覺上是澄清的。添加900±100g室溫 WFI并且將所述溶液攬拌直到CMC完全溶解。將棚酸添加至所述容器中，并且用約100血 WFI將所述棚酸容器沖洗至少3次，并且將所述沖洗