物組合物，所述藥物組合物包含治療有效量的IL-2突變蛋白以及藥學(xué)上有效的稀釋劑、載體、增溶劑、乳化劑、防腐劑和/或佐劑。在某些 實(shí)施方案中，IL-2突變蛋白屬于IL-2突變蛋白Fc融合蛋白的范圍。本發(fā)明的藥物組合物 包含但不限于液體、冷凍和凍干組合物。
[0165]優(yōu)選地，調(diào)配材料在所用劑量和濃度下對(duì)接受者無(wú)毒性。在具體實(shí)施方案中，提供 包含治療有效量的含有IL-2突變蛋白的治療分子（例如IL-2突變蛋白Fc融合物）的藥 物組合物。
[0166]在某些實(shí)施方案中，藥物組合物可含有調(diào)節(jié)、維持或保持例如組合物的pH、同滲容 摩、粘度、透明度、顏色、等滲性、氣味、無(wú)菌性、穩(wěn)定性、溶解或釋放速率、吸附或滲透性的調(diào) 配材料。在此類實(shí)施方案中，合適的調(diào)配材料包括但不限于氨基酸（例如甘氨酸、谷氨酰 胺、天冬酰胺、精氨酸或賴氨酸）；抗微生物劑；抗氧化劑（例如抗壞血酸、亞硫酸鈉或亞硫 酸氫鈉）；緩沖液（例如硼酸鹽、碳酸氫鹽、Tris-HCl、檸檬酸鹽、磷酸鹽或其它有機(jī)酸）； 增量劑（例如甘露糖醇或甘氨酸）；螯合劑（例如乙二胺四乙酸（EDTA));絡(luò)合劑（例如咖 啡堿、聚乙烯吡咯烷酮、β-環(huán)糊精或羥丙基-β-環(huán)糊精）；填料；單糖；二糖；和其它碳水 化合物（例如葡萄糖、甘露糖或糊精）；蛋白質(zhì)（例如血清白蛋白、明膠或免疫球蛋白）；著 色劑、調(diào)味劑和稀釋劑；乳化劑；親水聚合物（例如聚乙烯吡咯烷酮）；低分了量多肽；成 鹽抗衡離子（例如鈉）；防腐劑（例如苯扎氯銨、苯甲酸、水楊酸、硫柳汞、苯乙醇、對(duì)羥基 苯甲酸甲酯、對(duì)羥基苯甲酸丙酯、洗必太、山梨酸或過(guò)氧化氫）；溶劑（例如甘油、丙二醇或 聚乙二醇）；糖醇（例如甘露醇或山梨糖醇）；懸浮劑；表面活性劑或濕潤(rùn)劑（例如普盧蘭 尼克（pluronic)、PEG、脫水山梨糖醇酯、聚山梨醇酯，諸如聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯、曲 通（triton)、緩血酸胺、卵磷脂、膽固醇、泰洛沙伯（tyloxapal));穩(wěn)定性增強(qiáng)劑（例如鹿 糖或山梨糖醇）；張力增強(qiáng)劑（例如堿金屬鹵化物、優(yōu)選氯化鈉或氯化鉀、甘露糖醇、山梨糖 醇）；遞送媒介物；稀釋劑；賦形劑和/或藥物佐劑。參見REMINGTON'SPHARMACEUTICAL SCIENCES，18"版，（A.R.Genrmo等），1990,MackPublishingCompany。
[0167]在某些實(shí)施方案中，本領(lǐng)域的技術(shù)人員將根據(jù)例如預(yù)期施用途徑、遞送形式和所 需劑量來(lái)確定最佳藥物組合物。參見例如REMINGTON'SPHARMACEUTICALSCIENCES，見上 文。在某些實(shí)施方案中，此類組合物可影響本發(fā)明的抗原結(jié)合蛋白的物理狀態(tài)、穩(wěn)定性、體 內(nèi)釋放速率和體內(nèi)清涂速率。在某些實(shí)施方案中，藥物組合物中的主要媒介物或載體本質(zhì) 上可為水性或非水性的。例如，合適的媒介物或載劑可為注射用水、生理鹽水溶液或人工 腦脊液，其可能會(huì)補(bǔ)充有腸胃外施用的組合物中常見的其它物質(zhì)。中性緩沖鹽水或與血清 白蛋白混合的鹽水為其它例示性媒介物。在具體實(shí)施方案中，藥物組合物包含pH值約為 7. 0-8. 5的Tris緩沖液，或pH值約為4. 0-5. 5的乙酸鹽緩沖液，并且還可包括山梨糖醇或 其合適的替代物。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，11-2突變蛋白組合物可通過(guò)將具有期望純 度的所選組合物與任選的（REMINGTON'SPHARMACEUTICALSCIENCES，見上文）混合成凍干 餅或水溶液的形式來(lái)制備以供儲(chǔ)存。此外，在某些實(shí)施方案中，IL-2突變蛋白產(chǎn)物可使用 適當(dāng)賦形劑（例如蔗糖）調(diào)配為凍干產(chǎn)物。
[0168] 本發(fā)明的藥物組合物可選擇腸胃外遞送。或者，可選擇用于吸入或通過(guò)消化道 (例如口服）遞送的組合物。此類藥學(xué)上可接受的組合物的制備在本領(lǐng)域的技術(shù)范圍內(nèi)。 調(diào)配組分優(yōu)地以施用部位可接受的濃度提供。在某些實(shí)施方案中，使用緩沖液將組合物的 pH值維持在生理pH或稍低的pH，通常在約5至約8的pH范圍內(nèi)。
[0169] 當(dāng)預(yù)期腸胃外施用時(shí)，可以不含熱原的腸胃外可接受的水溶液形式提供用于本發(fā) 明的治療組合物，其包含存于藥學(xué)上可接受媒介物中的期望IL-2突變蛋白。特別合適的 腸胃外注射用媒介物為無(wú)菌蒸餾水，其中將IL-2突變蛋白組合物調(diào)配為無(wú)菌等滲溶液，并 適當(dāng)保存。在某些實(shí)施方案中，制備可涉及用諸如可注射微球體、生物易蝕性粒子、聚合物 (例如聚乳酸或聚乙醇酸）、珠?；蛑|(zhì)體的試劑調(diào)配所需分子，這些調(diào)配物可使可經(jīng)由積 存注射遞送的產(chǎn)物控制釋放或持續(xù)釋放。在某些實(shí)施方案中，也可使用透明質(zhì)酸，其具有在 循環(huán)中促進(jìn)持續(xù)釋放時(shí)間的作用。在某些實(shí)施方案中，可用可植入藥物遞送裝置引入IL-2 突變蛋白組合物。
[0170] 其它藥物組合物對(duì)本領(lǐng)域的技術(shù)人員而言顯而易見，包括涉及IL-2突變蛋白組 合物的呈持續(xù)遞送或受控遞送調(diào)配物的調(diào)配物。本領(lǐng)域的技術(shù)人員也已知用于調(diào)配多種 其它持續(xù)或控制遞送方式（例如脂質(zhì)體載體、生物易蝕性微?；蚨嗫字榱：头e存注射） 的技術(shù)。參見例如國(guó)際專利申請(qǐng)?zhí)朠CT/US93/00829,其以引用的方式并入，并描述了用 于遞送藥物組合物的多孔聚合微粒的控制釋放。持續(xù)釋放制劑可包括半滲透性聚合物基 質(zhì)，其呈成形制品形式，例如膜或微膠囊。持續(xù)釋放基質(zhì)可包括聚酯、水凝膠、聚交酯（如 美國(guó)專利號(hào)3, 773, 919和歐洲專利申請(qǐng)公開號(hào)EP058481所公開，兩者以引用的方式并 入）、L-谷氨酸和γ-L-谷氨酸乙酯的共聚物（Sidman等，1983,Biopolymers2:547-556)， 聚（2-輕乙基-甲基丙稀酸酯）（Langer等，1981，J.Biomed.Mater.Res.I5:167-277 和 Langer，1982,Chem.Tech. 12:98-105)、乙稀乙酸乙稀酯（Langer等，1981，見上文）或 聚-D(-)-3-羥基丁酸（歐洲專利申請(qǐng)公開號(hào)EP133, 988)。持續(xù)釋放組合物還可包括 可通過(guò)本領(lǐng)域中已知的若干種方法中的任一種制備的脂質(zhì)體。參見例如Eppstein等， 1985,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A. 82:3688-3692 ;歐洲專利申請(qǐng)公開號(hào)EP036, 676;EP 088, 046和EP143, 949,這些文獻(xiàn)以引用的方式并入。
[0171] 用于體內(nèi)施用的藥物組合物通常是以無(wú)菌調(diào)配物的形式提供?？赏ㄟ^(guò)用無(wú)菌濾過(guò) 膜過(guò)濾實(shí)現(xiàn)滅菌。當(dāng)將組合物凍干時(shí)，可在凍干和復(fù)原之前或之后使用此方法進(jìn)行滅菌。用 于腸胃外施用的組合物可以凍干形式或溶液形式儲(chǔ)存。通常將腸胃外組合物置于具有無(wú)菌 存取口的容器中，例如靜脈注射溶液袋或具有可經(jīng)皮下注射針穿透的塞子的小瓶。
[0172] 本發(fā)明的各方面包括自緩沖IL-2突變蛋白調(diào)配物，其可用作藥物組合物，如國(guó)際 專利申請(qǐng)WO06138181A2(PCT/US2006/022599)中所述，其全文以引用方式并入本文。
[0173] 如上所討論，某些實(shí)施方案提供IL-2突變蛋白組合物，特別是藥物11-2突變蛋白 Fc融合蛋白，其除IL-2突變蛋白組合物外包含一種或多種賦形劑，例如在此章節(jié)和本文其 它地方說(shuō)明性描述的那些。就此而言，賦形劑可用于本發(fā)明中用于多種目的，例如調(diào)節(jié)調(diào)配 物的物理、化學(xué)或生物特性，例如調(diào)節(jié)粘度，和/或調(diào)節(jié)本發(fā)明的過(guò)程以改善有效性和/或 穩(wěn)定此類調(diào)配物和過(guò)程，以抵抗由于例如在生產(chǎn)、運(yùn)輸、儲(chǔ)存、使用前的準(zhǔn)備、施用期間及其 后存在的應(yīng)力而發(fā)生的降解及腐敗。
[0174] 可獲得多種關(guān)于就此而言有用的蛋白質(zhì)穩(wěn)定及調(diào)配材料及方法的說(shuō)明，例 如Arakawa等，〃Solventinteractionsinpharmaceuticalformulations"，Pharm Res.8 (3):285-91(1991) ;Kendrick等，〃Physicalstabilizationofproteinsinaqueous solution"，RATIONALDESIGNOFSTABLEPROTEINFORMULATIONS:THEORYANDPRACTICE， Carpenter和Manning編，PharmaceuticalBiotechnology. 13:61-84(2002)，和Randolph 等，〃Surfactant-proteininteractions"，PharmBiotechnol. 13:159-75 (2002)，其各自 以引用方式全文并入本文中；特別是以與本發(fā)明的自緩沖蛋白質(zhì)調(diào)配物的賦形劑及其方法 有關(guān)的部分、特別是關(guān)于用于獸醫(yī)和/或人醫(yī)學(xué)用途的蛋白質(zhì)藥品及方法的部分并入本文 中。
[0175] 可根據(jù)本發(fā)明的某些實(shí)施方案使用鹽以例如調(diào)節(jié)調(diào)配物的離子強(qiáng)度和/或等滲 性和/或改善蛋白質(zhì)或本發(fā)明組合物的其它成分的溶解性和/或物理穩(wěn)定性。
[0176] 眾所周知，離子可通過(guò)結(jié)合至蛋白質(zhì)表面上的帶電荷殘基并通過(guò)屏蔽蛋白質(zhì)中的 帶電荷且具極性基團(tuán)并減小其靜電相互作用、吸引及排斥相互作用的強(qiáng)度來(lái)穩(wěn)定蛋白質(zhì)的 自然狀態(tài)。離子也可通過(guò)與蛋白質(zhì)的變性肽連接（一C0NH)結(jié)合來(lái)穩(wěn)定蛋白質(zhì)的變性狀態(tài)。 此外，與蛋白質(zhì)中的帶電荷極性基團(tuán)的離子相互作用也可減小分子間靜電相互作用，并從 而防止或減少蛋白質(zhì)聚集和不溶性。
[0177] 離子物質(zhì)對(duì)蛋白質(zhì)的效應(yīng)顯著不同。已開發(fā)可用于調(diào)配本發(fā)明的藥物組合物的 許多分類等級(jí)的離子及其對(duì)蛋白質(zhì)的效應(yīng)。一實(shí)施例為Hofmeister系列，其根據(jù)離子溶 質(zhì)和極性非離子溶質(zhì)對(duì)蛋白質(zhì)在溶液中的構(gòu)象穩(wěn)定性的效應(yīng)對(duì)其進(jìn)行分級(jí)。穩(wěn)定溶質(zhì) 被稱為"親液的（kosmotropic)"。去穩(wěn)定溶質(zhì)被稱為"離液的（chaotropic)"。親液劑 (kosmotrope)常以高濃度（例如>1摩爾硫酸銨）以使得蛋白質(zhì)從溶液中沉淀（"鹽析")。 離液劑（chaotrope)通常用于使蛋白質(zhì)變性和/或溶解（"鹽溶")。離子"鹽溶"和"鹽析" 的相對(duì)有效性界定其在Hofmeister系列中的位置。
[0178] 游離氨基酸可根據(jù)本發(fā)明的各種實(shí)施方案用于IL-2突變蛋白調(diào)配物中作為增量 劑、穩(wěn)定劑和抗氧化劑以及其它標(biāo)準(zhǔn)用途?？墒褂觅嚢彼?、脯氨酸、絲氨酸和丙氨酸穩(wěn)定調(diào) 配物中的蛋白質(zhì)。甘氨酸可用于凍干以確保正確的餅結(jié)構(gòu)和特性。精氨酸可用于抑制在液 體和凍干調(diào)配物兩者中的蛋白質(zhì)聚集。甲硫氨酸可用作抗氧化劑。
[0179] 多元醇包括糖（例如甘露糖醇、蔗糖和山梨醇）和多元醇（例如甘油和丙二醇） 以及出于本文討論的目的聚乙二醇（PEG)和相關(guān)物質(zhì)。多元醇為親液的。它們是在液體及 凍干調(diào)配物兩者中用于保護(hù)蛋白質(zhì)免于物理及化學(xué)降解過(guò)程的穩(wěn)定劑。多元醇也可用于調(diào) 節(jié)調(diào)配物的張力。
[0180] 本發(fā)明的選擇實(shí)施方案中有用的多元醇特別為甘露醇，其常用于確保呈凍干調(diào)配 物的餅的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性。其確保餅的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性。其通常與冷凍保護(hù)劑如蔗糖一起使用。山 梨醇和蔗糖是其中用于調(diào)節(jié)張力以及用作穩(wěn)定劑以在運(yùn)輸期間抵抗凍-融應(yīng)力或在制備 過(guò)程中制備散料的優(yōu)選試劑。還原糖（其含有游離醛或酮基團(tuán)，例如葡萄糖及乳糖）可糖化 表面離氨酸和精氨酸殘基。因此，其通常不屬于根據(jù)本發(fā)明使用的優(yōu)選多元醇。此外，就此 而言在酸性條件下水解成果糖喝葡萄糖且由此導(dǎo)致糖化的形成此類反應(yīng)性物質(zhì)的糖（例 如蔗糖）也不屬于本發(fā)明的優(yōu)選多元醇。PEG可用于穩(wěn)定蛋白質(zhì)并用作冷凍保護(hù)劑，并且就 此而言可用于本發(fā)明。
[0181]IL-2突變蛋白調(diào)配物的實(shí)施方案還包含表面活性劑。蛋白質(zhì)分子可易于吸附于表 面上并易于變性，并由此在氣體-液體、固體-液體及液體-液體界面處聚集。這些效應(yīng)通 常與蛋白質(zhì)濃度成反比。這些不利的相互作用通常與蛋白質(zhì)濃度成反并且通常因物理攪拌 (例如在產(chǎn)品運(yùn)輸和處理期間所產(chǎn)生的那些）而加劇。
[0182] 表面活性劑常規(guī)地用于防止、最小化或降低表面吸附。就此而言，本發(fā)明的可用表 面活性劑包括聚山梨酸酯20、聚山梨酸酯80、脫水山梨糖醇聚乙氧基化物的其它脂肪酸酯 和泊洛沙姆188。
[0183] 表面活性劑也通常用于控制蛋白質(zhì)的構(gòu)象穩(wěn)定性。就此而言，表面活性劑的用途 具有蛋白質(zhì)特異性，因?yàn)槿魏谓o定表面活性劑通常將穩(wěn)定一些蛋白質(zhì)并使其它蛋白質(zhì)去穩(wěn) 定。
[0184] 聚山梨醇酯易于氧化降解并且常常以供應(yīng)狀態(tài)含有引起蛋白質(zhì)殘基側(cè)鏈（特別 甲硫氨酸）氧化的足量過(guò)氧化物。因此，應(yīng)小心使用聚山梨醇酯，并且在使用時(shí)，應(yīng)采用其 最低有效濃度。就此而言，聚山梨醇酯例示賦形劑應(yīng)以其最低有效濃度使用的一般規(guī)則。
[0185]IL-2突變蛋白調(diào)配物的實(shí)施方案還包含一種或多種抗氧化劑。在某種程度上可， 可通過(guò)維持適當(dāng)程度的環(huán)境氧氣及溫度并通過(guò)避免暴露于光下來(lái)防止藥物調(diào)配物中蛋白 質(zhì)的不利氧化。也可用抗氧化劑賦形劑來(lái)防止蛋白質(zhì)的氧化降解。就此而言，其中可用的 抗氧化劑是還原劑、氧/自由基清除劑和螯合劑。用于根據(jù)本發(fā)明的治療蛋白質(zhì)調(diào)配物的 抗氧化劑優(yōu)選為水溶性的并在產(chǎn)品的整個(gè)貯存期限期間維持其活性。就此而言，EDTA是根 據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選抗氧化劑。
[0186] 抗氧化劑可損壞蛋白質(zhì)。例如，諸如谷胱甘肽的還原劑特別可破壞分子內(nèi)的二硫 鍵。因此，用于本發(fā)明的抗氧化劑是經(jīng)選擇以特別消除或充分降低自身?yè)p壞調(diào)配物中的蛋 白質(zhì)的可能性。
[0187] 根據(jù)本發(fā)明的調(diào)配物可包括為蛋白質(zhì)輔因子并且是形成蛋白質(zhì)配位絡(luò)合物所必 需的金屬離子，例如形成某些胰島素懸浮液所必需的鋅。金屬離子也可抑制一些降解蛋白 質(zhì)的過(guò)程。然而，金屬離子也催化降解蛋白質(zhì)的物理和化學(xué)過(guò)程。
[0188] 可用鎂離子（10-120mM)來(lái)抑制天冬氨酸異構(gòu)化成異天門冬氨酸。Ca+2離子（最多 100mM)能增加人脫氧核糖核酸酶的穩(wěn)定性。然而，Mg+2、Mn+2和Zn+2可使rhDNase去穩(wěn)定。 類似地，Ca+2和Sr+2可穩(wěn)定因子VIII，其可因Mg+2、Mn+2和Zn+2、Cu+2和Fe+2而去穩(wěn)定，并且 其聚集可因ΑΓ3離子而增加。
[0189]IL-2突變蛋白調(diào)配物的實(shí)施方案還包含一種或多種防腐劑。當(dāng)開發(fā)涉及自同一 容器提取一次以上的多劑量腸胃外調(diào)配物時(shí)，防腐劑是必需的。其主要作用是抑制微生物 生長(zhǎng)并在藥物產(chǎn)品的儲(chǔ)存壽命或使用期限期間確保產(chǎn)品無(wú)菌性。常常使用的防腐劑包括 芐醇、苯酚和間甲酚。盡管防腐劑具有較長(zhǎng)的與小分子腸胃外劑一起使用的歷史，但包含 防腐劑的蛋白質(zhì)調(diào)配物的研發(fā)可具挑戰(zhàn)性。防腐劑對(duì)蛋白質(zhì)幾乎總是具有去穩(wěn)定效應(yīng)（聚 集），并且這也成為限制其在多劑量蛋白質(zhì)調(diào)配物中的使用的主要因素。迄今，大多數(shù)蛋白 質(zhì)藥物已經(jīng)調(diào)配僅用于一次性使用。然而，當(dāng)多劑量調(diào)配物成為可能時(shí)，其具有方便患者及 提高可銷售性的額外優(yōu)勢(shì)。一個(gè)良好的實(shí)例為人生長(zhǎng)激素（hGH)的多劑量調(diào)配物，其中保 存調(diào)配物的開發(fā)已導(dǎo)致更便利的多次使用注射筆呈遞的商業(yè)化。目前市場(chǎng)上可獲得至少四 種含有hGH的保存調(diào)配物的此類筆裝置。Norditropin(液體，NovoNordisk)、Nutropin AQ(液體，Genentech)&Genotropin(凍干一雙室藥筒，Pharmacia&Upjohn)含有苯酸，而 Somatrope(EliLilly)是用間甲酸調(diào)配的。
[0190] 在保存劑型的調(diào)配及開發(fā)期間需要考慮若干方面。藥物產(chǎn)品中的有效防腐劑濃度 必須進(jìn)行優(yōu)化。這需要在所述劑型中以賦予抗微生物有效性而不會(huì)使蛋白質(zhì)穩(wěn)定性受損的 濃度范圍測(cè)試給定防腐劑。
[0191] 正如可預(yù)料的，開發(fā)含有防腐劑的液體調(diào)配物比凍干調(diào)配物更具挑戰(zhàn)。冷凍-干 燥產(chǎn)品可在不存在防腐劑的情況下凍干并在使用時(shí)利用含有稀釋劑的防腐劑復(fù)原。這縮短 了防腐劑與蛋白質(zhì)接觸的時(shí)間，從而使相關(guān)穩(wěn)定性風(fēng)險(xiǎn)顯著最小化。對(duì)于液體調(diào)配物，應(yīng)在 整個(gè)產(chǎn)品儲(chǔ)存壽命（約18個(gè)月至24個(gè)月）內(nèi)維持防腐劑有效性和穩(wěn)定性。需要注意的很 重要的一點(diǎn)是應(yīng)在含有活性藥物和所有賦形劑組份的最終調(diào)配物中展示防腐劑有效性。
[0192] IL-2突變蛋白調(diào)配物通常將尤其針對(duì)具體施用途徑和方法、具體施用劑量及施用 頻率、具體疾病的具體治療、利用生物有效性和持久性的范圍來(lái)設(shè)計(jì)。從而可根據(jù)本發(fā)明設(shè) 計(jì)調(diào)配物用于通過(guò)任何合適的途徑，包括但不限于經(jīng)口、經(jīng)耳、經(jīng)眼部、經(jīng)直腸和經(jīng)陰道以 及通過(guò)腸胃外途徑（包括靜脈內(nèi)和動(dòng)脈內(nèi)注射，肌內(nèi)注射及皮下注射）遞送。
[0193] 一旦已調(diào)配藥物組合物后，就可將其以溶液、懸浮液、凝膠、乳液、固體、晶體或脫 或凍干粉末形式儲(chǔ)存于無(wú)菌小瓶中。可將此類調(diào)配物以即用形式或以在施用之前復(fù)原的 形式（例如凍干）儲(chǔ)存。本發(fā)明也提供產(chǎn)生單一劑量施用單位的試劑盒。本發(fā)明的試劑 盒可各自含有具有干燥蛋白質(zhì)的第一容器和具有水性調(diào)配物的第二容器。在本發(fā)明的某 些實(shí)施方案中，提供含有單室和多室預(yù)填充注射器（例如，液體注射器及凍干劑注射器 (lyosyringe))的試劑盒。
[0194]要采用的包含IL-2突變蛋白的藥物組合物的治療有效量將取決于例如治療背景 和目標(biāo)。本領(lǐng)域的技術(shù)人員將理解，用于治療的適當(dāng)劑量水平部分取決于所遞送的分子、使 用IL-2突變蛋白所針對(duì)的適應(yīng)癥、施用途徑和患者的體格（體重、體表或器官尺寸）和/ 或狀況（年齡和一般健康狀況）。在某些實(shí)施方案中，臨床醫(yī)師可滴定劑量，并改變施用途 徑以獲得最佳治療效果。根據(jù)上述因素，典型的劑量范圍為約〇. 1 yg/kg至約lmg/kg或更 高。在具體實(shí)施方案中，劑量范圍可從0. 5 μ g/kg至約100 μ g/kg，任選地從2. 5 μ g/kg至 約50 μ g/kg。
[0195]治療有效量的IL-2突變蛋白優(yōu)選降低疾病癥狀的嚴(yán)重性，增加無(wú)疾病癥狀期的 頻率及持續(xù)時(shí)間，或預(yù)防因感病性所致的損傷或殘疾。
[0196]可使用醫(yī)學(xué)裝置施用藥物組合物。使用醫(yī)療裝置施用藥物組合物的實(shí)例描述 于美國(guó)專利號(hào) 4, 475, 196 ;4, 439, 196 ;4, 447, 224 ;4, 447, 233 ;4, 486, 194 ;4, 487, 603 ; 4, 596, 556 ;4, 790, 824 ;4, 941，880 ;5, 064, 413 ;5, 312, 335 ;5, 312, 335 ;5, 383, 851 和 5, 399, 163中，其全部以引用方式并入本文中。
[0197]治療自體免痔或炎件疾病的方法
[0198] 在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的IL-2突變蛋白用來(lái)治療自體免疫或炎性疾病。在優(yōu) 選的實(shí)施方案中，使用IL-2突變蛋白Fc融合蛋白。
[0199] 特別適用于用本文所公開的IL-2突變蛋白治療的疾病包括但不限于炎癥、自體 免疫疾病、特應(yīng)性疾病、副腫瘤性自體免疫疾病、軟骨炎、關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、幼年型 關(guān)節(jié)炎、幼年型類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、少關(guān)節(jié)性幼年型類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多關(guān)節(jié)性幼年型類風(fēng)濕 性關(guān)節(jié)炎、全身性幼年型類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、幼年型強(qiáng)直性脊柱炎、幼年型腸病性關(guān)節(jié)炎、幼年 型反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎、幼年型賴特（Reiter)綜合征，SEA綜合征（血清陰性、肌腱端病、關(guān)節(jié)病綜 合征）、幼年型皮肌炎、幼年型牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、幼年型硬皮病、幼年型全身性紅斑狼瘡、幼 年脈管炎、少關(guān)節(jié)性類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多關(guān)節(jié)性類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、全身性類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、 強(qiáng)直性脊柱炎、腸病性關(guān)節(jié)炎、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎、賴特綜合征、SEA綜合征（血清陰性、肌腱端 病、關(guān)節(jié)病綜合征）、皮肌炎、牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、硬皮病、脈管炎、肌炎、多發(fā)性肌炎、皮肌炎、 結(jié)節(jié)性多動(dòng)脈炎、韋格納氏肉芽腫?。╓egener'sgranulomatosis)、動(dòng)脈炎、風(fēng)濕性多肌 痛、結(jié)節(jié)病、硬化癥、原發(fā)性膽汁性硬化癥、硬化性膽管炎、斯耶格倫氏綜合征（Sjogren's syndrome)、牛皮癬、斑塊狀牛皮癬、滴狀牛皮癬、反轉(zhuǎn)型牛皮癬、膿皰性牛皮癬、紅皮性牛皮 癬、皮炎、特應(yīng)性皮炎、動(dòng)脈粥樣硬化、狼瘡、斯提耳?。⊿till'sdisease)、全身性紅斑狼 瘡（SLE)、重癥肌無(wú)力、炎性腸?。↖BD)、克羅恩病（Crohn'sdisease)、潰瘍性結(jié)腸炎、乳 糜瀉、多發(fā)性硬化癥（MS)、哮喘、C0PD、鼻竇炎、鼻竇炎伴鼻息肉、嗜酸性食管炎、嗜酸性支 氣管炎、吉巴氏綜合癥綜合征（Guillain-Barredisease)、I型糖尿病、甲狀腺炎（例如格 雷氏?。℅raves'disease))、艾迪森氏?。ˋddison'sdisease)、雷諾氏現(xiàn)象（Raynaud's phenomenon)、自體免疫肝炎、GVHD、移植排斥、腎損害、丙肝誘發(fā)的血管炎、自然性流產(chǎn)等 等。
[0200] 在優(yōu)選的實(shí)施方案中，自體免疫或炎性疾病是狼瘡、移植物抗宿主疾病、丙肝誘發(fā) 的血管炎、I型糖尿病、多發(fā)性硬化癥、自然性流產(chǎn)、特應(yīng)性疾病和炎性腸疾病。
[0201] 擴(kuò)增Treg細(xì)朐的方法
[0202] IL-2突變蛋白或IL-2突變蛋白Fc融合蛋白可用于在受試者或樣品內(nèi)擴(kuò)增Treg 細(xì)胞。本文提供增加Treg與非調(diào)節(jié)T細(xì)胞的比率的方法。所述方法包含使T細(xì)胞群體與有 效量的人IL-2突變蛋白或IL-2突變蛋白Fc融合物接觸。所述比率可通過(guò)測(cè)定T細(xì)胞群體 內(nèi)的⑶3+F0XP3+細(xì)胞與⑶3+F0XP3-細(xì)胞的比率來(lái)測(cè)量。人血液中的典型Treg頻率為總 CD4+CD3+T細(xì)胞的5%至10%，然而，在上文所示疾病中此百分比可較低或較高。在優(yōu)選的 實(shí)施方案中，Treg的百分比增加至少10%、至少20%、至少30%、至少40%、至少50%、至 少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少100%、至少200%、至少300%、至少400%、 至少500 %、至少600 %、至少700 %、至少800 %、至少900 %或至少1000 %。Treg的最大 倍數(shù)增加可針對(duì)特定疾病而變；然而，可通過(guò)IL-2突變蛋白治療獲得的最大Treg頻率為總 ⑶4+⑶3+T細(xì)胞的50 %或60 %。在某些實(shí)施方案中，將IL-2突變蛋白或IL-2突變蛋白Fc 融合蛋白施用給受試者且受試者外周血內(nèi)的調(diào)節(jié)T細(xì)胞（Treg)對(duì)非調(diào)節(jié)T細(xì)胞的比率增 加。
[0203] 由于IL-2突變蛋白及IL-2突變蛋白Fc融合蛋白相比于其它細(xì)胞類型優(yōu)先擴(kuò)增 Treg，因此它們也可用于增加受試者外周血內(nèi)調(diào)節(jié)T細(xì)胞（Treg)對(duì)自然殺傷（NK)細(xì)胞的 比率。所述比率可通過(guò)測(cè)定⑶3+F0XP3+細(xì)胞與⑶16+和/或⑶56+淋巴細(xì)胞（其為⑶19-及 ⑶3_)的比率來(lái)測(cè)量。
[0204] 預(yù)期IL-2突變蛋白或IL-2突變蛋白Fc融合蛋白可對(duì)患者的疾病或病癥具有治 療效應(yīng)，而不會(huì)顯著擴(kuò)增患者外周血內(nèi)Treg與非調(diào)節(jié)T細(xì)胞或NK細(xì)胞的比率。所述治療 效果可歸因于IL-2